一种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法技术

本发明专利技术属于遗传工程技术领域。公开了一种高山植物长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法。该方法首次将CTAB法与SDS法相结合提取纯化长白山牛皮杜鹃基因组DNA，并且提取方法中，CTAB提取缓冲液中的PVP用量为4%，较常规方法增加了2%；?-巯基乙醇用量为4.3%，较常规方法增加了约1倍；65℃温浴时间由常规方法的1小时延长至4小时；并结合SDS法纯化所提取的基因组，成功地提取出了纯度高、质量好的长白山牛皮杜鹃基因组DNA。本发明专利技术克服了现有高山植物基因组提取困难、提取的基因组纯度低、易降解的不足，对于后续的分子水平研究及高山植物基因组的研究均具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种高山植物基因组DNA提取的方法，属于基因工程
，具体的说涉及一种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法。
技术介绍
由于高山植物环境条件恶劣，所以高山植物通常被认为是陆地上最为极端的生物，但是高山植物却也拥有丰富极具价值的基因资源。自1896年以来，作为生物进化研究中的热点和难点，高山和极地植物对生境的适应机制和策略一直倍受研究者们的关注。高山植物基因组DNA的提取技术是进行植物分子生物学研究的基本技术之一，DNA产率的高低，质量的好坏直接影响到后续实验的成败。探讨高山植物基因组DNA的提取方法是一项非常有意义的工作，为确保在农作物环境胁迫抗性育种方面提供优异种质和选择指标、为农业基础研究与基因工程提供相关基因。将这种特殊的基因资源应用在观赏陆地植物，将保护与合理利用有效结合，走人与自然和谐发展的可持续性发展道路，这不仅有利于该区域植被的生长发育、生态系统的稳定，更有利于地区经济的发展。高山植物的基因组提取方法有多种，近年来，人们一直致力于研究一种高效快速的提取方法，但是由于物种的特异性，高山植物的基因组提取起来并不是那么方便，。高山植物生存的环境温度低，辐射本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法，其特征在于：该方法采用CTAB法与SDS法相结合，即首先采用CTAB法提取牛皮杜鹃基因组DNA，然后再采用SDS法纯化所提取的基因组DNA。

【技术特征摘要】
1.一种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法，其特征在于:该方法采用CTAB法与SDS法相结合，即首先采用CTAB法提取牛皮杜鹃基因组DNA，然后再采用SDS法纯化所提取的基因组DNA。2.—种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法，其特征在于:该方法的具体步骤如下: (I )、CTAB法提取牛皮杜鹃基因组DNA: 向提取容器内加入CTAB提取缓冲液预热至65 V ;将牛皮杜鹃新鲜叶片在研磨前加入β-巯基乙醇，加入量为CTAB提取缓冲液体积的4.3%V/V，经液氮研磨成冻粉状后迅速加入到上述预热的CTAB提取缓冲液中，充分混匀；于65 °C温浴4小时；然后按常规方法提取出牛皮杜鹃基因组DNA ； (2)、结合SDS法纯化所提取的基因组DNA: 向上述提取出的牛皮杜鹃基因组DNA溶液中加入1/10体积2%的SDS’冰浴10分钟；加入1/10体积5 mo I.Γ1 KAc，冰浴30分钟；18 1:下12，000 rpm离心10分钟，取上清液；加入1/20体积2%的SDS，冰浴10分钟；加入1/20体积5 mol.L—1 KAc，冰浴30分钟；离心，取上清液；酚氯仿抽提一次，取上清液；醇沉，洗涤沉淀，溶解沉淀即为纯化的牛皮杜鹃基因组DNA。3.根据权利要求2所述的一种长白山牛皮杜鹃基因组DNA提取的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐洪伟，周晓馥，未晓巍，
申请(专利权)人：吉林师范大学，
类型：发明
国别省市：