一种检测鲑鱼甲病毒的TaqMan荧光定量PCR试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测鲑鱼甲病毒的TaqMan荧光定量PCR试剂盒及其应用。本发明专利技术首先提供了用于检测鲑鱼甲病毒的TaqMan实时荧光定量PCR引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO.2，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明专利技术还提供了使用上述引物和探针进行TaqMan荧光定量PCR检测鲑鱼甲病毒的方法。研究表明，使用本发明专利技术的试剂盒检测鲑鱼甲病毒，具有简便、快速、准确、灵敏度高、特异性好等优点，可用于鲑鱼甲病毒六个基因型的检测，本发明专利技术的提出为鲑鱼甲病毒的检测提供了一种有效的技术手段。

【技术实现步骤摘要】
一种检测鲑鱼甲病毒的TaqMan荧光定量PCR试剂盒及其应用
本专利技术涉及用于病毒检测的引物和试剂盒，特别是涉及用于检测鲑鱼甲病毒的特异性的荧光定量PCR引物和探针，本专利技术还涉及利用该引物和探针进行鲑鱼甲病毒检测的方法和试剂盒。本专利技术属于病毒检测

技术介绍
鲑鱼甲病毒(salmonidalphavirus，SAV)隶属于披膜病毒科(Togaviridae)，甲病毒属(Alphavirus)，主要感染大西洋鲑(salmosalar)、虹鳟(Oncorhynchusmykiss)和褐鳟(SalmotruttaL.)等鲑科鱼类引起胰脏病、心肌炎症和昏睡等症状，致死率达1％～48％，并在水产养殖的各个阶段均有爆发。1995年Nelson等在爱尔兰首次从患胰脏病的大西洋鲑和虹鳟体内分离出该病毒，1997年Castric等又在法国从患昏睡病的大西洋鲑和虹鳟体内分离到SAV，目前该病广泛流行于英格兰、苏格兰、挪威、法国、波兰、意大利和西班牙等欧洲国家，据统计从1995年至2007年发病率逐年增加高达90％，每年由此疫病造成巨大的经济损失。2013年鲑鱼甲病毒感染被列入OIE水生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测鲑鱼甲病毒的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示的引物以及核苷酸序列为SEQ ID NO:4所示的探针，所述探针序列的5’端标记有报告荧光基团，3’端标记有淬灭基团。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鲑鱼甲病毒的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQIDNO:2～3所示的引物以及核苷酸序列为SEQIDNO:4所示的探针，所述探针序列的5’端标记有报告荧光基团，3’端标记有淬灭基团。2.根据权利要求1所述的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述报告荧光基团为FAM，所述淬灭基团为BHQ1。3.根据权利要求1所述的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括TaqMan荧光定量PCR扩增缓冲液。4.根据权利要求3所述的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述TaqMan荧光定量PCR扩增缓冲液为PremixExTaqMasterMix。5.根据权利要求1-4任一项所述的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括总RNA提取试剂、反转录试剂、阳性对照和阴性对照，所述的阳性对照为含有鲑鱼甲病毒E2基因的重组质粒标准品，所述的阴性对照为去离子水。6.如权利要求1-5任一项所述的TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，用于检测鲑鱼甲病毒时，包括以下步骤：(1)将待测样本匀浆，离心，取上清进行总RNA提取；(2)以步骤(1)得到的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘敏，李一经，施文，唐立杰，徐义刚，宋傲臣，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23