对血清淀粉样蛋白P组分特异性的抗原结合蛋白制造技术

本发明专利技术涉及结合血清淀粉样蛋白P组分(SAP)的抗原结合蛋白(诸如抗体)、编码这种抗原结合蛋白的多核苷酸、包含所述抗原结合蛋白的药物组合物和生产方法。本发明专利技术也涉及这种抗原结合蛋白在治疗或预防与淀粉样蛋白沉着有关的疾病中的用途，所述疾病包括全身性淀粉样变性、局部性淀粉样变性、阿尔茨海默氏病和II型糖尿病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对血清淀粉样蛋白P组分特异性的抗原结合蛋白
本专利技术涉及结合血清淀粉样蛋白P组分(SAP)的抗原结合蛋白(诸如抗体)、编码这种抗原结合蛋白的多核苷酸、包含所述抗原结合蛋白的药物组合物和生产方法。本专利技术也涉及这种抗原结合蛋白在治疗或预防与淀粉样蛋白沉着有关的疾病中的用途，所述疾病包括全身性淀粉样变性、局部性淀粉样变性、阿尔茨海默氏病和II型糖尿病。
技术介绍
淀粉样变性是由异常的不溶性蛋白纤维(称作淀粉样蛋白纤丝)在组织中的胞外积累造成的一种严重的且通常致命的疾病。这些源自不同形式的疾病中的超过20种不同的蛋白，但是所有淀粉样蛋白纤丝共有共同的交叉-β核心结构，且都通过通常可溶性的前体蛋白的错误折叠而衍生出(Pepys，M.B.(2006)Annu.Rev.Med.，57：223-241)。一种正常的非纤丝的血浆蛋白(即血清淀粉样蛋白P组分(SAP))也总是存在于淀粉样沉着物中，这是因为它与所有类型的淀粉样蛋白纤丝的亲和的(avid)特异性的钙依赖性的结合(Pepys等人(1979)Clin.Exp.Immunol.，38：284-293；Pepys等人(1997)Amyloid：Int.J.Exp.Clin.Invest.，4：274-295)。人SAP是血浆中的一种组成蛋白，其浓度为约20-40mg/l(Nelson等人(1991)Clin.Chim.Acta，200：191-200)，在正常个体和具有除了淀粉样变性以外的疾病的患者的组合的血浆和血管外隔室中共有约50-100mgSAP(Hawkins等人(1990)J.Clin.Invest.，86：1862-1869)。在具有淀粉样变性的患者中，SAP也特异性地聚集在淀粉样沉着物中，且在具有广泛的全身性淀粉样变性的个体中，在淀粉样蛋白中可能存在多达20,000mgSAP(Pepys等人(1994)PNAS，91：5602-5606)，所述SAP可逆地结合纤丝，并与流体相SAP集合达成平衡。对循环SAP的正常生理功能知之甚少，但是动物实验和体外研究提示在宿主防御中的作用(Noursadeghi等人(2000)PNAS，97：14584-14589))。SAP也是一种与弹性纤维和肾小球基膜有关的正常组织基质组分，尽管不知道它的功能。在淀粉样变性中，胞外淀粉样沉着物如下造成疾病：通过渐进性积累，直到它们损伤它们占据的任何组织的结构并从而损伤所述组织的功能(Pepys，M.B.(2006)Annu.Rev.Med.，57：223-241)。对淀粉样蛋白沉着存在非常罕见的任何炎症性或‘异物’应答，所述应答在组织中局部地看到，或由炎症的全身性标志物提示。全身性淀粉样变性可以涉及任何器官，通常是致命的，并在发达国家中造成约1/1000的死亡。局限性的淀粉样蛋白(局限于单个解剖学位置或组织类型)也可以是非常严重的，例如脑淀粉样蛋白血管病是出血性中风的一个重要原因。淀粉样变性的临床表现是非常多样化的，在出现显著的器官损伤之前很难作出诊断。超过20种不同的淀粉样蛋白纤丝蛋白负责不同形式的淀粉样变性，但是大幅减少各种淀粉样蛋白纤丝前体蛋白的丰度的治疗确实会停止淀粉样蛋白积累，且所述沉着物可能退化。不幸的是，有效的措施并非总是可用的，并且当它们确实存在时，是有毒的或危险的，且见效缓慢(Pepys，M.B(2006)Annu.Rev.Medd.，57：223-241)。因此，存在对这样的疗法的重大的未获满足的医学需要：所述疗法会安全地促进建立的淀粉样沉着物的清除。此外，有些其它的病症中总是存在淀粉样沉着物，最重要的是阿尔茨海默氏病(AD)和II型糖尿病，其中淀粉样蛋白沉着对疾病的发病机制(具体地，分别是认知功能和胰岛功能的丧失)的贡献尚不清楚(Pepys，M.B.(2006)Annu.Rev.Med.，57：223-241)。但是，在体内的任意别处的淀粉样沉着物经证实是病原性的，并且AD的脑沉着物和II型糖尿病的胰岛淀粉样沉着物可能也是有害的。由于在全身性淀粉样变性中清除淀粉样沉着物的治疗确定地是治疗性的(Pepys，M.B.(2006)Annu.Rev.Med.，57：223-241)，在AD和II型糖尿病中去除淀粉样沉着物也应当是临床上有益的。SAP的结合会稳定化淀粉样蛋白纤丝，保护它们免于体外蛋白酶解(Tennent等人，(1995)PNAS，92：4299-4303)，可以在体外增强淀粉样蛋白微纤维生成(Myers等人，(2006)，Biochemistry，45：2311-2321)，并在体内促成全身性淀粉样变性的发病机制(Botto等人，(1997)NatureMed.，3：855-859)。与它在所有淀粉样沉着物中的普遍存在相关联，SAP的这些性质使它成为有吸引力的治疗靶标。欧洲专利申请EP0915088公开了D-脯氨酸衍生化合物，它们是SAP与淀粉样蛋白纤丝的结合的竞争性抑制剂，还公开了它们的生产方法。在EP0915088中公开的一种优选的化合物是(R)-1-[6-[(R)-2-羧基-吡咯烷-1-基]-6-氧代-己酰基]吡咯烷-2-羧酸(CPHPC)。国际专利申请WO03/051836公开了D-脯氨酸衍生化合物的前体药物。国际专利申请WO2004/099173公开了甘油环状丙酮酸酯衍生物，它们是SAP与淀粉样蛋白纤丝的结合的竞争性抑制剂。国际专利申请WO04/059318描述了据宣称会增强纤维细胞形成的方法，所述方法包括：提供会结合SAP的组合物。这样的组合物包括抗-SAP抗体和CPHPC。WO04/059318没有公开与淀粉样蛋白沉着有关的疾病的治疗。此外，令人注目的临床和体内证据证实，SAP和它的消耗都对人类的纤维化没有任何作用(Tennent等人，(2007)ArthritisRheum.，56：2013-2017；Pepys，M.B.，Tennent，G.A.和Denton，C.P.(2007)ReplytoLetterfromPilling，D.，Buckley，C.D.，Salmon，M.和Gomer，R.G.，SerumamyloidPandfibrosisinsystemicsclerosis：commentonthearticlebyTennent等人ArthritisRheum.，56：4229-4230)。在上述专利中公开的二-D-脯氨酸化合物CPHPC会被人SAP高亲和力地结合，且意图用作在体内从淀粉样沉着物去除SAP并从而促进它们的清除的药物。SAP对CPHPC的结合会触发肝脏对所述复合物的快速清除，在施用药物的时段内消耗几乎所有的循环SAP，并去除许多、但并非所有的淀粉样蛋白结合的SAP(Pepys等人，(2002)Nature，417：254-259)。在初步临床研究(Gillmore等人，(2010)Brit.J.Haematol.，doi：10.1111/j.1365-2141.2009.08036.x)中，CPHPC的施用似乎会阻止淀粉样蛋白积累，但是它没有产生淀粉样蛋白消退，并且因为CPHPC没有从淀粉样沉着物完全去除所有SAP，需要另一种方案。国际专利申请WO2009/000926公开了与对SAP特异本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.03 US 61/3099571.一种抗体，其特异性地结合血清淀粉样蛋白P组分，其中重链可变区是SEQIDNO：28；轻链可变区是SEQIDNO：35，并且其中所述抗体包含人IgG1或IgG3人恒定结构域。2.如权利要求1定义的抗体，其由SEQIDNO：62的重链；和SEQIDNO：64的轻链组成。3.一种核酸分子，其编码在权利要求1-2中的任一项中定义的抗体。4.如权利要求3中定义的核酸分子，其由SEQIDNO：54和SEQIDNO：59组成。5.如权利要求3中定义的核酸分子，其由SEQIDNO：61和SEQIDNO：63组成。6.一种表达载体，其包含如在权利要求3、4或5中定义的核酸分子。7.一种重组宿主细胞，其包含在权利要求6中定义的表达载体。8.一种用于生产在权利要求1-2中的任一项中定义的抗体的方法，所述方法包括下述步骤：培养在权利要求7中定义的宿主细胞，和回收所述抗体。9.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：T·K·布欣德，S·K·福特，V·格马舍夫斯基，A·P·路维斯，M·B·佩皮斯，
申请(专利权)人：葛兰素集团有限公司，
类型：
国别省市：