【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种血清淀粉样蛋白A的检测方法及试剂盒，尤其涉及血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法及其检测试剂盒。
技术介绍
血清淀粉样蛋白A(serumamyloidAprotein，SAA)是一类多基因编码的多形态蛋白家族，是组织淀粉样蛋白A的前提物质，属于急性时相反应蛋白，其相对分子量约12000。在急性时相反应中，如炎症或感染急性期，经IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，在48～72小时内浓度迅速升高，可升高到最初浓度的100～1000倍，但其半衰期短，只有50分钟左右，并在疾病恢复期迅速下降。某些疾病，如病毒感染、移植排斥反应、冠心病等，SAA的敏感性高于C反应蛋白(CRP)，可为临床提供更好的参考价值，作为一个新的检测指标，SAA受到人们越来越多的关注。一方面，SAA的重要特性对在急性排异方面有很大的诊断价值。SAA的降解产物能以淀粉样蛋白A(AA)原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾...
【技术保护点】
一种血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)探针固定垫制备：将血清淀粉样蛋白A单克隆抗体按比例与活化白蛋白荧光胶乳微粒偶联反应制得血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒，再将所述血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒与羊抗兔IgG荧光胶乳微粒按一定比例混合得到混合荧光胶乳微粒，所述混合荧光胶乳微粒用荧光探针微球稀释液稀释后喷在玻璃纤维上制得探针固定垫；步骤2)免疫层析试纸条制备：将样品垫、探针固定垫、层析膜、吸水纸依次贴在PVC衬板上，将所述血清淀粉样蛋白A单克隆抗体包被在层析膜的检测线上，将羊抗兔IgG包被在层析膜控制线上，进而制得免疫层...
【技术特征摘要】
1.一种血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其特征在于，包括以
下步骤：
步骤1)探针固定垫制备：将血清淀粉样蛋白A单克隆抗体按比例与活化
白蛋白荧光胶乳微粒偶联反应制得血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微
粒，再将所述血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒与羊抗兔IgG荧光胶
乳微粒按一定比例混合得到混合荧光胶乳微粒，所述混合荧光胶乳微粒用荧光
探针微球稀释液稀释后喷在玻璃纤维上制得探针固定垫；
步骤2)免疫层析试纸条制备：将样品垫、探针固定垫、层析膜、吸水纸
依次贴在PVC衬板上，将所述血清淀粉样蛋白A单克隆抗体包被在层析膜的检
测线上，将羊抗兔IgG包被在层析膜控制线上，进而制得免疫层析试纸条；
步骤3)样品稀释液制备：将包括有牛血清白蛋白、表面活性剂、分散剂
和防腐剂的混合物与缓冲液混合均匀制得样品稀释液；
步骤4)样品检验：取血清、血浆或全血样品混合至所述样品稀释液，加
入免疫层析试纸条进行免疫层析反应，层析反应结束后经荧光检测器荧光检测。
2.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其
特征在于：步骤1)中，所述活化白蛋白荧光胶乳微粒的制备是先将荧光胶乳
微粒与活化剂反应制得活化荧光胶乳微粒，再与白蛋白按比例偶联反应得白蛋
白荧光胶乳微粒，所述白蛋白与活化荧光胶乳微粒的比例为0.05:100～0.2:100，
所述白蛋白荧光胶乳微粒进一步与活化剂反应制得所述活化白蛋白荧光胶乳微
粒，其中，所述白蛋白的种属包括人、牛、羊或鼠。
3.根据权利要求2所述的血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其
特征在于：步骤1)中，所述羊抗兔IgG荧光胶乳微粒的制备是将羊抗兔IgG
按比例与活化荧光胶乳微粒偶联反应制得，所述羊抗兔IgG与活化荧光胶乳微
粒的混合比例为0.05:100～0.2:100。
4.根据权利要求2所述的血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其
特征在于：步骤1)中，所述活化剂包括1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚
胺盐酸盐和N-羟基硫代琥珀酰亚胺，二者重量比为1:6～1:1，所述1-(3-二甲
\t氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与荧光胶乳微粒的重量比为1:100～5:100。
5.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测方法，其
特征在于：步骤1)中，所述血清淀粉样蛋白A单克隆抗体与活化白蛋白荧光
胶乳微粒的...
【专利技术属性】
技术研发人员：张华，廖平璋，张鹏，张金林，
申请(专利权)人：苏州市博纳泰科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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