对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒制造技术

技术编号:8384258 阅读:210 留言:0更新日期:2013-03-07 02:02
本发明专利技术公开了一种对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,由下述试剂组成:试剂A:将十六烷基三甲基溴化铵、NaCl、乙二胺四乙酸和羟基甲基氨基甲烷-盐酸加水制成;试剂B:蛋白酶K,溶剂是灭菌双蒸水;试剂C:乙醇水溶液;试剂D:用含MgCl2的PCR反应缓冲液、Taq?DNA聚合酶、灭菌双蒸水混合制成;试剂E:引物P1,引物P2,脱氧核糖核苷酸混合制成;试剂F:荧光探针预混溶液;试剂G:对虾白斑综合症病毒阳性质粒;灭菌双蒸水;DNA吸附柱。本发明专利技术的试剂盒检测灵敏度高,可用于养殖对虾白斑综合症病毒早期感染及跟踪监测,还能用于与该病毒增殖相关的基础科学研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种对虾白斑综合症病毒的检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
自上世纪九十年代以来,对虾白斑综合症病毒引起世界范围内养殖对虾的急性、致死性传染病,造成对虾养殖业的巨大经济损失。对虾白斑综合症病毒是一种具有囊膜的双链DNA病毒。除了对虾,该病毒也侵染海、淡水中的甲壳动物如蟹和小龙虾等。目前,该病毒引发的对虾疾病已经成为一个世界性的流行性疾病,它不仅是对虾养殖业的一个巨大的威胁,同时也危害到了整个海洋生态环境。对于甲壳动物病毒性疾病,目前还没有有效的治疗方法,病毒的早期检测和诊断仍是最重要的防治手段。因此,建立快速灵敏实用的对虾白斑综合症病毒检测技术,不仅能及时预报预测该病毒所致病害的发生,同时也是今后加强科学养殖管理,建立苗种检验检疫体系所必须的。 对虾病毒病检测技术主要包括现场目视观察法、光学显微镜检查法、电子显微镜检查法、免疫荧光检查法等。但这些技术各有其局限性。现场目视观察和光学显微镜检查法不太适用于早期检测,通常在病毒严重感染,产生明显的不可逆转的组织病变时才可得到确证;电子显微镜检查耗时长,费用高并需要特殊的实验器材;免疫荧光检测法操作繁琐,灵敏度低。PCR技术检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对虾白斑综合症病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征是由下述试剂组成:试剂A:将十六烷基三甲基溴化铵、NaCl、乙二胺四乙酸和羟基甲基氨基甲烷?盐酸加水100ml,使试剂A中含有1.5?3g的十六烷基三甲基溴化铵,NaCl的浓度为1.3?1.5M,乙二胺四乙酸的浓度为15?25mM,羟基甲基氨基甲烷?盐酸的浓度为15?25mM,调节pH=7.5制成试剂A;试剂B:浓度为20?30mg/ml的蛋白酶K,溶剂是灭菌双蒸水;试剂C:体积百分浓度为70?80%的乙醇水溶液;试剂D:按比例用10倍含MgCl2的PCR反应缓冲液2.5μl、Taq?DNA聚合酶1.5U、灭菌双蒸水17.7μl混合制成...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙金生薛淑霞董学旺
申请(专利权)人:天津市水生动物疫病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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