柑橘碎叶病毒的RT-LAMP检测方法技术

技术编号:8384255 阅读:277 留言:0更新日期:2013-03-07 02:02
本发明专利技术公开了一种柑橘碎叶病毒的RT-LAMP检测方法,包括反应体系,所述反应体系中含有特异性引物组,并给出了四组不同的特异性引物组,该方法具特异性强、灵敏度高、简便快速、成本低等优点,无需电泳及特殊仪器,便于在实验室和田间快速检测,该方法为柑橘碎叶病监测构建一个快速检测的技术平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于一种环介导等温扩增(ReverseTranscriptionLoop-MediatedIsothermal Amplification, RT-LAMP)分子检测方法,特别涉及ー种柑橘碎叶病毒的RT-LAMP检测方法
技术介绍
柑桔碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)是威 胁柑桔生产的重要病原之一。CTLV在我国浙江、湖南、福建和广西等地的局部地区曾造成比较严重的危害。应用和推广无病毒柑桔苗木是CTLV防治的有效措施。目前,柑桔无病毒苗木三级繁育体系已在我国多个柑桔产区建立,无病毒苗木得到了大面积的推广。为保证种苗安全,必须对采穗母本树进行定期鉴定,并对感染病毒的良种进行脱毒处理。这必然要求快速、灵敏的病毒检测技术。CTLV是发状病毒属(Capillovirus)正义单链RNA病毒,病毒粒子呈弯曲线状,大小约为600 700nmX 15nm,基因组全长约6496nt, 5’端具帽子结构,3’端具Poly(A)尾巴。目前应用腊斯克枳橙等指示植物鉴定是CTLV检测的常规手段之一,但其检测周期较长(1-2年)并易受环境条件影响。血清学检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种柑橘碎叶病毒的RT?LAMP检测方法,包括反应体系,所述反应体系中含有特异性引物组,其特征在于:所述特异性引物组为以下四组中的任意一组:第一组omp?FIP5′?AGCTTTCGGAACGTACATTCGTAATGTTGTCCCTGAGTTGAA?3′omp?BIP5′?CCTTTTGCTGATTTGGCTCGTGGTTTCTTGTATATGTTGGTGGC?3′omp?F35′?GGGAAACTGAAGAAGAGAAGAA?3′omp?B35′?CATCAGGTGTTAGACGATTCA?3′;第二组omp?FIP5′?AAGGCTCACAAAGCTTTCGGAAAACCTTTGCTGC...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:段硕周常勇李敏宋震李中安
申请(专利权)人:中国农业科学院柑桔研究所
类型:发明
国别省市:

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