【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于同位素标记，具体涉及一种天蓝色链霉菌生产稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素的方法。
技术介绍
1、天蓝色链霉菌(streptomyces coelicolor)是抗生素代谢调控研究中非常重要的模式菌种，对它的研究已经比较深入，在2002年已经完成对其基因组基因序列的全面分析，已知天蓝色链霉菌主要可产抗生素：十一烷基灵菌红素(red)，十一烷基灵菌红素是一种免疫抑制剂，也有研究发现十一烷基灵菌红素不仅可以抑制细胞毒性t淋巴细胞的活性，还会选择性的诱导乳腺癌细胞的凋亡。
2、目前，还没有任何关于同位素标记天蓝色链霉菌的报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种稳定同位素标记天蓝色链霉菌的方法，本专利技术的方法填补了同位素标记天蓝色链霉菌的空白。
2、本专利技术提供了一种稳定同位素标记天蓝色链霉菌的方法，包括以下步骤：
3、将天蓝色链霉菌接种于改良smm培养基，进行培养，获得稳定同位素标记的天蓝色链霉菌；
4、所述改良smm培养基以15n标记的氯化铵作为唯一氮源和/或以13c标记的葡糖糖作为唯一碳源。
5、优选的，所述改良smm培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：聚乙二醇60001～100mm、硫酸镁1～100mm、tes缓冲液1～100mm、磷酸二氢钠1～100mm、磷酸氢二钾1～100mm、葡萄糖20～500mm、微量元素溶液3x10-5～3x10-4mm、氯化铵100～500mm、酸水解酪蛋白10
6、所述微量元素溶液以水为溶剂，包括以下浓度的组分：znso40.1g/l、feso40.1g/l、mncl20.1g/l、cacl20.1g/l和nacl 0.1g/l。
7、优选的，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌m145。
8、优选的，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌的一级种子液；所述一级种子液和改良smm培养基的体积比为1：25。
9、本专利技术还提供了上述方案所述的方法制备得到的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌。
10、优选的，所述稳定同位素标记的天蓝色链霉菌中包含稳定同位素标记的代谢产物；所述代谢产物包括初级代谢产物和或次级代谢产物。
11、优选的，所述稳定同位素标记的代谢产物包括稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素。
12、优选的，化学结构式如式i所示：
13、其中，n为15n和/或c为13c。
14、优选的，所述稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素提取自权利要求5或6所述的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌。
15、本专利技术还提供了上述方案所述的稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素的制备方法，包括以下步骤：
16、采用上述方案所述的方法制备得到稳定同位素标记的天蓝色链霉菌；
17、采用溶剂对所述稳定同位素标记的天蓝色链霉菌的菌体进行萃取，得到萃取液；所述溶剂包括甲醇、乙醇和乙酸乙酯中的一种或几种；
18、采用hplc分离所述萃取液中的稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素。
19、本专利技术提供了一种稳定同位素标记天蓝色链霉菌的方法，本专利技术将天蓝色链霉菌接种于以15n标记的氯化铵作为唯一氮源和/或以13c标记的葡糖糖作为唯一碳源的改良smm培养基，进行培养，获得稳定同位素标记的天蓝色链霉菌。本专利技术的方法不仅填补了同位素标记天蓝色链霉菌的空白，而且15n的标记率为83.3％，成本仅为$420左右，具有标记率高和合成成本低的优点。
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1.一种稳定同位素标记天蓝色链霉菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改良SMM培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：聚乙二醇60001～100mM、硫酸镁1～100mM、TES缓冲液1～100mM、磷酸二氢钠1～100mM、磷酸氢二钾1～100mM、葡萄糖20～500mM、微量元素溶液3x10-5～3x10-4mM、氯化铵100～500mM、酸水解酪蛋白100～500mM和甘氨酸100～500mM；
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌M145。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌的一级种子液；所述一级种子液和改良SMM培养基的体积比为1：25。
5.权利要求1～4任意一项所述的方法制备得到的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌。
6.根据权利要求5所述的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌，其特征在于，所述稳定同位素标记的天蓝色链霉菌中包含稳定同位素标记的代谢产物；所述代谢产物包括初级代谢产物和或次级代谢产物。
7.根据权利要求6所述的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌，其特征在于，所述稳定同位素标记的代谢产物包括稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素。
8.稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素，其特征在于，化学结构式如式I所示：
9.根据权利要求8所述的稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素，其特征在于，所述稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素提取自权利要求5或6所述的稳定同位素标记的天蓝色链霉菌。
10.权利要求8或9所述的稳定同位素标记的十一烷基灵菌红素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种稳定同位素标记天蓝色链霉菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改良smm培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：聚乙二醇60001～100mm、硫酸镁1～100mm、tes缓冲液1～100mm、磷酸二氢钠1～100mm、磷酸氢二钾1～100mm、葡萄糖20～500mm、微量元素溶液3x10-5～3x10-4mm、氯化铵100～500mm、酸水解酪蛋白100～500mm和甘氨酸100～500mm；
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌m145。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天蓝色链霉菌包括天蓝色链霉菌的一级种子液；所述一级种子液和改良smm培养基的体积比为1：25。
5.权利要求1～4任意一项所...
【专利技术属性】
技术研发人员：王申林，仵苗，杨博文，周舟，欧阳立明，王为善，张立新，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：
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