【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物医学的科研和生产领域,特别涉及基于鸭瘟病毒强毒株与弱毒疫苗株UL2基因差异的PCR检测方法
技术介绍
由鸭痕病毒(Duckplague virus, DPV)感染所致的鸭痕(Duck plague, DP),又称鸭病毒性肠炎(Duck viral enteritis, DVE),是鸭、鹅、天鹅等雁形目动物的ー种急性接触 性传染病,其致病特征是血管损伤、组织出血、消化道和淋巴器官损伤。该病可导致商品水禽的产蛋量下降和死亡,在世界各养鸭地区都有分布,其预防和控制已直接关系到水禽养殖业的持续稳定发展。我国鸭瘟的预防主要采用接种弱毒疫苗,而准确的诊断、监测是有效预防和控制该病的基础和前提。目前,报道的DPV的诊断和监测方法有多种,如免疫荧光、聚合酶链式反应(PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)等,但却未见任何方法可将生产养殖中的鸭是因感染强毒鸭瘟病毒还是因已注射鸭瘟疫苗而呈现的阳性区分开。因此若已进行了鸭瘟病毒免疫的某养殖场出现鸭瘟病毒的诊断和监测出现阳性时,现在的检测方法无法判断该鸭场是因感染强毒鸭瘟病毒还是因已注射鸭瘟疫苗而呈现的阳性。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种可鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗弱毒的PCR检测方法。所用鸭瘟病毒模板是各种疑鸭瘟病毒感染的组织病料或已经在鸭胚成纤维细胞DEF上增殖后细胞病变(CPE)达60% 70%的DEF中提取,同时设立未接毒的DEF或其它相应组织材料的阴性对照。所获得的DNA模板作10倍浓度梯度稀释以检测该方法灵敏性,同时对鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、马立 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1. ー种鉴别鸭瘟病毒强毒与疫苗毒的PCR检测方法,其特征是具体步骤为a设计扩增鸭瘟病毒UL2基因的特异性引物,引物序列为上游引物Pl :5’ -ACGAGGGAGACCCAAATGAC-3’,下游引物 P2 :5’ -TTTATACTGTTCCACAAGGAAGTTG-3’ ;b按常规方法提取样品中的核酸; c. PCR检测,同时设立阴性对照;PCR检测体系具体为2X傻瓜PCR Mixtrue 12. 5 u L,Pl (20pmol/u ...
【专利技术属性】
技术研发人员:程安春,尹雪琴,汪铭书,陈孝跃,
申请(专利权)人:四川农业大学,
类型:发明
国别省市:
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