【技术实现步骤摘要】
核酸的分离 本申请是基于申请日为2012年5月11日, 优先权日:为2011年5月12日,申请号 为201280034773. 0 (PCT/US2012/037581),专利技术名称为:核酸的分离的专利申请的分案 申请。 本专利技术要求美国临时专利申请序列号61/485, 214、61/485, 338、61/485, 386、和 61/485, 448的权益,其每一项均于2011年5月12日提交,并且其每一项通过引用整体并入 本文。 领域 本文提供了与分离核酸相关的技术。具体地,本技术涉及从成问题的样品例如粪 便提取核酸的方法和试剂盒。 专利技术背景 从样品分离特定的靶核酸是许多医学诊断测定中的重要步骤。例如,已知基因中 的某些突变和甲基化状态是与疾病相关、伴随或预兆性的。可从样品中回收包含这些基因 的DNA并且测试具体突变和甲基化状态的存在。 实际上,这些测定需要从样品分离并测定若干基因靶。对于许多检测方法来说,检 测单个基因中的罕有突变或甲基化状态需要分离并且测试大量的DNA。这一问题在测定一 组基因时被加剧,所述基因中的每一个必须大量存在以用于稳健的诊断测试。因此,为了检 测多个基因中的罕见突变和甲基化事件,所分离的DNA必须被高度浓缩并且组成检测测定 的很大部分。 然而,这一需求带来了许多问题。例如,制备这样的量和浓度的DNA需要大的样品 作为投入物(例如具有几克例如大约2-4克的质量)以提供足够核酸用于检测并且因此需 要可从大的样品制备DNA的方法。此外,测定抑制剂常常随着DNA制品一起被分离和浓缩。 因此,通过常规方法生产的浓缩的DNA制品 ...
【技术保护点】
一种从包含核酸的粗制样品制品除去测定抑制剂的方法,所述方法包括:a)在分离所述核酸之前将不溶的聚乙烯吡咯烷酮在所述测定抑制剂与所述聚乙烯吡咯烷酮结合产生复合物的条件下加至所述粗制的样品制品;b)将所述复合物从所述粗制样品制品分离以产生含有所述核酸的澄清的样品制品。
【技术特征摘要】
2011.05.12 US 61/485,386;2011.05.12 US 61/485,338;1. 一种从包含核酸的粗制样品制品除去测定抑制剂的方法,所述方法包括: a) 在分离所述核酸之前将不溶的聚乙烯吡咯烷酮在所述测定抑制剂与所述聚乙烯吡 咯烷酮结合产生复合物的条件下加至所述粗制的样品制品; b) 将所述复合物从所述粗制样品制品分离以产生含有所述核酸的澄清的样品制品。2. 如权利要求1所述的方法,其中所述粗制样品制品是从粪便样品制备的上清液。3. 如权利要求2所述的方法,其中所述粪便样品具有至少4克的质量。4. 如权利要求2所述的方法,其中所述粪便样品具有至少8克的质量。5. 如权利要求1所述的方法,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是聚乙烯聚吡咯烷酮。6. 如权利要求1所述的方法,其中所述分离包括离心。7. 如权利要求1所述的方法,其中所述澄清的样品制品是根据一种从样品产生滤液的 方法生产的,所述方法包括: a) 将有待过滤的样品放置在一种旋转过滤器中,其包括: i) 中空主体; ii) 底部末端;和 iii) 与所述底部末端相对的开放的顶部末端, 其中所述中空主体由多孔的过滤材料制得;并且 b) 离心所述旋转过滤器, 其中在所述过滤期间,所述样品的一部分经过所述旋转过滤器的多孔的过滤材料以产 生滤液。8. 如权利要求1所述的方法,其中所述聚乙烯吡咯烷酮包含具有约100微米至约130 微米的平均直径的颗粒。9. 一种用于从包含核酸的粗制样品制品除去测定抑制剂的系统,所述系统包括: a) 用于结合所述测定抑制剂并且产生复合物的不溶的聚乙烯吡咯烷酮; b) 将所述复合物从所述粗制样品制品分离以产生包含所述核酸的澄清的样品制品的 功能性;和 c) 保留包含所述核酸的澄清的样品制品的功能性。10. 如权利要求9所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是聚乙烯聚吡咯烷酮。11. 如权利要求9所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是预量形式的。12. 如权利要求9所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮作为片剂提供。13. 如权利要求9所述的系统,其中所述分离所述复合物的功能性包括一种旋转过滤 器,其包括: a) 中空主体; b) 底部末端;和 c) 与所述底部末端相对的开放的顶部末端, 其中所述中空主体由多孔的过滤材料制得。14. 如权利要求13所述的系统,其中所述旋转过滤器的底部末端由多孔的过滤材料制 得。15. 如权利要求13所述的系统,其中所述旋转过滤器...
【专利技术属性】
技术研发人员:JJ布鲁因斯马,MJ多玛尼科,GP里德加德,邹鸿志,WG维斯伯格,HD舍诺伊,JP莱特二世,
申请(专利权)人:精密科学公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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