同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法技术

本发明专利技术涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法，属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物，CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA，采用一步法四重RT-PCR，达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强，能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA，既能保证所提RNA的质量，也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成，极大地节约了检测时间。本发明专利技术具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点，能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，属植物保护领域。
技术介绍
烟草丛顶病(tobacco bushy top disease)于1957年在津巴布韦北部的春克旺里烟 区首次发生，此后爆发流行并造成很大损失。烟草丛顶病在我国的云南早有出现，但长期 以来由于该病仅为零星发生，未对烟草生产造成重大损失而被忽视，直到1993年在云南保 山、大理等地大面积爆发流行后才逐渐受到关注。此后该病在我国云南中西部烟区大规模 流行，给部分烟区造成毁灭性损失，发病区域除涉及保山、大理、楚雄3个州市外，昆明、玉 溪、红河、思茅、文山、西双版纳及怒江等州市也有烟草丛顶病零星发生。截止2001年，云南 省累计发病面积达51300 hm2，其中8700 hm2绝收，1400 hm2改种，直接经济损失高达2. 1亿 元，烟草丛顶病已经成为云南省自20世纪90年代以来唯一导致大面积绝产的烟草病害。烟草丛顶病由幽影病毒属的烟草丛顶病毒(TbAacco bushy top virus, TBTV)和 黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属的烟草扭脉病毒(TbAacco vein distorting virus, TVDV) 复合侵染引起。另外本文档来自技高网...

【技术保护点】
同步检测TBTV、TVDV、Sat?TBTV和TVDVaRNA的方法，其特征在于，同步检测按照下面步骤进行：（1）引物设计合成：（a）分别设计合成检测TBTV、TVDV、Sat?TBTV和TVDVaRNA的正向引物TBTVdF、TVDVdF、SatTBTVdF和TVDVaRNAdF，引物序列如下：TBTVdF：5’?TACCACACCTAAACAGCGTTG?3’，TVDVdF：5’?GCAACAGCGAGACTTTCATCT?3’，SatTBTVdF：5’?TGTTGGCCGTGGGCAGCAA?3’，TVDVaRNAdF：5’?GCGTACTGCGGAAGTCTCAC?3’，????（b）...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李凡，刘芳，陈海如，谭冠林，兰平秀，王海宁，李晓静，朱静，吴德喜，蔡红，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：