融合至Fc结构域的抗VEGF单可变结构域制造技术

本发明专利技术涉及抗原结合构建体，其包含通过抗体的单链Fc区域分隔的一个或两个表位结合结构域，其中每个表位结合结构域能够结合至VEGF；涉及包含两个本发明专利技术的抗原结合构建体的二聚体，包含所述二聚体的药物组合物及其在治疗与VEGF信号转递相关的疾病中的用途，所述疾病例如糖尿病性黄斑水肿(DME)、湿性年龄相关性黄斑变性(湿性AMD)、糖尿病性视网膜病变、视网膜静脉阻塞(RVO)和角膜新生血管形成，以及编码所述抗原结合构建体的多核苷酸序列。

An anti VEGF single variable domain fused to the Fc domain

The present invention relates to constructs comprising binding antigen, separated by single stranded Fc region antibody one or two epitope binding domains, each of which can form a binding domain binding to VEGF; two of the present invention includes two antigen binding dimer constructs, comprising the two poly pharmaceutical composition the body and its use in the treatment of diseases associated with VEGF signal transduction in the disease, such as diabetic macular edema (DME), wet age-related macular degeneration (wet AMD), diabetic retinopathy, retinal vein occlusion (RVO) and the formation of corneal neovascularization, and the antigen binding polynucleotides encoding construct sequence.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】背景生长因子的血管内皮生长因子(VEGF)家族及其受体是血管发生和血管通透性的基本调节剂。VEGF家族包括VEGF-A、PIGF(胎盘生长因子)、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-E和蛇毒VEGF，并且认为每一种在血管形成模式（vascularpatterning）和血管发育中具有不同的作用。由于从8个外显子的单基因转录的mRNA的可变剪接，VEGF-A具有至少9个亚型(同种型)，其通过在信号肽剪切后剩余的氨基酸数量而确定。例如，在人中，最主要的同种型是VEGF165，其以可溶型和细胞结合型之间的平衡态存在。较长的同种型(VEGF183、VEGF189和VEGF206)具有高度带正电并介导与细胞表面的多糖以及调节其生物利用度的肝素结合的C-末端区域。所有的VEGF-A同种型都形成同二聚体，并且具有通过构成受体结合VEGF片段的大约110个N-末端残基的核心发生的结合。在正常条件下，并且在实体瘤的中心，VEGF的表达主要通过低氧条件介导，表示血管供应的短缺。低氧导致低氧诱导因子HIF-1α与组成型表达的HIF-1α的二聚化，形成结合至VEGF基因的启动子区域中的低氧响应元件的转录因子本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗原结合构建体，其包含通过抗体的单链Fc区域分隔的两个表位结合结构域，其中每个表位结合结构域能够结合至VEGF。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.07.27 US 61/5121381.抗原结合构建体，其包含通过抗体的单链Fc区域分隔的两个表位结合结构域，其中每个表位结合结构域能够结合至VEGF。
2.权利要求1的抗原结合构建体，其中每个表位结合结构域是域抗体（dAb）。
3.权利要求2的抗原结合构建体，其中一个dAb连接至所述单链Fc区域的N-末端，且另一个dAb连接至所述单链Fc区域的C-末端。
4.权利要求3的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的N-末端的所述dAb是重链dAb。
5.权利要求3的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的N-末端的所述dAb是轻链dAb。
6.权利要求3-5中任一项的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的C-末端的所述dAb是轻链dAb。
7.权利要求5或权利要求6的抗原结合构建体，其中所述轻链dAb是κ或λ轻链dAb。
8.权利要求2-7中任一项的抗原结合构建体，其中每个dAb独立地选择且包含与DOM15-26-593、DOM15-26-597、DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少90%相同的氨基酸序列。
9.权利要求2-8中任一项的抗原结合构建体，其中每个dAb独立地选择且包含与DOM15-26-593、DOM15-26-597、DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少97%相同的氨基酸序列。
10.权利要求2-9中任一项的抗原结合构建体，其中每个dAb独立地选自：DOM15-26-593、DOM15-26-597、DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236和DT02-K-044-255。
11.权利要求3-10中任一项的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的N-末端的所述dAb包含与DOM15-26-597或DT02-K-044-085的序列至少90%相同的氨基酸序列。
12.权利要求3-11中任一项的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的N-末端的所述dAb包含与DOM15-26-597或DT02-K-044-085的序列至少97%相同的氨基酸序列。
13.权利要求11或权利要求12的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的N-末端的所述dAb是DOM15-26-597或DT02-K-044-085。
14.权利要求3-13中任一项的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的C-末端的所述dAb包含与DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少90%相同的氨基酸序列。
15.权利要求3-14中任一项的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的C-末端的所述dAb包含与DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少97%相同的氨基酸序列。
16.权利要求14或权利要求15的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的C-末端的所述dAb是DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255。
17.权利要求16的抗原结合构建体，其中连接至所述单链Fc区域的C-末端的所述dAb是DT02-K-044-085。
18.权利要求2-7中任一项的抗原结合构建体，其中每个dAb独立地选择并且包含：
viii)CDR序列SEQIDNo.111、112和113中的一个或多个；
ix)CDR序列SEQIDNo.114、115和116中的一个或多个；
x)CDR序列SEQIDNo.117、118和119中的一个或多个；
xi)CDR序列SEQIDNo.120、121和122中的一个或多个；
xii)CDR序列SEQIDNo.123、124和125中的一个或多个；
xiii)CDR序列SEQIDNo.126、127和128中的一个或多个；或
xiv)CDR序列SEQIDNo.129、130和131中的一个或多个。
19.权利要求18的抗原结合蛋白，其中连接至抗体的Fc区域的N-末端的所述dAb包含一个或多个CDR序列SEQIDNo.114、115和116，且连接至抗体的Fc区域的C-末端的所述dAb包含一个或多个CDR序列SEQIDNo.117、118和119。
20.抗原结合构建体，其包含连接至抗体的单链Fc区域的一个表位结合结构域，其中所述表位结合结构域是包含与DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少90%相同的氨基酸序列的dAb，并且进一步地其中所述表位结合结构域能够结合至VEGF。
21.抗原结合构建体，其包含连接至抗体的单链Fc区域的一个表位结合结构域，其中所述表位结合结构域是包含与DT02-K-044-085、DT02-K-044-251、DT02-K-044-232、DT02-K-044-236或DT02-K-044-255的序列至少97%相同的氨基酸序列的dAb，并且进一步地其中所述表位结合结构域能够结合至VEGF。
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【专利技术属性】
技术研发人员：C阿什曼，IR卡奇波尔，Z休格斯托马斯，AP路易斯，M斯蒂沃德，
申请(专利权)人：葛兰素集团有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB