分离核酸的方法技术

本发明专利技术涉及分离核酸的方法，具体涉及分离和/或纯化含核酸起始材料中的核酸，特别是短链核酸的方法和试剂盒，其特征在于以下方法步骤：(a)在有至少一种离液化合物和优选异丙醇存在下使起始材料与核酸结合支持材料接触从而将核酸结合于所述核酸结合支持材料，其中所述异丙醇的存在浓度为≥15％(v/v)和≤35％(v/v)，(b)任选从核酸结合支持材料洗脱结合的核酸。所述方法尤其适于纯化母体血液中的胎儿DNA。

【技术实现步骤摘要】
分离核酸的方法本专利技术专利申请是国际申请号为PCT/EP2009/003364，国际申请日为2009年5月12日，进入中国国家阶段的申请号为“200980120955.8”，专利技术名称为“分离核酸的方法”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及分离和/或纯化核酸，特别是短链核酸的方法。
技术介绍
通常按照均匀基本模式分离植物、动物或人材料的核酸，例如DNA和RNA：首先部分利用降解蛋白质的酶断裂含有核酸的所述起始材料。随后采用各种方法除去各成分。此外，可在其中核酸是游离形式，即它们不在细胞内的样品材料中分离它们。因此，游离核酸可能在人工样品混合物中产生，也可能在天然样品，例如血液中产生。此类自由循环的核酸也称为胞外核酸。纯化所述核酸的大多数现有技术方法依据以下两种分离原理：典型的方法依据一步过程，包括加入含有离液剂(在大多数情况中)和有机萃取剂(通常是苯酚和/或氯仿)的缓冲液后进行提取。不希望的相伴物质与有机相一起弃去。然后可通过分开诸相取出保留在水相中的核酸，从而分离核酸。利用毒性和有害物质，例如苯酚和/或氯仿导致该过程的重要缺点是核酸水性溶液中残留水溶性物质作为污染物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离和/或纯化含核酸起始材料中的核酸，特别是短链核酸的方法，其特征在于以下方法步骤：(a)在有至少一种离液化合物和至少一种支链和/或非支链醇，优选异丙醇存在下使起始材料与核酸结合支持材料接触从而将核酸结合于所述核酸结合支持材料，所述醇的存在浓度为≥15体积％和≤35体积％；(b)任选从核酸结合支持材料洗脱结合的核酸。

【技术特征摘要】
2008.05.30 EP 08009941.91.一种分离和/或纯化含核酸起始材料中的核酸，特别是短链核酸的方法，其特征在于以下方法步骤：(a)在有至少一种离液化合物和至少一种支链和/或非支链醇，优选异丙醇存在下使起始材料与核酸结合支持材料接触从而将核酸结合于所述核酸结合支持材料，所述醇的存在浓度为≥15体积％和≤35体积％；(b)任选从核酸结合支持材料洗脱结合的核酸。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述醇在混合物中的存在浓度为≤25体积％。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤a)中离液化合物的浓度是≥2mol/l和≤3.5mol/l，所述离液化合物选自硫氰酸盐、异硫氰酸盐或高氯酸盐。4.如权利要求1-3中一项或多项所述的方法，其特征在于以下特征中的一个或多个：a.步骤a)的混合物中离液化合物的浓度是≤4mol/l、≤3.5mol/l、≤3.2mol/l或≤3.1mol/l；和/或b.至少一种步骤(a)中的离液化合物是硫氰酸盐、异硫氰酸盐或高氯酸盐；和/或c.可采用该方法分离起始材料中存在的至少30％、50％、优选至少60％的短链核酸；和/或d.分离和/或浓缩特定长度的短链核酸，所述短链核酸选自长度≤500bp、≤400bp和/或≤300bp和/或≥50bp和/或≥100bp的核酸。5.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·瑞特，M·霍利茨，M·斯普伦加豪斯塞尔，
申请(专利权)人：恰根有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE