一种重组人表皮生长因子喷雾剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种重组人表皮生长因子喷雾剂，它包括重组人表皮生长因子、表面活性剂、保护剂以及药学上可接受的载体，其中所述喷雾剂包含传递体，且至少８０％的传递体的粒径是均一的。本发明专利技术还提供了制造上述喷雾剂的方法。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物制剂及其制备方法，具体涉及一种重组人表皮生长因子 喷雾剂及其制备方法。
技术介绍
人表皮生长因子(hEGF)是人体重要的多肽，它具有多种生物学功能，例如 可与表皮细胞上特异的受体结合，将信息传递入细胞，改变细胞内的酸碱度和游离 钙度，从而促进糖酵解和蛋白质合成以及增加某些专一性基因转录，促进DNA复 制和细胞分裂。因此，hEGF可促进表皮细胞、神经细胞和器官组织上皮细胞生长； 可促进新生胎儿齿、骨与各器官的生长；可促进肝细胞再生；可促进胃肠道黏膜细 胞生长和保护胃肠道黏膜受损。重组人表皮生长因子(rhEGF)是通过基因工程技术将大肠杆菌或酵母分泌表 达而来的，其制品纯度可达98%。重组人表皮生长因子属于分子量超过500道的 大分子多肽类药物。因该类药物分子量大，亲水性强且带电荷，所以将其透皮给药 吸收存在难点。目前，市售的深圳市华生原基因工程发展有限公司生产的金因肽 喷雾剂所用原料是重组人表皮生长因子的衍生物，为增加稳定性而对rhEGF蛋白 做了一定的修饰。但是经过修饰的rhEGF比原构型的rhEGF效价低，而且没有从 根本上解决rhEGF在室温贮存的稳定性问题。市售的rhEGF喷雾剂只能于2 8°C 低温条件保存，不宜于随身携带，使用不方便。另外，市售的rhEGF系普通的溶液制剂，透皮吸收率低。例如在深II度烧伤 创面愈合早期，创面出现水肿，表面存在坏死组织，从而使局部应用的rhEGF无 法穿透该层组织作用到皮肤的上皮细胞，造成治疗起效慢，伤口愈合时间长。而且，市售rhEGF喷雾剂是以10%的甘油和1.0%甘露醇为保护剂，因此对甘 油、甘露醇有过敏史者不宜使用，且使用时会出现红疹等过敏反应。因此，目前急需一种新的rhEGF喷雾剂，它并没有上述缺陷
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种重组人表皮生长因子(rfiEGF)喷雾剂，所述 rhEGF保持了蛋白的原有构型，且效价高，可常温贮存，便于使用。所述喷雾剂透 皮吸收率高，起效快，伤口愈合时间短。本专利技术的另一个目的是提供上述重组人表皮生长因子喷雾剂的制备方法。本专利技术一方面提供了一种重组人表皮生长因子喷雾剂，它包括重组人表皮生 长因子、表面活性剂、保护剂以及药学上可接受的载体，其中所述喷雾剂包含传递 体，且至少80%的传递体的粒径是均一的。在本专利技术的一个优选实例中，至少85%、较好至少90%、更好至少95%、最 少至少99%的所述传递体的粒径是均一的。在本专利技术的一个优选实例中，所述重组人表皮生长因子的用量是0.5-20u g/ml，较好为l-15ug/ml，更好为2-10ug/ml。在本专利技术的一个优选实例中，表面活性剂包括磷脂类、聚氧乙烯氧丙烯共聚 物类、吐温-80、司盘-85、油酸、胆酸盐中的一种或多种。在本专利技术的一个优选实例中，所述表面活性剂的用量为0.05-0.5g/ml，较好为 0.1-0.4g/ml,更好为0.15-0.25g/ml。在本专利技术的一个优选实例中，所述保护剂包括聚乙二醇类、白蛋白、P-环糊精 及其衍生物，聚维酮，玻璃酸钠，羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。在本专利技术的一个优选实例中，所述保护剂的用量为0.01-0.5g/ml，较好为 0.02-0.3g/ml，更好为0.05-0.15g/ml。本专利技术另一方面提供了一种制备所述重组人表皮生长因子喷雾剂的方法，所 述方法包括(a) 用水溶解重组人表皮生长因子，并分散在保护剂中，得到溶液A;(b) 用溶剂溶解表面活性剂，得到溶液B;(c) 将溶液A加入到溶液B中，搅拌混匀得到溶液C;(d) 将溶液C经超声雾化器在1.0-2.5MHz频率下于10-60。C超声雾化后，通 入正在搅拌的缓冲液中，或者，将溶液C加入缓冲液后再搅拌，得到的所述喷雾剂。在本专利技术的一个优选实例中，所述超声雾化的频率为1.5-1.7MHz;和/或，超 声雾化的温度为15-50°C，更好为20-4(TC。本专利技术还提供了一种由本专利技术所述方法制备的重组人表皮生长因子喷雾剂。本专利技术的重组人表皮生长因子喷雾剂比普通的水溶性制剂具有许多优点(1) 本专利技术重组人表皮生长因子喷雾剂的物理、化学稳定性以及生物学稳定 性更好。(2) 本专利技术重组人表皮生长因子喷雾剂使大分子多肽类药物能很容易透过皮 肤屏障，进入皮肤深层甚至进入体循环而发挥作用，有利于治疗深层皮肤损伤。具体实施方式在本专利技术中，所用术语传递体指一种自聚集泡囊，其主要成分为磷脂和 表面活性剂，所述传递体的粒径多在10-100纳米之间，外观为胶体溶液。所述传 递体通过自身膜的高度变形性，以渗透压差为驱动力，能穿透比它本身小数倍孔道 的类脂聚集体。例如，将所述传递体非封闭地涂抹于皮肤上，可透过直径约为0.4 纳米的皮肤角质层孔道。在本专利技术中，所述术语均一表示用激光散射粒度分布测定仪测定粒径时 为一个峰。本专利技术提供了一种重组人表皮生长因子喷雾剂，它包括重组人表皮生长因子、 表面活性剂、保护剂以及药学上可接受的载体，其中所述喷雾剂包含传递体，且至 少80%的传递体的粒径是均一的。在本专利技术的喷雾剂中，所述重组人表皮生长因子在本领域中是常规的。它可 从商业市场上购得。在本专利技术的一个实例中，所述重组人表皮生长因子购自中科院 上海生物化学研究所。在本专利技术的喷雾剂中，所述重组人表皮生长因子的用量在本领域中是常规的， 本领域的普通技术人员根据本专利技术的描述结合常识可以直接推导出其具体的用量。 在本专利技术的一个优选实例中，所述重组人表皮生长因子的用量是0.5-20Pg/ml，较 好为l-15wg/ml，更好为2-10y g/ml。通常，以所述喷雾剂的总重量计，所述重组人表皮生长因子在喷雾剂中的百分含量为0.000005-0.0002重量％，较好为0.00001-0.00015重量％，更好为 0.00002-0.0001重量％。在本专利技术的喷雾剂中，所述表面活性剂是常规的，本领域的普通技术人员根 据本专利技术的描述，可以直接推导出哪些表面活性剂可用于本专利技术中。在本专利技术的一 个优选实例中，所述表面活性剂包括磷脂类(例如卵磷脂等)、聚氧乙烯氧丙烯共 聚物类(例如PluronicF-68等)中的一种或多种。在本专利技术的另一个优选实例中， 所述表面活性剂选自吐温-80、司盘-85、油酸、胆酸盐中的一种或多种。在本专利技术的喷雾剂中，所述表面活性剂的用量是常规的，本领域的普通技术 人员根据本专利技术的描述可以直接推导出其具体用量。在本专利技术的一个优选实例中， 所述表面活性剂的用量为0.05-0.5g/ml，较好为0.1-0.4g/ml重量份，更好为 0.15-0.25g/ml。通常，以所述喷雾剂的总重量计，所述表面活性剂的百分含量为5-20重量％， 较好为7.5-15重量％，更好为10-12重量％。在本专利技术的喷雾剂中，所述保护剂是常规的，本领域的普通技术人员根据本 专利技术的描述可以直接推导出哪些保护剂可用于本专利技术中。在本专利技术的一个优选实例 中，所述保护剂包括聚乙二醇类(例如PEG400等)和白蛋白中的一种或多种。在 本专利技术的另一个优选实例中，所述保护剂选自P-环糊精及其衍生物、聚维酮、玻 璃酸钠、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。在本专利技术的喷雾剂中，所述保护剂的用量是常规的，本领域的普通技术人员 根据本专利技术的描述可以直接本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人表皮生长因子喷雾剂，它包括重组人表皮生长因子、表面活性剂、保护剂以及药学上可接受的载体，其中所述喷雾剂包含传递体，且至少８０％的传递体的粒径是均一的。

【技术特征摘要】
1. 一种重组人表皮生长因子喷雾剂，它包括重组人表皮生长因子、表面活性剂、保护剂以及药学上可接受的载体，其中所述喷雾剂包含传递体，且至少80％的传递体的粒径是均一的。2. 如权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于至少85%、较好至少90%、更 好至少95%、最好至少99%的所述传递体的粒径是均一的。3. 如权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于所述重组人表皮生长因子的用量 是0.5-20ug/ml，较好为l-15g/ml，更好为2-10u g/ml。4. 如权利要求l所述的喷雾剂，其特征在于所述表面活性剂包括磷脂类(例 如卵磷脂等)、聚氧乙烯氧丙烯共聚物类(例如Pluronic F-68等)、吐温-80、司 盘-85、油酸、胆酸盐中的一种或多种。5. 如权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于所述表面活性剂的用量为 0.05-0.5g/ml，较好为0.1-0.4g/ml，更好为0.15-0.25g/ml。6. 如权利要求l所述的喷雾剂，其特征在于所述保护剂包括聚乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘邻霖，陈彬华，高原，夏凌云，周明慧，
申请(专利权)人：信谊药厂，
类型：发明
国别省市：31[]