【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及病毒学和生物医药，具体涉及一种i群血清4型禽腺病毒弱毒株，尤其是在i群血清4型禽腺病毒疫苗或诊断试剂相关产品中的应用。
技术介绍
1、禽腺病毒属于腺病毒科，属于禽腺病毒属。它是一种非包膜的线性双链dna病毒，基因组长度为25-46kb，可分为fadv-a、b、c、d、e 5个物种和12个血清型(fadv-1至8a和fadv-8至11)。六面体蛋白、五面体蛋白、纤维蛋白1和纤维蛋白2是fadv-4包膜的主要结构蛋白。核衣壳蛋白主要包括px、pv、pvⅱ、pvⅲ，非结构蛋白包括e1a、e1b、e3、e4、100k和52/55k等。目前的研究表明，六面体蛋白具有中和抗原位点的功能，含有血清型特异性抗原决定簇，可用于血清分型。五面体蛋白在病毒进入细胞的过程中发挥关键作用。纤维蛋白1蛋白通过轴柄结构直接引发致病性fadv-4的感染。纤维蛋白2蛋白顶部的旋钮可以与宿主细胞结合，结合能力的强度可以用作确定病毒毒力的依据。此外，纤维蛋白2蛋白具有良好的抗原性，可诱导产生中和抗体，有效抵御fadv-4的感染。
2、禽腺病毒4型(fadv-4)可以引起心包积水-肝炎综合征(hydropericardiumhepatits syndrome，hhs)，主要侵害3～5周龄的肉鸡和蛋鸡，近年来也报道了12-25周育种鸡感染的病例。病鸡的主要明显变化包括心包腔内有大量浅黄色液体积聚，肝脏变黄明显肿大，有时可以在肝表面观察到出血和坏死，死亡率可达20％～80％，幼鸡死亡率可达80％以上。2015年起hhs在我国主要养禽省份大规模蔓延
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于至少部分地克服现有技术的不足，提供了一种。
2、为达到上述目的或目的之一，本专利技术提供了如下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供了一种i群血清4型禽腺病毒株，分类命名为i群血清4型禽腺病毒gx2019-014株avian adenovirus gx2019-014，于2023年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号是cctcc no:v202353，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
4、第二方面，本专利技术提供了一种药物，包含所述i群血清4型禽腺病毒株。
5、根据本专利技术的一个优选实施例，所述药物为一种疫苗组合物。
6、优选地，所述疫苗组合物中，将i群血清4型禽腺病毒株制备为gx2019-014株种子病毒库，其病毒滴度为tcid50＝109/ml。
7、进一步优选地，所述疫苗组合物中，所述i群血清4型禽腺病毒株可以抵抗血清4型禽腺病毒强毒株gx2017-005株致死剂量的攻击。
8、进一步优选地，所述疫苗组合物中，包含所述i群血清4型禽腺病毒株的最小单剂量制品中，gx2019-014株的剂量为4×103tcid50～1.25×104tcid50。
9、进一步优选地，所述最小单剂量制品中，gx2019-014株的最优剂量为6.25×104tcid50。进一步优选地，所述疫苗组合物中，包含有效剂量的i群血清4型禽腺病毒株，以及药学上可接受的辅料。
10、进一步优选地，对应成品的药剂类型可以为针剂，或者冻干粉剂。
11、第三方面，本专利技术提供了一种应用，包含所述的i群血清4型禽腺病毒株在制备i群血清4型禽腺病毒相关诊断试剂中的应用，或者所述的药物在制备i群血清4型禽腺病毒相关的药物中的应用；该应用不包括疾病的诊断和治疗方法。
12、本专利技术的有益效果：
13、本专利技术通过分离获得了一种i群血清4型禽腺病毒，是从中国广西壮族自治区商业养殖鸡场随机抽取的1只健康肉鸡的肝脏中分离出的，通过pcr鉴定为i群血清4型禽腺病毒，该病毒株通过蚀斑纯化后建立病毒种子库，命名为gx2019-014株，滴度为tcid50＝109/ml，通过ifa鉴定确认并保藏于中国典型培养物保藏中心。该弱毒株通过口服和滴眼+滴鼻这2种接种途径免疫4周龄spf鸡，对实验鸡100％不致病；通过胸部肌肉注射免疫既不致病又不致死的最大安全剂量为106tcid50/只。因此，该gx2019-014株为本专利技术意外分离纯化获得的一株天然弱毒株。关于免疫途径，本专利技术研究了胸部肌肉注射、口服和滴眼+滴鼻共3种，胸部肌肉注射、口服和滴眼+滴鼻这3种免疫途径后续的验证保护效果均较好。
14、对本专利技术所述gx2019-014株进行了免疫保护实验，免疫剂量为6.25×104tcid50，分别采用4周龄spf鸡研究了该gx2019-014株免疫产生的抗体情况、攻毒后的保护效果、最早免疫保护时间、以及采用土鸡完善了gx2019-014株免疫后对土鸡体重及攻毒后的保护效果，确认该gx2019-014株对spf鸡和土鸡均具有良好的免疫原性，都可以对高致病性i群血清4型禽腺病毒强毒株(gx2017-005株)的攻击提供很好的免疫保护力。提示以该gx2019-014株制备成活疫苗，避免了强毒株制备疫苗的安全隐患，也避免了灭活疫苗接种剂量大、价格高、保存空间大、免疫保护效期短的缺点，为有效预防fadv-4引起的疾病提供技术支持。
15、本专利技术还完善了gx2019-014株免疫4周龄spf鸡后，攻毒前后对血液、口/肛拭子及心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺、肌肉这8个器官的感染性，3个免疫途径均不会导致鸡机产生病毒血症，虽然口腔和泄殖腔在免疫后的第7天出现了感染高峰、攻毒后7天内口腔和泄殖腔以及心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺、肌肉这8个器官短暂存在低水平的感染性，但是攻毒7天后均检测不到病毒，因此gx2019-014株为免疫原，鸡体带毒时间短、病毒载量低，不易造成环境污染。
16、病理指标的安全性方面，进一步验证了3种途径免疫gx2019-014株后对肝功能和心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺这7个组织器官的病理影响，以及肌注接种+攻毒后对肝脏组织的保护效果。其中，天门冬氨酸氨基转移酶(ast)、总胆红素(t-bil)、丙氨酸氨基转移酶(又称谷丙转氨酶，alt)、谷氨酰转移酶(γ-gt)、碱性磷酸酶(alp)这5项肝功能常见的检测指标均未见异常，心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺这7个组织器官制备的组织切片也未见有异常的病理变化，可见本专利技术全面验证了gx2019-014株的安全性、有效剂量和全面的保护性，有助于将应用在本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种I群血清4型禽腺病毒株，命名为I群血清4型禽腺病毒GX2019-014株，于2023年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号是CCTCC NO:V202353，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
2.一种药物，包含权利要求1所述I群血清4型禽腺病毒株。
3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于：所述药物为一种疫苗组合物。
4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：将所述I群血清4型禽腺病毒株制备为GX2019-014株种子病毒库，其病毒滴度为TCID50＝109/mL。
5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：所述I群血清4型禽腺病毒株可以抵抗血清4型禽腺病毒强毒株GX2017-005株致死剂量的攻击。
6.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：在包含所述I群血清4型禽腺病毒株的最小单剂量制品中，GX2019-014株的剂量为4×103TCID50～1.25×104TCID50。
7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于：在所述最小单剂量制品中，GX2019-014株的最优剂量为6.25×10
8.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：包含有效剂量的权利要求1所述的I群血清4型禽腺病毒株，以及药学上可接受的辅料。
9.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：对应成品的药剂类型可以为针剂，或者冻干粉剂。
10.一种应用，包括权利要求1所述的I群血清4型禽腺病毒株在制备I群血清4型禽腺病毒相关诊断试剂中的应用，或者权利要求2-9任一项中所述的药物、在制备I群血清4型禽腺病毒相关的药物中的应用；所述应用不包括疾病的诊断和治疗方法。
...【技术特征摘要】
1.一种i群血清4型禽腺病毒株，命名为i群血清4型禽腺病毒gx2019-014株，于2023年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号是cctcc no:v202353，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
2.一种药物，包含权利要求1所述i群血清4型禽腺病毒株。
3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于：所述药物为一种疫苗组合物。
4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：将所述i群血清4型禽腺病毒株制备为gx2019-014株种子病毒库，其病毒滴度为tcid50＝109/ml。
5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：所述i群血清4型禽腺病毒株可以抵抗血清4型禽腺病毒强毒株gx2017-005株致死剂量的攻击。
6.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：在包含所述i...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，韦悠，邓显文，谢志勤，李小凤，黄娇玲，阮志华，张艳芳，范晴，李孟，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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