鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒。本发明专利技术可以再同一个反应体系中同时检测DPV和E.coli这两种病毒，检测量分别为DPV 0.2ng/mL、E.coli 0.1ng/mL，虽然敏感性较建立的单一病毒(均)PCR低，但是已高于传统的血清学及Elisa检测方法，可满足临床检测的需要；同时，针对本诊断试剂盒的特异性验证结果显示：在鸭多杀性巴氏杆菌、鸭沙门氏菌和鸭疫里默氏杆菌及健康鸭组织DNA的扩增结果均为阴性，表明本诊断试剂盒的特异性良好，能够对临床样品中DPV和E.coli的单独或混合感染进行快速、准确的诊断，可满足大批量样品的快速检测需要，能够在我国基层动物预控中心或养殖企业中推广使用。

【技术实现步骤摘要】
鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒
本专利技术涉及家禽饲养及疾病防治领域，尤其是一种鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒。
技术介绍
鸭瘟(DuckPlague)，又名鸭病毒性肠炎(DuckViralEnteritis,DVE)，是由鸭瘟病毒(DuckPlagueVirus,DPV)引起鸭、鹅和天鹅等水禽的一种急性败血性传染病，因其发病率和死亡率较高，常给养禽业造成重大经济损失。大肠杆菌(Escherichiacoli,Ecoil)是家禽最常见的细菌病之一，所引其的局部或全身感染的疾病，包括大肠杆菌性败血症、大肠杆菌肉芽肿、气囊病、禽蜂窝织炎、肿头综合症、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎及卵黄囊感染。随着养殖业规模化程度不断提高，鸭群中多种疾病混合感染的情况普遍存在，为疾病的诊断带来了不小的难度。大肠杆菌病在禽类宿主防御能力下降时，常引起继发性局部或全身感染，且鸭瘟、大肠杆菌病与鸭霍乱在临床症状、病理变化及流行病学等方面都存在诸多相似[3]。因此，常规的诊断方法很难快速、准确地做出诊断，故建立鸭瘟和大肠杆菌病鉴别诊断的分子生物学方法十分必要。多重PCR的优势之处在于：可实现一份样品中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒，其特征在于：包括Taq polymerase、缓冲液2×Buffer、超纯水、混合引物及阳性对照；Taq polymerase浓度为1U/mL、缓冲液2×Buffer浓度为0.5mol/L、混合引物浓度为10mmol/L，阳性对照浓度为鸭瘟基因组DNA，大肠杆菌基因组DNA各10ng/L，阴性对照为超纯水；其中，混合引物包括引物DPV‑F 5’‑GCGTGATTCAGTGCCTAT‑3’，引物DPV‑R 5’‑GTCATCTCGGTATTGTATTGG‑3’，引物E.coli‑F5’‑AGAGATGAGAATGTGCCTTC‑3’，引物E.coli‑R ...

【技术特征摘要】
1.一种鸭瘟和大肠杆菌双重PCR诊断试剂盒，其特征在于：包括Taqpolymerase、缓冲液2×Buffer、超纯水、混合引物及阳性对照；Taqpolymerase浓度为1U/mL、缓冲液2×Buffer浓度为0.5mol/L、混合引物浓度为10mmol/L，阳性对照浓度为鸭瘟基因组DNA，大肠杆菌基因组DNA各10ng/L，阴性对照为超纯水；其中，混合引物包括引物DPV-F5’-G...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐静峨，王婧，余波，史开志，杨莉，吴位珩，
申请(专利权)人：贵州省畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：贵州,52