双顺反子共表达基因转移体及制备方法技术

本发明专利技术涉及一种双顺反子共表达基因转移体及制备方法，基因转移体的基因序列为：SEQ?ID?No.15，该基因转移体的5＇端起到3＇端止依次包括有牛核基质结合区MAR、人工构建的组合启动子CAG、抑制蛋白基因FSTN、内部核糖体进入位点IRES、绿色荧光蛋白AcGFP基因、Rabbit?globin?polyA信号区；该制备方法包括：构建载体pCAG-IRES2-AcGFP1；FSTN基因的获得和插入pCAG-IRES2-AcGFP1载体；MAR序列的获得和插入pCAG-IRES2-AcGFP1载体；质粒载体构建及获得双顺反子共表达基因转移体。本发明专利技术的基因转移体不仅是洁净的、安全的基因转移体，而且实现了任意组合的双基因共表达，通过IRES的重复利用，实现多基因共表达的目的，为改善双、多基因控制的形状如经济性状提供新的思路和途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
中的基因工程技术，具体涉及一种双顺反子共表达基因转移体的制备方法。
技术介绍
在转基因动物中 外源基因的高效表达必须依赖好的表达载体。影响外源基因高效表达的因素很多，如启动子、甲基化、基因本身结构、插入位点、调控序列(增强子、绝缘子、核基质结合区)等。CAG启动子是人工构建的组合启动子，由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡 P -肌动蛋白(chicken beta-actin)启动子组成，CAG启动子是非特异性的组成型启动子，用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。CMV是常用的启动子，在我们转基因羊的应用中，发现在转基因个体中发生甲基化，导致转基因的沉默。核基质结合区(MARs)是真核生物染色质中与核基质或核骨架特异结合的一段DNA序列。MARs参与DNA复制调控和转录调控等多种核生化过程。MA Rs的长度一般为300 — IOOObp，也有的长达几个kb，维持其活性的最小长度约是300bp，MARs是非编码序列，AT含量高达70%，不同的MARs序列不同，但往往含有本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种双顺反子共表达基因转移体，其特征在于：基因转移体的基因序列为：SEQ?ID?No.15。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李光鹏，胡晓明，于超然，杨磊，谌颜，扈廷茂，
申请(专利权)人：内蒙古大学，
类型：发明
国别省市：