【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及Hl亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测试剂盒。
技术介绍
禽流感(Avian Influenza,Al)是禽流行性感冒的简称,是由正粘病毒科流感病毒属A型禽流感流行性感冒病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)传染病。根据A型流感病毒表面糖蛋白(Hemagglutinin, HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)的抗原性不同,禽流感病毒(AIV)可进ー步分为不同的亚型,目前已发现有16种HA亚型和9种NA亚型。AIV是ー种有包膜、单股负链、分节段的RNA病毒,病毒基因组由8个分节段负链RNA组成。AIV基因组的分节段特性使得两种或两种以上不同亚型流感病毒共同感染ー个细胞时,子代病毒在装配时其核酸片段可能以同源交換的形式发生基因重排而导致抗原转变,从而产生能引起大流行的新流行株。人类历史上几次大流感的流行毒株(H2N2、H3N2)均是禽流感病毒与人流感病毒发生基因重排而产生,而HlNl亚型AIV传播给人直接导致了 1918年世界范围内的毁灭性人类大流感流行。当前流行的甲型HlNl流感病毒的部分基因也来源于AIV。因此Hl亚型AIV虽为低致病性AIV,但具有重要的公共卫生学意义。加强Hl亚型AIV的检测和监测,对保障人类健康意义重大,而快速简便特异的检测技术有助于Hl亚型AIV的早期大規模诊断。目前禽流感病毒常采用的检测方法包括病毒鸡胚分离、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光技术(IFA)、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)、基因芯片(Gene chips)。传统的病毒鸡胚分离 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.检测或辅助检测HlNl和H1N2亚型禽流感病毒的环介导等温扩增成套引物,由简 并引物FIP-H1、简并引物BIP-H1、简并引物F3-H1、简并引物B3-H1、简并引物LF-H1、简并 引物LB-H1、简并引物FIP-N1、简并引物BIP-N1、简并引物F3-N1、简并引物B3-N1、简并引 物LF-N1、简并引物LB-N1、简并引物FIP-N2、简并引物BIP-N2、简并引物F3-N2、简并引物 B3-N2、简并引物LF-N2和简并引物LB-N2组成,它们的核苷酸序列分别为序列表中的序列 I、序列2、序列3、序列4、序列5、序列6、序列7、序列8、序列9、序列10、序列11、序列12、序 列13、序列14、序列15、序列16、序列17和序列18。2.根据权利要求I所述的成套引物,其特征在于所述成套引物中,各简并引物的摩尔 比为I. 6 u mo I所述简并引物FIP-Hl、1.6iimol所述简并引物BIP_H1、0. 2 y mol所述简并 引物F3-HU0. 2 u mo I所述简并引物B3-HU0. 8 u mo I所述简并引物LF-HU 0. 8mol所述简 并引物LB-H1U. 6iimol所述简并引物FIP_N1、1. 6 y mol所述简并引物BIP_N1、0. 2 y mol 所述简并引物F3-N1、0. 2 ii mol所述简并引物B3-N1、0. 8 y mol所述简并引物LF-Nl、0.8u mo I所述简并引物LB-Nl、1.6iimol所述简并引物FIP-N2、I. 6 y mol所述简并引物 BIP-N2.0. 2umol所述简并引物F3_N2、0. 2 y mol所述简并引物B3_N2、0. 8mol所述简并引 物LF-N2和所述0. 8 ii mol简并引物LB-N2。3.检测或辅助检测HlNl和H1N2亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增试剂或试剂 盒,其特征在于所述试剂或试剂盒包括甜菜碱、dATP、dCTP、dGTP和dTTP、Mg2+和权利要求 I或2所述的成套引物。4.根据权利要求3所述的试剂或试剂盒,其特征在于所述试剂或试剂盒中包括三 套独立包装的试剂,分别为反应试剂A、反应试剂B和反应试剂C ;所述反应试剂A含有1.6 u mo I所述简并引物FIP-Hl、1.6iimol所述简并引物BIP_H1、0. 2 y mol所述简并引物 F3-H1、0. 2iimol所述简并引物B3-Hl、0.8iimol所述简并引物LF-Hl、0.8iimol所述简并弓丨 物 LB-Hl、Immol 所述 dATP、Immol 所述 dCTP、Immol 所述 dGTP、Immol 所述 dTTP、6mmol 所述 Mg2+和Immol所述甜菜碱;所述反应试剂B含有1.6 iimol所述简并引物FIP-Nl、1.6 iimol所述简并引物BIP-Nl、 0. 2 u mol所述简并引物F3-N1、0. 2 u mo I所述简并引物B3_N1、0. 8 u mol所述简并引物 LF-Nl >0. 8 u mo I 所述简并引物 LB-N1、Immol 所述 dATP、Immol 所述 dCTP、Immol 所述 dGTP、 Immol所述dTTP、6mmol所述Mg2+和Immol所述甜菜喊;所述反应试剂C含有I. 6iimol所述简并引物FIP-N2、1. mol所述简并引物BIP-N2、 0. 2 u mol所述简并引物F3-N2、0. 2 u mo I所述简并引物B3_N2、0. 8 u mol所述简并引物 LF-N2、0. 8 u mo I 所述简并引物 LB-N2、Immol 所述 dATP、Immol 所述 dCTP、Immol 所述 dGTP、 Immol所述dTTP、6mmol所述Mg2+和Immol所述甜菜喊。5.检测或辅助检测Hl亚型禽流感病毒的环介导等温扩增成套引物,由简并引物 FIP-H1...
【专利技术属性】
技术研发人员:谢芝勋,彭宜,刘加波,谢志勤,庞耀珊,邓显文,谢丽基,范晴,
申请(专利权)人:广西壮族自治区兽医研究所,
类型:发明
国别省市:
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