一种新型靶向脂质体骨架材料及其制备方法技术

本发明专利技术主要提供一种靶向脂质体骨架材料及靶向受体介导的靶向脂质体，靶向脂质体骨架材料该能够加载特定靶向小分子的同时，保持脂质体的稳定性，该脂质体材料具有如下结构：R0‑(CH2CH2O)nCH2CH2‑R‑R′其中，R0优选为胆固醇及其类似物与(CH2CH2O)nCH2CH2部分通过酰胺键相连，R为碳键或酯键或酰胺键，R′的分子量为小于5000的靶向小分子化合物，n＝3‑100。当n在3‑100，R0部分能够很好地嵌入脂质体的双分子层中，使得脂质体有很好的稳定性，而R′部分通过中间的长链，能够保持其作为游离分子的活性，即对靶部位的亲和力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种靶向新型脂质体骨架材料及其制备方法，特别是涉及适合癌症靶点，具体说是以特定受体为目标的主动靶向的新型脂质体骨架材料及制备方法。
技术介绍
脂质体(liposome)是一种人工膜，具体来说是仿细胞膜的新型制剂技术，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，可以将药物送入细胞内部。脂质体主要由具有亲水亲脂两性的磷酸分子作为骨架材料组成。当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的的封闭囊泡，即为脂质体。脂质体具有肝、脾网状内皮系统的被动靶向性，然而，普通脂质体也极易在体循环中被肝、脾巨噬细胞迅速清除。1984年，通过酰胺键、羧基-PEG和纯化的磷脂酰乙醇胺(PE)耦合成功使磷脂质偶联到PEG上被全球研究人员所知。从此，通过聚乙二醇修饰解决了可以使脂质体在血液中保留较长时间，增加了药物的被动靶向功能。由于聚乙二醇价廉易得、可以大规模生产、分子量易于控制、良好的物理化学性质，同时可以事先将其制备成聚乙二醇－磷脂衍生物，制剂工艺相对简单等优点，成为目前高分子修饰脂质体的研究重点，然而这样的修饰并没有改变脂质体被动被“吞噬”，即被动到达靶器官这一特点。除了磷脂外，胆固醇是是共同构成细胞膜和脂质体的基础物质。胆固醇具有调节膜流动性的作用，故可称为脂质体“流动性缓冲剂”，对脂质体的稳定性具有重要作用。相对于磷脂组成的双分子层作为脂质体主要骨架，胆固醇穿插于磷脂双分子层之间，位置相对分散，且相对于磷脂来说，在脂质体组成所占比例较低。近年来，也有通过PEG修饰胆固醇来达到长循环作用，例如公开号为CN102038640A的中国专利技术专利申请中披露，通过胆固醇的PEG化达到延长长春碱类药物在体内的滞留作用。同样，这样的修饰并没有改变脂质体被动被“吞噬”，即被动到达靶器官这一特点。近年来，恶性肿瘤的发病率越来越高。肿瘤细胞与正常细胞的最大区别是过度增殖。换言之，肿瘤细胞与正常细胞都属于人体自己细胞，这给治疗恶性肿瘤带来了挑战。在目前治疗恶性肿瘤的方法中，常用为手术、化疗、放疗及近年来探索性采用的肿瘤免疫疗法等，除了手术治疗外，化疗和放疗作为常规治疗方法，在杀死肿瘤的同时对机体正常细胞也具有巨大杀伤作用，这是造成癌症死亡率极高的主要原因之一。因此，如何靶向杀伤肿瘤细胞，是目前治疗的难题之一。近二十多年来的研究表明，叶酸等受体在多种肿瘤细胞表面高度表达，其数量和活性远远超过正常细胞，具有良好的肿瘤组织特异性，即肿瘤特异性受体。例如，非转移性癌表面表达的叶酸水平较高度未分化的转移性癌细胞要低得多，说明中晚期肿瘤较早期肿瘤更易结合叶酸。因此，叶酸及其受体不断成为癌症诊断及治疗研究的新热点。相比于通常釆用的具有较大分子量的肿瘤特异性单克隆抗体，叶酸等作为小分子物质，具有较高的化学生物稳定性、组织相容性强、穿透能力强、达到靶点时间短、与受体亲和力高、几乎无免疫原性、价廉易得等优点，因此，成为了引起广泛关注的介导递药系统主动靶向肿瘤的寻靶分子。另外，由于肿瘤组织中缺乏淋巴系统，难以清除脂类等大分子物质，因此对于叶酸介导的抗肿瘤药物给药系统通常采用脂质体作为药物载体，而且，脂质体还可以通过增强渗透保留作用(EPR效应)，提高抗肿瘤药物在肿瘤组织中的浓度和延长药物半衰期。因此，通过修饰新型脂质体骨架材料，使之从被动靶向转为主动靶向肿瘤等组织，是本专利技术研究的重点。
技术实现思路
本专利技术主要提供一种主动靶向新型脂质体骨架材料，能够加载特定靶向小分子的同时，保持脂质体的稳定性，该新型脂质体骨架材料具有如下结构：R0-(CH2CH2O)nCH2CH2-R-R'其中，R0具有如下结构：其中，R2、R3、R4、R5为H含有取代或非取代C1-C10的直链或支链的小分子烷基取代，R1为具有取代或非取代的酯键或酰胺结构，具体为CO2-或CO2NH-。其中，R0与(CH2CH2O)nCH2CH2部分通过R1相连，R为碳键或酯键或酰胺键，R′的分子量为小于5000的靶向小分子化合物，n＝3-100。优选地，n＝30-70。本专利技术n约等于70，进一步，优选地，R为酰胺键。专利技术人经验地发现，当n在3-100，R0部分能够很好地嵌入脂质体的双分子层中，使得脂质体有很好的稳定性，而R′部分通过中间(CH2CH2O)nCH2CH2长链，能够保持其作为游离分子的活性，即对靶部位的亲和力。特别是30-70之间时，能够更好得发挥R′部分的导向性同时又能保证磷脂双分子层的稳定性。进一步，(CH2CH2O)nCH2CH2平均分子量优选为2000-3400。进一步，R0为胆固醇及结构类似物。进一步，R′包括但不限于特定靶点受体激动剂或抑制剂、特定信号通路信号因子、特定器官或组织(例如肝脏、脾脏、淋巴组织)特异性表达受体抑制剂或激动剂；进一步，优选为肿瘤特异性受体抑制剂，例如叶酸、PD-L1、VEGFR、CD28等。本专利技术所述新型脂质体骨架材料在制备成脂质体后，由作为特定靶向的R′引导进入特定靶部位，即能够将脂质体及其载药主动进入靶标后再降解释放药物，避免了被动靶向的“吞噬”，达到预定靶向释放药物的作用，避免了对机体正常细胞的杀伤。本专利技术还提供一种制备该新型脂质体骨架材料的方法，专利技术人采用生物催化反应，具体来说，是将靶向小分子化合物、胆固醇及其类似物的氯甲酸酯、不同分子量的双氨基聚乙二醇经不同生物酶促反应生成。具体来说，是将R0端酯或酰胺与双氨基聚乙二醇及R端酯经过生物催化反应制得。所述生物酶为缩合酶或酯化酶或酰胺化酶。该反应方法能够一步完成，副反应少甚至几乎没有。进一步，所述反应在恒温条件，最好在30℃-80℃完成。生物催化反应过程中，选用Novozym435、LipozymeIMTL、ProteaseP、ProteaseN、胰蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶PS1作为催化剂，其中，优选地，所述生物酶为Novozym脂肪酶435。本专利技术惊讶地发现，采用Novozym脂肪酶435能够将高效地定向地将R0端酯或酰胺与双氨基聚乙二醇及R端酯键合，产物得率高。进一步，本专利技术提供一种采用上述新型材料制备的脂质体。进一步，该新型脂质体骨架材料具有如下结构：具体地，该新型脂质体骨架材料具有如下结构：其中，取代基R1、R2、R3为H或OH或C1-C4取代基；R4或R5为H或OH，优先地，R4为H，且R5为OH。进一步，n＝3-100。优选地，n＝30-70。进一步，该新型脂质体骨架材料具有如下结构：进一步，上述靶向新型脂质体骨架材料的制备方法，是用R端酯与胆固醇氯甲酸酯、双氨基聚乙二醇经生物催化反应生成新型脂质体骨架材料。所述生物催化反应为酶促反应，所述生物酶为Novozym脂肪酶435。专利技术人发现，通过上述新型脂质体骨架材料制备的脂质体，能够与叶酸受体相结合，定向将药物传递至具有较高叶酸表达，比如癌细胞中。进一步，本专利技术提供一种叶酸介导的靶向新型脂质体骨架材料，结构式如下：其中，n＝3-100。优选地，n＝30-70。进一步，本专利技术提高一种制备该叶酸介导的靶向新型脂质体骨架材料的方法：用叶酸与胆固醇氯甲酸酯、双氨基聚乙二醇经生物催化反应生成新型脂质体骨架材料。其中之一反应路线如下：具体来说，在制备过程中，在反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂质体骨架材料，该脂质体骨架材料具有如下结构：R0‑(CH2CH2O)nCH2CH2‑R‑R′其中，R0具有如下结构：其中，R2、R3、R4、R5为H含有取代或非取代C1‑C10的直链或支链的小分子烷基取代，R1为具有取代或非取代的酯键或酰胺结构；其中，R0与(CH2CH2O)nCH2CH2部分通过R1相连，R为碳键或酯键或酰胺键，R′的分子量为小于5000的靶向小分子化合物，n＝3‑100。

【技术特征摘要】
1.一种脂质体骨架材料，该脂质体骨架材料具有如下结构：R0-(CH2CH2O)nCH2CH2-R-R′其中，R0具有如下结构：其中，R2、R3、R4、R5为H含有取代或非取代C1-C10的直链或支链的小分子烷基取代，R1为具有取代或非取代的酯键或酰胺结构；其中，R0与(CH2CH2O)nCH2CH2部分通过R1相连，R为碳键或酯键或酰胺键，R′的分子量为小于5000的靶向小分子化合物，n＝3-100。2.如权利要求1所述的脂质体骨架材料，其特征在于，所述n＝30-70。3.如权利要求2所述的脂质体骨架材料，该脂质体材料具有如下结构：4.如权利要求3所述的脂质体骨架材料，具有如下结构：其中，取代基R1、R2、R3为H或OH或C1-C4取代基...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭波红，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44