抗肺癌主动靶向脂质体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术目的在于提供一种抗肺癌主动靶向脂质体，是含有舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物,且具有靶向稳定性的脂质体组合物，通过动物及细胞试验进行验证，亚贡二萜酸类化合物对舒尼替尼杀死肿瘤细胞具有巨大的协同效应，达到了极好的抑制肿瘤的效果，通过脂质体定向转运至肺癌细胞，开拓了抗肿瘤脂质体领域的新篇章。

【技术实现步骤摘要】
抗肺癌主动靶向脂质体及其制备方法和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种抗肺癌主动靶向脂质体及其制备方法和应用。
技术介绍
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明确，大量资料表明，长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系。已有的研究证明：长期大量吸烟者患肺癌的概率是不吸烟者的10～20倍，开始吸烟的年龄越小，患肺癌的几率越高。此外，吸烟不仅直接影响本人的身体健康，还对周围人群的健康产生不良影响，导致被动吸烟者肺癌患病率明显增加。城市居民肺癌的发病率比农村高，这可能与城市大气污染和烟尘中含有致癌物质有关。随着如今雾霾的越发严重，人们对肺癌的关注也愈发重视。肺癌的临床表现比较复杂，症状和体征的有无、轻重以及出现的早晚，取决于肿瘤发生部位、病理类型、有无转移及有无并发症，以及患者的反应程度和耐受性的差异。肺癌早期症状常较轻微，甚至可无任何不适。中央型肺癌症状出现早且重，周围型肺癌症状出现晚且较轻，甚至无症状，常在体检时被发现。肺癌的治疗有化学治疗、放射治疗和外科治疗，其中，放疗是一种局部治疗，常常需要联合化疗；而外科手术并不是适用于所有病人，因此，化疗是肺癌的主要治疗方法，90%以上的肺癌需要接受化疗治疗，近年化疗在肺癌中的作用已不再限于不能手术的晚期肺癌患者，而常作为全身治疗列入肺癌的综合治疗方案。开发有效的肺癌化学药物具有重要意义。舒尼替尼最先于２００６年被美国ＦＤＡ批准治疗肾癌,2010年11月获得了欧盟委员会的批准可以用来治疗胰腺神经内分泌肿瘤（pancreaticneuroendocrinetumors）。2011年５月，美国ＦＤＡ也批准了舒尼替尼用来治疗胰腺神经内分泌肿瘤。舒尼替尼的也正在其他很多肿瘤上试验，包括乳腺癌、肺癌、甲状腺癌和接肠癌，但是初步结果显示：同此类药物治疗肾癌类似，有一定的效果但是效果不完全、不持久。脂质体(liposomes)是一种类似生物膜结构的双分子层囊泡。自20世纪60年代英国学者Bangham等首次报道脂质体结构以来，脂质体得到了越来越多的重视。1971年英国科学家Rymen等人开始将脂质体作为药物载体，使其在药学领域中得到了广泛应用，迅速发展为新型药物输送系统。脂质体具有长效、降低毒性及保护包封药物的优点，同时还存在一些缺点：一般的脂质体的靶向性主要集中于网状内皮细胞丰富的器官，若想对其他组织器官进行治疗其靶向性不明显；脂质体的稳定性不够，用常规方法制得的脂质体易于聚集和融和，有效期较短；脂质体内容物的泄漏，通常脂质体在保存过程中，内容物或多或少都会发生泄漏，尤其是对某些水溶性药物；对不同的药物，脂质体的包封率和载药量差别很大，有些药物的载药量极低，这就很难发挥药物的作用。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术目的在于提供一种抗肺癌主动靶向脂质体，是含有舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物,且具有靶向稳定性的脂质体组合物。其中亚贡二萜酸类化合物是从植物亚贡中提取出的化合物，包括亚贡二萜酸A、亚贡二萜酸B、亚贡二萜酸C或亚贡二萜酸D，其结构如下所示：所述舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物的质量比为（1-3）：6，优选（2-2.5）：6。本专利技术还提供了所述脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：1）合成靶向RGD肽-6-氨基己酸臂复合物：由固相合成法合成RGD肽-6-氨基己酸臂复合物；2）称取重量比的舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物，与磷脂、稳定剂、RGD肽-6-氨基己酸臂复合物、DSPC-PEG2000和非离子表面活性剂按一定比例溶于乙醚，加入一定体积的PBS，冰水浴中超声搅拌，形成乳剂，常温下先在真空度小的情况下旋转减压蒸发，再调高真空度继续减压蒸发，形成水性悬液，用氩气吹拂，再加入蒸馏水，最后冰水浴中短时搅拌超声，用高压均质机均值，0.2微米聚碳酸酯末挤出，PVDF膜无菌过滤，分装入西林瓶，冷冻干燥，西林瓶中通氩气，压盖密封。进一步地，步骤1）中所述RGD肽序列为：甘氨酸-丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-半胱氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸。进一步地，步骤2）中所述的磷脂为氢化饱和磷脂，优选氢化饱和大豆磷脂、氢化饱和卵磷脂或二硬脂酰磷脂酰胆碱。进一步地，步骤2）中所述的稳定剂为胆固醇和多羟基物质的组合，所述胆固醇与多羟基物质的重量比为1:2-4。所述多羟基物质为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、环糊精、乙二醇、木糖醇、山梨醇或甘油。进一步地，步骤2）中所述磷脂、稳定剂、RGD肽-6-氨基己酸臂复合物、DSPC-PEG2000和非离子表面活性剂的重量比为10:1.5-2.0:0.03-0.035:0.5-0.6:100，优选10:1.5:0.03：0.55:100。进一步地，步骤2）中亚贡二萜酸类化合物与磷脂的质量比为：3：1。本专利技术还提供一种含有所述脂质体组合物的制剂，所述脂质体组合物包裹在海藻酸盐-壳聚糖胶囊内。这种制剂可使脂质体组合物安全通过胃的酸性环境而到肠道的中性环境，使之顺利吸收。本专利技术所述的脂质体组合物通过工艺调整，克服了包裹多种成分包裹率不高、不稳定的问题，同时，申请人首次通过药效研究发现亚贡二萜酸类化合物可有效解决舒尼替尼药效不完全，不持久的问题。通过动物及细胞试验进行验证，亚贡二萜酸类化合物对舒尼替尼杀死肿瘤细胞具有巨大的协同效应，动物细胞试验均显示了很成功的实验结果，达到了极好的抑制肿瘤的效果，开拓了抗肿瘤脂质体领域的新篇章。附图说明图1为本专利技术所述组合物对A549肺癌细胞治疗效果的结果图。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术进行详细说明，以下实施例靶向RGD肽-6-氨基己酸臂复合物由上海华大天源生物科技有限公司合成，所用试剂均为市售。所用的的实验动物模型构建方法为：SPF级BALB/c雌性裸鼠，体质量为18±2g，4周龄，将肺腺癌细胞A549培养至对数生长期，胰酶消化，然后用无血清培养液稀释成细胞悬液，取1×106个（1ml）细胞接种于BALB/c裸鼠右腋皮下。肿瘤大小的计算方法，肿瘤体积V（mm3）=实体瘤最长径（mm）×实体瘤最短径（mm）2/2。实施例1一种用于抗肿瘤的脂质体组合物的制备方法，具体包括以下步骤：1）称取舒尼替尼5g,亚贡二萜酸A30g，氢化饱和大豆磷脂10g，胆固醇0.5g，环糊精1.0g，RGD肽-6-氨基己酸臂复合物0.03g,DSPC-PEG2000为0.5g,非离子表面活性剂100g;2）合成靶向RGD肽-6-氨基己酸臂复合物：由固相合成法合成RGD肽-6-氨基己酸臂复合物，RGD肽序列为：甘氨酸-丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-半胱氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸；3）将已经称好的配比量的的舒尼替尼和亚贡二萜酸A，与氢化饱和大豆磷脂、胆固醇、环糊精、RGD肽-6-氨基己酸臂复合物、DSPC-PEG2000和非离子表面活性剂溶于乙醚，加入150ml的PBS，冰水浴中超声搅拌，形成乳剂，常温下先在真空度小的情况下旋转减压蒸发，再调高真空度继续减压蒸发，形本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗肺癌主动靶向脂质体，其特征在于，是含有舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物,且具有靶向稳定性的脂质体组合物。

【技术特征摘要】
1.一种抗肺癌主动靶向脂质体，其特征在于，是含有舒尼替尼和亚贡二萜酸类化合物,且具有靶向稳定性的脂质体组合物，其中亚贡二萜酸类化合物指亚贡二萜酸A、亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢凯华，何靓，张梅玲，
申请(专利权)人：卢凯华，何靓，张梅玲，
类型：发明
国别省市：江苏;32