【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分离DNA污染物降低的经纯化的RNA的方法 本专利技术涉及从含RNA和DNA的样品中分离经纯化的RNA的方法，其中经纯化的RNA中DNA污染物含量降低。另外，本专利技术涉及用于所述目的的组合物和方法。分离纯化的、完整的RNA是分子生物学、临床和生物技术应用中基因表达分析的关键步骤。现有技术中发展了许多达到该目标的方法。分离RNA最常用的方法是基于苯酚提取、用离液盐沉淀以及二氧化硅吸附的方法。例如在US4，843，155和US2008/057560中描述了使用离液盐的基于苯酚一氯仿的方法。相应方法使得从同一样品中分离纯RNA，或分离RNA、DNA和任选的蛋白质。相应方法的原理是将样品于含苯酚和离液剂的变性组合物中匀化。该匀化物通过添加不溶于水的有机溶剂，例如氯仿，来分相。接着离心，所述混合物分成含RNA的水相以及含DNA和蛋白质的中间相和有机相。为分离RNA，收集所述水相并从中分离RNA，例如通过在所述水相中加入醇来沉淀RNA。相应方法提供了基本上纯化的、未降解的RNA。然而，根据相应基于苯酚一氯仿的方法所分离的RNA中含DNA残量,该残量可通过例如逆转录聚合酶链反应...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.09.06 EP 10009219.61.一种从含RNA和DNA的样品中至少分离RNA的方法，所述方法包括: a)向样品中加入包含离液剂和苯酚的酸性变性组合物； b)加入不溶于水的有机溶剂并分离所得相，因此形成包含水相、任选的中间相和有机相的多相混合物，其中RNA聚集于所述水相且DNA和蛋白质聚集于所述有机相和/或中间相；以及 c)从所述水相分离所述RNA， 其中在最终分离所述各相前添加至少一种阳离子去污剂。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少一种阳离子去污剂具有以下一种或多种特性: a)包含带有永久性电荷的季铵阳离子； b)包含溴化铵并/或 c)选自下组:CTAB、TTAB和 DTRB。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述至少一种阳离子去污剂以溶液的形式添加。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述溶液具有一种或多种以下特性: a)所包含的至少一种阳离子去污剂的浓度选自下组:0.1%至10%、0.1%至5%、0.1%至3% 和 0.l%tol% ;和 / 或 b)包含盐，所述盐优选选自下组:氯化钠、氯化钾、氯化铵、乙酸钠、硝酸钠、氯化锂、硫酸铵、硫酸钠、硫酸锂、硫酸钾及其组合。5.如权利要求1至4中的任一项所述的方法，其特征在于，在步骤c)中通过将混合物在较低温度下离心来形成多相混合物，所述温度选自下组15° C的温度、<10° C的温度、彡7C的温度、彡5° C的温度和彡4° C的温度。6.如权利要求1至5中的任一项所述的方法，其特征在于，通过向所述水相中添加至少一种醇来分离水相中所述的RNA。7.如权利要求1至6中的任一项所述的方法，其特征在于，将所述水相与醇混合并将所述的混合物与核酸结合固定相接触来结合RNA。8.如权利要求1至7中的任一项所述的方法，其特征在于，所述醇选自下组:甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇和丁醇和/或以选自下组的浓度添加:至少20 %、至少30 % v/v、至少40 %v/v、至少 50% v/v 和至少 60% v/vo9.如权利要求1至7中的任一项所述的方法，其特征在于，所述包含离...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。