本实用新型专利技术涉及对虾传染性病毒的检测试剂盒，属于海洋生物病原检测技术领域。本实用新型专利技术目的提供检测试剂盒及检测方法，该检测方法更加灵敏、特异，且可缩短反应时间，减少实验步骤。检测试剂盒包括：（1）、RT-PCRbuffer管，内装2×RT-PCRbuffer；（2）、引物管，内装传染性肌肉坏死病毒正反引物；（3）、酶管，内装反转录酶及DNA聚合酶；（4）、去离子水管，内装无菌去离子水；（5）、阴性对照管，内装SPF对虾核酸；（6）、阳性对照管，内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。检测方法：包括（1）RT-PCR反应体系（2）RT-PCR反应程序。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及对虾传染性病毒的检测试剂盒及检测方法，属于海洋生物病原检测
技术介绍
传染性肌肉坏死病为2002年在巴西发现的一种危害对虾生产的新的病毒性传染病,2004年美国亚利桑纳大学Donald V. Lightner博士研究发现该病由一种新的病毒引起并将之定名为传染性肌肉坏死病毒(Infectious myonecrosis virus,简称IMNV)。这种新型病毒为双链RNA病毒，属于整体病毒科。对虾传染性肌肉坏死病毒的易感对虾种类为南美白对虾，主要是感染60-80天的幼虾。该病毒能造成感病对虾全身肌肉组织坏死，一般情况下，病理死亡发生缓慢，死亡率不高，但整个养殖过程都有死亡，累积死亡率可达70%。 目前已有的传染性肌肉坏死病毒RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)检测方法为套式RT-PCR检测方法，检测过程较为繁琐、费时。而进行对虾传染性肌肉坏死病毒早期检测并采取预防措施是对虾养殖中降低对虾传染性肌肉坏死病毒流行风险、减少对虾发病导致经济损失的有效手段，所以建立简单快速高灵敏的检测方法，以及配合该检测方法使用的病毒检测试剂盒极为重要。
技术实现思路
本技术的目的在于解决现有套式RT-PCR检测方法中存在的检测过程繁琐费时的问题，提供对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒，同时还提供了利用该试剂盒进行检测的检测方法，该检测方法灵敏、特异，且可缩短反应时间，减少实验步骤。本技术是通过以下技术方案实现的对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒，包括长方形盒体和试剂管，特殊之处在于所述盒体通过上盖开设的定位孔将试剂管安装定位其内部，所述试剂管包括并列安装的(I)、RT-PCR buffer 管，内装 2 X RT-PCR buffer ；(2)、引物管，内装传染性肌肉坏死病毒正反引物；(3)、酶管，内装反转录酶及DNA聚合酶；(4)、去离子水管，内装无菌去离子水；(5)、阴性对照管，内装SPF对虾核酸；(6)、阳性对照管，内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。所述RT-PCR弓丨物对包括正向引物序列5，-CCAACATACGGTACAGTGGCAG-3 ’反向引物序列5，-ATCGGTTGCCCAGGATACAAG-3 ’产物长度为123bp。对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测方法如下(I) RT-PCR 反应体系权利要求1.对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT-PCR检测试剂盒，包括长方形盒体和试剂管，特征在于所述盒体通过上盖开设的定位孔将试剂管安装定位其内部，所述试剂管包括并列安装的(1)、RT-PCRbuffer 管，内装 2 X RT-PCR buffer ； (2)、引物管，内装传染性肌肉坏死病毒正反引物； (3)、酶管，内装反转录酶及DNA聚合酶； (4)、去离子水管，内装无菌去离子水； (5)、阴性对照管，内装SPF对虾核酸； (6)、阳性对照管，内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。专利摘要本技术涉及对虾传染性病毒的检测试剂盒，属于海洋生物病原检测
本技术目的提供检测试剂盒及检测方法，该检测方法更加灵敏、特异，且可缩短反应时间，减少实验步骤。检测试剂盒包括(1)、RT-PCRbuffer管，内装2×RT-PCRbuffer；(2)、引物管，内装传染性肌肉坏死病毒正反引物；(3)、酶管，内装反转录酶及DNA聚合酶；(4)、去离子水管，内装无菌去离子水；(5)、阴性对照管，内装SPF对虾核酸；(6)、阳性对照管，内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。检测方法包括(1)RT-PCR反应体系(2)RT-PCR反应程序。文档编号C12Q1/70GK202530089SQ201220006340公开日2012年11月14日 申请日期2012年1月9日 优先权日2011年6月18日专利技术者刘鸿玲, 谢玮, 闫冬春 申请人:鲁东大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
对虾传染性肌肉坏死病毒一步法RT？PCR检测试剂盒，包括长方形盒体和试剂管，特征在于所述盒体通过上盖开设的定位孔将试剂管安装定位其内部，所述试剂管包括并列安装的：（1）、RT？PCR？buffer管，内装2×RT？PCR？buffer；（2）、引物管，内装传染性肌肉坏死病毒正反引物；（3）、酶管，内装反转录酶及DNA聚合酶；（4）、去离子水管，内装无菌去离子水；（5）、阴性对照管，内装SPF对虾核酸；（6）、阳性对照管，内装传染性肌肉坏死病毒cDNA阳性克隆。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：闫冬春，刘鸿玲，谢玮，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：实用新型
国别省市：
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