一种检测鼠腺病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测鼠腺病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a）DNA提取液、b)引物、c)标准阳性模板、d)SYBRGreenI实时荧光定量PCR反应液，其特征在于：从细胞样品中提取DNA，进行荧光定量PCR反应，同时引入标准阳性模板，引物序列分别为正义引物：5’-ATAAGAAAGGATGCGGAAAAGGAC-3’，反义引物：5’-CCCAAAACAGAAGCAACAGAGTAA-3’，扩增子大小为170bp，标准阳性DNA模板由已插入鼠腺病毒保守的病毒DNA连接蛋白编码区170bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。结果更加准确、可靠、稳定性好、重复性好。灵敏度高、定量快速准确、检测范围广。也可以进行鼠腺病毒引起的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，更具体涉及一种检测鼠腺病毒的SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒，同时还涉及SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒的应用，该SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒可高效方便的对各种生物材料的小鼠源腺病毒进行定量检测和质量监控，也可以进行鼠腺病毒的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
技术介绍
鼠腺病毒(Murineadenovirusl, MAdV-1)属腺病毒科(Adenoviridae)哺乳动物属(Mastad enovirus)。腺病毒无囊膜，病毒粒子为二十面体，直径为80 IlOnm,由252个壳粒组成。一般感染哺乳动物的腺病毒相对分子质量为20 25X 106，G+C含量为48% 61%。腺病毒分布十分广泛，一般对 于人体没有致癌性，但是腺病毒容易导致呼吸道感染，如急性发热性咽喉炎、咽结膜热和肺炎等。鼠腺病毒可损害人类心血管组织，被怀疑为人类心脏损害的一种病原。因此，对小鼠慢性持续性鼠腺病毒感染诊断，对控制鼠腺病毒蔓延、防治具有积极意义。目前检测技术一般来说有血清学诊断技术、生物学试本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测鼠腺病毒的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有：a）DNA提取液、b)引物、c)标准阳性模板、d)?SYBR?Green?I实时荧光定量PCR反应液，其特征在于：从细胞样品中提取DNA，进行荧光定量PCR反应，同时引入标准阳性模板，引物序列分别为正义引物：5’?ATAAGAAAGGATGCGGAAAAGGAC??3’，反义引物：5’?CCCAAAACAGAAGCAACAGAGTAA??3’，扩增子大小为170bp，标准阳性DNA模板由已插入鼠腺病毒保守的病毒DNA连接蛋白编码区170bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。

【技术特征摘要】
1.一种检测鼠腺病毒的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有:a) DNA提取液、b)引物、c)标准阳性模板、d) SYBR Green I实时荧光定量PCR反应液，其特征在于:从细胞样品中提取DNA，进行荧光定量PCR反应，同时引入标准阳性模板，引物序列分别为正义引物:5，-ATAAGAAAGGATGCGGAAAAGGAC _3 ’，反义引物:5 ’ -CCCAAAACAGAAGCAACAGAGTAA _3 ’，扩增子大小为170bp，标准阳性DNA模板由已插入鼠腺病毒保守的病毒DNA连接蛋白编码区170bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5 α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A26tl定量并10倍梯度稀释。2.根据权利要求1所述的一种检测鼠腺病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于:所述的 DNA 提取液是由 5mL IOOmM Tris_HClpH=8.5、0.5mL 0.5M EDTAUmL 10%SDS、2mL5MNaCl>0....

【专利技术属性】
技术研发人员：肖庚富，张哲，郑从义，
申请(专利权)人：武汉珈创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：