一种快速检测牛奶中支原体的方法技术

本发明专利技术提供一种快速检测牛奶中支原体的方法，涉及牛奶中微生物检测技术领域；首先向牛奶中加入DNA提取裂解液，对DNA进行快速提取裂解，然后加入脂肪分离液，将脂肪分离，离心后取上清液得处理奶样；向处理奶样中加支原体反应检测液，水浴处理后，加入支原体检测显色液，观察颜色变化；该方法通过快速从牛奶中提取DNA，减少了常规方法复杂耗时的步骤，借助LAMP技术，不需要使用特殊仪器，因此节约成本，降低检测难度，整个过程在1h内即可完成，极大的提高了检测效率，为治疗支原体感染疾病和阻止支原体进一步扩散赢得了时间。

Method for rapidly detecting mycoplasma in milk

The present invention provides a method for rapid detection of Mycoplasma in milk, relates to the technical field of milk microbe detection; first milk to add DNA extract of DNA lysate, rapid extraction of cracking, then add fat separation liquid, fat separation, centrifugal supernatant after processing milk samples; to milk sample testing solution with Mycoplasma reaction, after the water bath, adding the detection of Mycoplasma color liquid, observe the color change; the rapid extraction of DNA from milk, reducing the conventional method of complex and time-consuming steps, with the help of LAMP technology, do not need to use special instruments, so save the cost, reduce the difficulty of detection, the whole process can be completed in 1H that greatly improves the detection efficiency, for the treatment of mycoplasma infection disease and prevent further spread of Mycoplasma to win time.

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测牛奶中支原体的方法
本专利技术涉及牛奶中微生物检测
，具体涉及一种快速检测牛奶中支原体的方法。
技术介绍
奶牛乳房炎是对世界奶牛业造成经济损失最大的疾病之一，随着人类对公共卫生的关注，乳房炎正日益引起专家学者、乃至普通人的关注。乳房炎作为重要的动物卫生疾病，给全世界的奶牛业造成了严重影响。乳房炎导致了产奶量的降低、质量的下降，使得抗生素的治疗成为必须，与之伴随的是要承受原奶供给被污染的风险，患乳房炎的奶牛其乳汁中经常含有大量的毒素、病原微生物以及治疗后残留的抗生素，食用这种牛奶后，能引起呕吐、腹泻、发热和过敏等症状，从而严重危及人类的健康；支原体是一类能在无活细胞培养基中繁殖的最小微生物，无细胞壁，繁殖形式多样，具有高度多形性。大部分支原体都是宿主特异性的黏膜常在菌，主要寄生在鼻腔，其次在乳腺，美国首次从患乳腺炎的牛乳中分离出该病原。目前对牛奶支原体的分子鉴定主要是PCR技术，该技术虽然检测快速，但是仍然需要从牛奶中分离培养支原体，并且PCR扩增和检测需要特殊仪器，增加了检测的难度和成本，目前主要集中在实验室阶段。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测牛奶中支原体的方法，其特征在于，步骤如下：(1)从奶牛场采集牛奶样，摇匀，取0.2ml放到1.5ml离心管中；(2)向奶样中加入0.8ml DNA提取裂解液，充分混合，静置5min，期间每间隔2min充分摇动一次；(3)继续向奶样中加入0.2ml脂肪分离液，充分摇匀，静置2min；(4)静置结束后，在10000r/min的转速下离心2min；(5)离心结束后，将上清液移到离心柱中，盖上盖，10000r/min离心2min后，弃去回收管及里面液体，将离心柱放于1.5ml的离心管中，向离心柱中加100uL蒸馏水，10000r/min离心1min；(6)在反应管中加入12.5uL支原体检...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测牛奶中支原体的方法，其特征在于，步骤如下：(1)从奶牛场采集牛奶样，摇匀，取0.2ml放到1.5ml离心管中；(2)向奶样中加入0.8mlDNA提取裂解液，充分混合，静置5min，期间每间隔2min充分摇动一次；(3)继续向奶样中加入0.2ml脂肪分离液，充分摇匀，静置2min；(4)静置结束后，在10000r/min的转速下离心2min；(5)离心结束后，将上清液移到离心柱中，盖上盖，10000r/min离心2min后，弃去回收管及里面液体，将离心柱放于1.5ml的离心管中，向离心柱中加100uL蒸馏水，10000r/min离心1min；(6)在反应管中加入12.5uL支原体检测反应液，然后加入2uL步骤(5)处理后的奶样，最后加入10.5uL蒸馏水，充分混合；(7)将反应管放于63℃水浴锅中保温50min；(8)保温结束后，加入2uL支原体...

【专利技术属性】
技术研发人员：李纯锦，周虚，陈璐，赵云，饶家辉，王闯，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22