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ING4与OSM双基因共表达载体及其应用制造技术

技术编号:7124787 阅读:335 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于腺病毒载体领域,具体公开了一种重组腺病毒载体Ad-ING4-OSM及其制备方法:以转移质粒pAdTrack-CMV-polyA-promoter为基础,并且在其多克隆位点的BglII、SalI之间插有ING4片段,在NotI、HindIII酶切位点之间OSM片段,制得重组转移质粒pAdTrack-CMV-ING4-poly-A-promoter-OSM;将所述重组转移质粒与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒采用氯化钙法共转化BJ5183感受态细菌,筛选后经PacI酶切后再用脂质体转染QBI-293A细胞,经多轮感染和扩增后获得重组腺病毒载体Ad-ING4-OSM;该Ad-ING4-OSM组重组腺病毒与Ad-ING4、Ad-OSM单基因组相比对人喉癌Hep-2细胞及其裸鼠移植瘤呈现明显的抑瘤增效协同作用和放疗增敏协同效应;而且对抑制SPC-A1肺腺癌细胞的生长和诱导细胞凋亡呈现叠加的抑癌增效作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于腺病毒载体领域,具体涉及一种将ING4和OSM基因插入载体中形成重组载体并以此制备得到的腺病毒载体以及所得腺病毒载体的应用。
技术介绍
现有技术中,从基因方面着手探讨喉癌发生、发展机制以及治疗方法成为了近年来癌症研究的重点方向之一。肿瘤基因治疗就是将目的基因用基因转移技术导入靶细胞, 使其发挥特定的功能,继而执行对肿瘤的杀伤和抑制作用,或保护正常细胞免受化学治疗和放射治疗的损伤。自1990年Rosenberg等首次利用逆转录病毒载体基因转移技术治疗晚期癌症以来,肿瘤基因治疗有了突飞猛进的发展,越来越多的肿瘤基因治疗药物被批准进入临床试验,基因治疗有望在不久的将来成为肿瘤治疗的又一常规手段。为使众多目的基因具有更高的靶向性,杀伤性与稳定性,在载体选择方面,要从对基因表达的时间长短, 靶细胞转导效率,可能产生的毒副作用等方面综合权衡。虽然腺病毒载体在体内应用时仍存在作用时间短等问题,但因其可以感染分裂和非分裂细胞、病毒滴度高、不整合到宿主染色体中、能够同时表达多种基因等优点而被广泛用于肿瘤的基因治疗中。由于肿瘤的发生和发展是一个多阶段、多因素的复杂过程,涉及多种基因的异常本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含有ING4和OSM基因的重组转移质粒,所述含有ING4和OSM基因的基因重组转移质粒为pAdTrack-CMV-ING4-poly-A-promoter-OSM。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:杨吉成马士崟
申请(专利权)人:苏州大学
类型:发明
国别省市:32

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