本发明专利技术公开了生物素化肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统及其在肿瘤治疗中的应用。本发明专利技术的脂质体给药系统包括生物素化肿瘤坏死靶向单抗和ＰＥＧ末端共价连接链霉亲和素或亲和素的空间稳定脂质体，通过一定时间间隔给药。该脂质体给药系统在体外能特异性地靶向肿瘤细胞核抗原。通过生物素化肿瘤坏死靶向单抗预定位策略，包载阿霉素的链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体在肿瘤组织中能较好地靶向蓄积，抗肿瘤效果良好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属制药领域，涉及一种用于肿瘤治疗的主动靶向免疫脂质体载体，具体涉及一种肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统。
技术介绍
临床上常用于恶性肿瘤的治疗方案包括外科手术、放射治疗、药物化疗和基因(免疫)疗法等。其中药物化疗应用范围较广，不仅可以单独用于治疗，也可用于其它治疗方案的辅助治疗或巩固治疗。化疗药物的一般给药形式进入体内后，半衰期较短，分布广泛。为达到疗效，有时只能采用大剂量冲击的方式进行治疗，因此往往治疗药物在杀伤肿瘤的同时，对正常机体组织造成较大的损伤，带来较大的毒副作用。为了实现降低毒副作用、提高化疗药物疗效的目标，一个有效的方式就是通过药物剂型、药物修饰等的手段实现化疗药物的靶向传递，即最大限度地增加特定部位(如肿瘤)的药物浓度，减少化疗药物在正常组织器官中的分布。肿瘤的靶向治疗是利用肿瘤组织的某些生理特征或肿瘤细胞所具有的区别于正常细胞的某些特异性结构分子作为靶点，使用特定的递药系统或能与靶分子特异结合的单抗、配体等靶向肿瘤的治疗方法。肿瘤坏死治疗(Tumor NecrosisTherapy，TNT)是靶向治疗的有效方法之一。相对于正常细胞，肿瘤细胞增殖迅速并伴有异常分化，过快的细胞增殖引起瘤组织内部的血供障碍，从而引发细胞变性坏死。肿瘤组织内的微血管也因为快速增长和瘤细胞某些分泌成分的作用，在结构和功能上呈现出某些缺陷如细胞膜成分缺失，通透性增强等。这种缺陷有利于瘤组织的血流和营养灌输，也为靶向分子的通透并与靶点结合提供了帮助。在肿瘤坏死部位，细胞坏死后暴露出DNA和组蛋白，形成TNT治疗的靶点(Sharifi J，et al.Hybridoma and Hybridomics.2001，20305-312；Gaffar SA，et al.Journal of Immunoassay.1991，121-14)。TNT治疗的原理是利用肿瘤组织微血管和细胞膜“易漏”(leaky)的特点，利用能与细胞核抗原成分特异性结合的靶向分子将放射性核素、药物或蛋白靶向至肿瘤坏死部位，杀伤与坏死细胞相邻的肿瘤细胞，从而扩大肿瘤细胞坏死的范围，造成对肿瘤的特异性杀伤。美国专利US6017514和US6071491公开了相关抗原为细胞内DNA和组蛋白的肿瘤坏死靶向单抗的制备及其在坏死组织检测和肿瘤治疗的应用。人鼠嵌合抗肿瘤细胞核单克隆单抗(chimeric Tumor Necrosis Therapy-3 monoclonalantibody，chTNT-3)是一种能特异性地结合肿瘤坏死区坏死细胞DNA的肿瘤坏死靶向单抗。chTNT-3是小鼠单抗可交区(Fv)基因与人单抗恒定区(Fc)基因的嵌合重组产物，人源部分占70％，鼠源部分占30％。由于采用人源化嵌合技术，chTNT-3大大降低了机体内人抗鼠抗体(Human anti-mouse antibody，HAMA)的产生。常规肿瘤细胞单抗只对特定肿瘤的细胞膜抗原有特异性亲和，对于不同种类的肿瘤，需要采用相对应的不同品种的单抗进行治疗。chTNT-3避开了这一局限，其对应的核抗原DNA、组蛋白等结构成分是细胞中的基本成分，由于血管和细胞膜的选择性通透作用，只有在坏死细胞或病变细胞中能与chTNT-3接触作用。由于许多肿瘤细胞在快速增殖期都会出现坏死，因此chTNT-3对一系列肿瘤，如肝癌、肺癌、脑癌、结肠癌等均有效，具有一定的广谱性(Spicer KM，etal.Journal of Nuclear Medicine.2000，41272P-272P)。脂质体是一种由磷脂双分子层构成的具有水相内核的脂质微囊。亲水性药物可以被包封在脂质体的内水相中，亲脂性药物可以被包封在双分子层中，两亲性药物(弱酸或弱碱)可以通过远程载药法包载药物，如硫酸铵法包载阿霉素(HaranG，et al.Biochimica Et Biophysica Acta.1993，1151201-215)或pH梯度法包载长春新碱(Boman NL，et al.Cancer Research.1994，542830-2833)。通过在脂质体的表面修饰PEG等亲水性高分子克服了普通脂质体在体内循环系统滞留时间短迅速被清除的缺点，使脂质体能够通过增强的通透性和滞留性(Enhanced Permeabilityand Retention，EPR)效应在实体肿瘤部位蓄积；在长循环的基础上将特定的单抗或受体配基共价连接到脂质体表面制得空间稳定主动靶向脂质体，能识别相对应的抗原或受体，提高脂质体对肿瘤部位的选择性，进一步减少化疗药物对正常机体的损伤。生物素(Biotin)又称维生素H，分子量为244.31Da，等电点约3.5，其结构中含一个咪唑环和一个噻吩环。亲和素(Avidin，Av)是一种来源于鸡蛋清的糖蛋白，分子量为约66kDa，等电点约10，由四个完全相同的亚基组成，每个亚基可通过其色氨酸与生物素分子中的咪唑酮环结合。亲和素与生物素的亲和力非常高(Kd为10-15mol/L)，远高于抗原-抗体的亲和力(Kd为10-11mol/L)，两者结合快且不可逆，并可在较长时间内保持高度稳定性。链霉亲和素(Streptavidin，SAv)来源于细菌Streptomyces avidinii，分子量60kDa。SAv与Av一样由四个相同亚基组成，与生物素的亲和力也与Av类似，但SAv不含糖基侧链，是一种接近中性的蛋白(pH约5～6)，因此与带电分子和细胞膜糖受体的非特异性结合均很低(Fan CZ.Pharmaceutical Sciences.2002，Master23-29；吴湖炳，et al.国外医学·放射医学核医学分册.1998，22248-251)。由于生物素与(链霉)亲和素之间强烈的特异性结合作用，生物素-(链霉)亲和素系统(Biotin-avidinsystem，BAS)被广泛地应用于生物分析和肿瘤放射免疫显像。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生物素化肿瘤坏死靶向单抗预定位空间稳定脂质体给药系统，以提高抗肿瘤药物治疗效果。本专利技术需要解决的技术问题是，提供一种生物素化肿瘤坏死靶向单抗预定位空间稳定脂质体给药系统，该系统包括生物素化肿瘤坏死靶向单抗和表面PEG末端共价连接链霉亲和素或亲和素的空间稳定脂质体。脂质体内水相中包载抗癌化疗药物。本专利技术的目的通过下述技术方案实现采用生物素化肿瘤坏死靶向单抗chTNT/B和链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体，给药时首先给予chTNT/B预定位于肿瘤坏死部位，后给予链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体。本专利技术所述的肿瘤坏死靶向单抗为人鼠嵌合抗肿瘤细胞核单克隆单抗chTNT-1、chTNT-2和chTNT-3中的一种，优选为chTNT-3。本专利技术所涉及的表面可连接链霉亲和素或亲和素的空间稳定脂质体，其组分和摩尔含量百分比是高相变温度磷脂酰胆碱48％～68％胆固醇 30％～50％甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺 1％～15％吡啶二硫丙酰胺-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺0.2％～5％所述的高相变温度磷脂酰胆碱为二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)或氢化蛋磷脂酰胆碱(HEPC)。所述的胆固醇(CHOL)级别为本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于通过下述方法制备：采用生物素化肿瘤坏死靶向单抗ｃｈＴＮＴ／Ｂ和链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体，给药时首先给予ｃｈＴＮＴ／Ｂ预定位于肿瘤坏死部位，后给予链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体。
【技术特征摘要】
1.一种肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于通过下述方法制备采用生物素化肿瘤坏死靶向单抗chTNT/B和链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体，给药时首先给予chTNT/B预定位于肿瘤坏死部位，后给予链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体。2.根据权利要求1所述的肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于所述的脂质体内水相中包载抗癌化疗药物。3.根据权利要求1所述的肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于所述的chTNT/B，chTNT与生物素以共价方式连接，chTNT/B中生物素取代度为2～15，其中chTNT选自人鼠嵌合抗肿瘤细胞核单抗chTNT-1、chTNT-2或chTNT-3中的一种。4.根据权利要求1所述的肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于，所述的链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体含有高相变温度磷脂酰胆碱、胆固醇、甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺、链霉亲和素或亲和素-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和抗肿瘤药物。5.根据权利要求4所述的肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于，所述的链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体，其组分和摩尔含量百分比是高相变温度磷脂酰胆碱48％～68％胆固醇 30％～50％甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺 1％～15％链霉亲和素或亲和素-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺0.2％～5％其中高相变温度磷脂酰胆碱选自氢化二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、氢化大豆磷脂酰胆碱或氢化蛋磷脂酰胆碱；甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的通式为mPEG-PE，其中mPEG为单甲氧基聚乙二醇，PE为磷脂酰乙醇胺；链霉亲和素或亲和素-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的通式为SAv(Av)-PEG-PE，其中SAv为链霉亲和素，Av为亲和素，PEG为聚乙二醇，SAv或Av通过共价方式与PEG链末端连接，PE为磷脂酰乙醇胺。6.根据权利要求5所述的肿瘤坏死靶向单抗预定位脂质体给药系统，其特征在于，所述的链霉亲和素或亲和素化空间稳定脂质体的mPEG-PE中...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆伟跃，潘弘，姚明，钟高仁，周光兴，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。