新的抗原结合蛋白制造技术

技术编号：8719303 阅读：163 留言：0更新日期：2013-05-17 20:49

本发明专利技术涉及与MAGE-A3结合的抗原结合蛋白如抗体、编码这种抗原结合蛋白的多核苷酸、所述抗原结合蛋白的诊断应用和制备方法。

全部详细技术资料下载

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及与人MAGE-A3结合的抗原结合蛋白如抗体、编码这种抗原结合蛋白的多核苷酸、所述抗原结合蛋白的诊断应用和制备方法。背景 “癌症-睾丸”抗原在几种类型的肿瘤中表达，但它们在正常组织中的表达限于睾丸，睾丸不可以将抗原递呈给T细胞，因为它们缺乏MHC(主要组织相容性复合体)I类分子的表达。因此，癌症-睾丸抗原被认为是肿瘤特异性抗原，并且是肿瘤免疫治疗的潜在目标。已知人MAGE-A3经常在各种人肿瘤中表达，包括黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、膀胱癌、头颈癌、鳞状食道癌和肝癌。MAGE-A3属于MAGE-A亚家族，其包括11个已知成员(MAGEA 1_6和8_12)。尽管已经报道了其他“MAGE A”(黑色素瘤抗原家族A)基因(如MAGE A7、A13_15)，这些基因的表达模式提示它们是假基因(参见，例如，Chomez等，Cancer Research, 61:5544 (2001))。11个MAGE-A基因具有位于最后的外显子中的它们的整个编码序列。与MAGE-A3基因具有最高的序列相似性的MAGE-A基因是MAGE-A6，是99 %相同的，并且这两个基因之间的差异位于最后的外显子内。与MAGE-A3接下来最密切相关的两个基因是MAGE-A2和MAGE-A12。在蛋白水平上，MAGE-A6与MAGE-A3具有95%的序列同一性，MAGE-A2与MAGE-A3具有84%的序列同一性，MAGE-A12与MAGE-A3具有85%的序列同一性。(附图说明图1)。MAGE-N是MAGE家族的新成员，是从由人肝细胞癌细胞系分离的mRNA鉴定的(...

【技术保护点】
抗原结合蛋白，其与MAGE‑A3 和 MAGE‑A6特异性结合，但其不与MAGE‑A2或MAGE‑A12特异性结合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.22 US 61/3667421.抗原结合蛋白，其与MAGE-A3和MAGE-A6特异性结合，但其不与MAGE-A2或MAGE-A12特异性结合。2.抗原结合蛋白，其与MAGE-A3和MAGE-A6特异性结合，但其不与MAGE-A亚家族的任何其他成员特异性结合。3.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其包含具有选自SEQID NO:52, SEQ IDNO: 58、SEQ ID NO:64的氨基酸序列的⑶RH3。4.根据权利要求3所述的抗原结合蛋白，其进一步包含选自如下的一个或多个或所有CDR:CDRH1 (SEQ ID NO:50)、CDRHl (SEQ ID NO:56)、CDRHl (SEQ ID NO:62)、CDRH2 (SEQID NO:51)、CDRH2 (SEQ ID NO:57),CDRHl (SEQ ID NO:63),CDRLl (SEQ ID NO:53),CDRLl(SEQ ID NO:59)、CDRLl (SEQ ID NO:65)、CDRL2 (SEQ ID NO:54)、CDRL2 (SEQ ID NO:60)、CDRL2 (SEQ ID NO:66)、CDRL3 (SEQ ID NO:55)、CDRL3 (SEQ ID NO:61)、CDRL3 (SEQ IDNO:67)。5.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其中CDRHl是SEQID NO:50,CDRH2 是 SEQ ID NO: 51，并且 CDRH3 是 SEQ ID NO: 52。6.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其中CDRHl是SEQID NO:56,CDRH2 是 SEQ ID NO: 57，并且 CDRH3 是 SEQ ID NO: 58。7.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其中CDRHl是SEQID NO:62,CDRH2 是 SEQ ID NO:63，并且 CDRH3 是 SEQ ID NO:64。8.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其中CDRLl是SEQID NO:53,CDRL2 是 SEQ ID NO: 54，并且 CDRL3 是 SEQ ID NO: 55。9.根据前述权利要求中任一`项所述的抗原结合蛋白，其中CDRLl是SEQID NO:59,CDRL2 是 SEQ ID NO:60，并且 CDRL3 是 SEQ ID NO:61。10.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其中⑶RLl是SEQID NO:65,CDRL2 是 SEQ ID NO:66，并且 CDRL3 是 SEQ ID NO:67。11.根据前述权利要求中任一项所述的抗原结合蛋白，其进一步包含下列中的至少一个: (a)与SEQID NO:39的构架区具有75%或更高的序列同一性的重链可变区受体抗体构架； (b)与SEQID NO:43的构架区具有75%或更高的序列同一性的重链可变区受体抗体构架； (c)与SEQID NO:47的构架区具有75%或更高的序列同一性的重链可变区受体抗体构架； (d)与如SEQID N0:41中所示的构架区具有75%或更高的序列同一性的轻链可变结构域受体抗体构架； (e)与如SEQID NO:45中所示的构架区具有75%或更高的序列同一性的轻链可变结构域受体抗体构架；或 (e)与如SEQ ID N0:49中所示的构架区具有75%或更高的序列同一性的轻链可变结构域受体抗体构架。12.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其包含:(i)SEQ ID NO: 47的重链可变区或与SEQ ID NO: 47具有75%或更高的序列同一性的变体重链可变区，和SEQ ID NO: 49的轻链可变区或与SEQ ID NO:49具有75%或更高的序列同一性的轻链可变区； (ii)SEQ ID NO: 39的重链可变区或与SEQ ID NO: 39具有75%或更高的序列同一性的变体重链可变区，和SEQ ID NO: 41的轻链可变区或与SEQ ID NO:41具有75%或更高的序列同一性的轻链可变区；或 (iii)SEQ ID NO: 43的重链可变区或与SEQ ID NO: 43具有75%或更高的序列同一性的变体重链可变区；和SEQ ID NO: 45的轻链可变区或与SEQ ID NO:45具有75%或更高的序列同一性的轻链可变区。13.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，包含: (a)SEQ ID NO: 52 (GGNNGFAY)的CDRH3或具有在SEQ ID NO: 52的氨基酸残基2处的Trp取代Gly的变体； (b)SEQ ID NO:50 (SDYVffN)的CDRHl或具有在SEQ ID NO:50的氨基酸残基4处的Ala取代Val的变体；(c)SEQ ID NO: 51 (YIGHSGRTSY NPSLKS)的 CDRH2，或包含在 SEQ ID NO: 51 的第 2 个氨基酸残基处的Met或Val取代He、在SEQ ID NO: 51的第4个氨基酸残基处的Tyr取代His或在SEQ ID NO: 51的第10个氨基酸残基处的Leu取代Tyr的变体；(d)SEQ ID NO: 53 (KSSQSLLNSG NQKNYLT)的 CDRLl，或包含在 SEQ ID NO: 53 的第 5个氨基酸残基处的Asn、Asp、Thr或Glu取代Ser、在SEQ ID NO: 53的第7个氨基酸残基处StJ Asp>Tyr>Val> IIe>Ser>Asn Phe、His、Gly 或 Thr 取代 Leu、在 SEQ ID NO:53 的第 14 个氨基酸残基处的Ser、Thr、Lys或Gly取代Asn ;在SEQ ID NO: 53的第15个氨基酸残基处的Phe、Asn、Ala、His、Ser或Arg取代Tyr ;或在SEQ ID NO: 53的第16个氨基酸残基处的Met、Val、Ile或Phe取代Leu的变体；(e)SEQ ID NO:54 (WTSTRDS)的 CDRL2 ;和(f)SEQ ID NO: 55 (QNDYSYPPT)的 CDRL3，或包含在 SEQ ID NO: 55 的氨基酸残基 I 处的Ser、Gly、Phe或Leu取代Gin、在SEQ ID NO: 55的氨基酸残基2处的Gln或His取代Asn ;在 SEQ ID NO: 55 的氛基酸残基 3 处的 Asn、Phe、Gly、Ser、Arg、His、Thr、Tyr 或 Val 取代 Asp、在 SEQ ID NO: 55 的氛基酸残基 4 处的 Asn、Trp Thr、Ser、Arg、Gln、His、Ala 或 Asp取代Tyr;或在SEQ ID NO: 55的氨基酸残基5处的Glu、Asn、Gly、His、Thr、Arg、Ala取代Ser、在 SEQ ID NO: 55 的氛基酸残基 6 处的 Asp、Thr> Val、Leu、His、Asn、lie、Trp> Pro 或Ser取代Tyr ;或在SEQ ID NO: 55的氨基酸残基8处的Leu、Tyr、Arg、Ile、Trp或Phe取代Pro的变体；所述抗原结合蛋白结合MAGE A3。14.权利要求13的抗原结合蛋白，其包含:(a)SEQ ID NO:52 的 CDRH3 ；(b)SEQ ID NO:50 的 CDRHl ；(c)SEQ ID NO:51 的 CDRH2 ；(d)SEQ ID NO:53 的 CDRLl ；(e)SEQ ID NO:54 的 CDRL2 ；(f)SEQ ID NO:55 的 CDRL3 ； (g)重链构架，如SEQID NO:39中所述，包含第2个氨基酸残基处的Val ;第20个氨基酸残基处的Leu ;第22个氨基酸残基处的Cys ;第24个氨基酸残基处的Val ;第26个氨基酸残基处的Gly ;第29个氨基酸残基处的Ile ;第36个氨基酸残基处的Trp ;第47个氨基酸残基处的Trp或Tyr ;第48个氨基酸残基处的Met ;第69个氨基酸残基处的Ile或Met ;第71个氨基酸残基处的Arg、Lys或Val ;第76个氨基酸残基处的Asn ;第78个氨基酸残基处的Phe ;第80个氨基酸残基处的Leu ;或第92个氨基酸残基处的Cys，其中氨基酸残基使用Kabat方案编号；和 (h)轻链构架，如SEQID NO:41中所述，包含第2个氨基酸残基处的Ile、Leu或Val ；第3个氨基酸残基处的Val、Gin、Leu或Glu ;第4个氨基酸残基处的Met或Leu ;第23个氨基酸残基处的Cys ;第35个氨基酸残基处的Trp ;第71个氨基酸残基处的Tyr或Phe ;第88个氨基酸残基处的Cys，或第98个氨基酸残基处的Phe，其中氨基酸残基使用Kabat方案编号; 并且其中所述抗原结合蛋白结合MAGE A3。15.权利要求14的抗原结合蛋白，其中 (a)所述重链构架包含第2个氨基酸残基处的Val;第20个氨基酸残基处的Leu ;第22个氨基酸残基处的Cys ;第24个氨基酸残基处的Val ;第26个氨基酸残基处的Gly ;第29个氨基酸残基处的Ile ;第36个氨基酸残基处的Trp ;第47个氨基酸残基处的Trp ;第48个氨基酸残基处的Met ;第69个氨基酸残基处的Ile ;第71个氨基酸残基处的Arg ’第76个氨基酸残基处的Asn ;第78个氨基酸残基处的Phe ;第80个氨基酸残基处的Leu ;和第92个氨基酸残基处的Cys ;其中氨基酸残基使用Kabat方案编号；和 (b)所述轻链构架包含第2个氨基酸残基处的Ile;第3个氨基酸残基处的Val ;第4个氨基酸残基处的Met ;第23个氨基酸残基处的Cys ;第35个氨基酸残基处的Trp ;第71个氨基酸残基处的Phe ;第88个氨基酸残基处的Cys，和第98个氨基酸残基处的Phe，其中氨基酸残基使用Kabat方案编号。16.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，包含: (a)SEQ ID NO:58 (QDYFDY)的CDRH3或具有在SEQ ID NO:58的氨基酸残基6处的His、Val、lie、Ser> Asp 或 Gly 取代 Tyr 的变体； (b)SEQ ID NO: 56 (TNAMS)的CDRHl，或具有在SEQ ID NO: 56的氨基酸残基2处的lie、His、Tyr、Phe、Thr、Cys、Glue 或 Asp 取代 Asn ;在 SEQ ID NO: 56 的氨基酸残基 3 处的Tyr、Trp、Gly、Thr、Leu 或 Val 取代 Ala ;在 SEQ ID NO: 56 的氨基酸残基 4 处的 Ile、Val 或Trp取代Met ;或在SEQ ID NO: 56的氨基酸残基5处的Hi S、Glu、Asn、Gin、Tyr或Thr取代Ser的变体；(c)SEQ ID NO: 57 (TITSGGGSTY YPVSVKG)的 CDRH2，或包含在 SEQ ID NO: 57 的第 I个氨基酸残基处的Gly、Tyr、Phe、Ile、Glu或Val取代Thr;在SEQ ID NO: 57的第2个氨基酸残基处的Leu、Val、Thr、Ser或Asn取代lie ^SEQ ID NO:57的第3个氨基酸残基处的Ser、Phe、Trp或His取代Thr ;在SEQ ID NO: 57的第4个氨基酸残基处的Asp、Ser或Asn取...

【专利技术属性】
技术研发人员：A贝尔格伦，N布莱斯，Y弗拉代，RM帕尔曼捷，A皮罗尔热，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人