重组人表皮生长因子发酵用培养基制造技术

技术编号:12814771 阅读:93 留言:0更新日期:2016-02-07 08:39
本发明专利技术公开了重组人表皮生长因子发酵用培养基,该培养基由以下重量比例成分制成:甘油5.0-7.0%、酵母碱基(YNB)3.0-3.5%、微量金属离子1.8-2.2%、生物素0.5-1.0%、促进剂0.5-1.0%、水余量;所述微量金属离子为三氯化铁、氯化钙、钼酸钠、氯化锌、硫酸铜、硼酸、硫酸铝中的一种;用磷酸盐缓冲液调pH为5.5-6.5。本发明专利技术使用的植物原料成分经过了蒸汽爆破、蒸馏、高剪切均质机处理,得到纳米乳状的植物油性成分,和培养基中其他配方的相容性好。本发明专利技术通过在培养基中添加植物原料成分作为促进剂,和现有技术相比,发酵液的产量会提高20-25%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及生物
,尤其设及重组人表皮生长因子发酵用培养基
技术介绍
表皮生长因子是由Cohen等人在上世纪60年代从小鼠颂下腺发现的一种生长 调节蛋白,由53个氨基酸组成,研究证实它具有广泛的刺激细胞增殖的作用。1975年, Starkey、Cohen等人从人尿中提取了人表皮生长因子化umanEpidermalGrowthFactor, hEGF),与鼠表皮生长因子具有高度一致的结构,并具有一致的生物学活性。表皮生长因子 广泛存在于人体各种组织中,可刺激多种细胞增殖,主要是上皮细胞和内皮细胞的增殖,运 是通过结合细胞膜上的表皮生长因子受体巧GFR)而起作用的。EGF通过与细胞受体的膜外 部分结合,激活其酪氨酸激酶活性,诱导蛋白憐酸化,启动DNA合成,激活RNA、蛋白质合成, 促进细胞增生、移行。 表皮生长因子广泛存在于人体内各种组织,含量极微,对于维持人体各种组织器 官(如角结膜、皮肤、各种黏膜、腺体等)的正常生理功能具有重要作用。随着年龄的增长, 体内表皮生长因子水平逐渐下降,表现为相关组织器官的衰老和退化,特别是上皮组织的 衰老,因此,及时向人体补充表皮生长因子,可维护人体正常功能并延缓衰老,运是表皮生 长因子在美容保健行业的应用基础。另外,在肌体受损等的情况下,内源性表皮生长因子不 能满足组织修复的大量需要,及时向受损部位补充表皮生长因子,可促进受损肌体组织的 修复,在临床上应用非常广泛,如用于创伤、炎症、手术、化学烧伤及干眼症等各种原因引起 的角膜上皮缺损修复,烧伤、创伤、外科手术、炎症、溃瘍等各种皮肤和黏膜缺损的修复。 目前,对表皮生长因子和重组表皮生长因子已有研究,例如中国专利97115284. 5, 公开了表皮生长因子工程菌及使用该菌制备表皮生长因子的方法,研究人员通过表皮生长 因子可W得到重组人表皮生长因子(或者称为重组人表皮生长因子原液)。科技在不断进 步,对于表皮生长因子和重组表皮生长因子的研究也在不断的进行当中。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供重组人表皮生长因子发酵用培养基,该培养基由W下重量比 例成分制成: I 础! 5, 0-/. 0%、 酵母碱基(YNB) 3. 0-3.日%、 微量金属离子;1.8-2. 2%、 'M勿发 0.5-1.0%、 促进剂 0.5-1.0%、 水 余量; 所述微量金属离子为=氯化铁、氯化巧、钢酸钢、氯化锋、硫酸铜、棚酸、硫酸侣中 的一种; 用憐酸盐缓冲液调抑为5. 5-6. 5; 所述促进剂采用W下方法制备: 1)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎; 2)蒸汽爆破处理:将步骤1)得到的物料放入蒸汽爆破罐,爆破压力3. 0-3. 5Mpa, 保压时间维持在150-200S; 3)蒸馈处理:将步骤2)得到的物料放入蒸馈器,在蒸馈器底部,加热燃烧或通入 蒸汽,当炙热的蒸气充满在蒸馈器里,水蒸气通过冷凝管,被引入冷凝器内,再通过油水分 离器,收集精油; 4)高剪切均质机处理:将步骤3)得到的精油通过高剪切均质机处理,线速度 30-40m/s,时间3-5min,制成纳米乳,并用微孔滤膜过滤除菌得到。 进一步优选的,该培养基由W下重量比例成分制成: 寸油: 6.0%、 酵母碱基(Y服) 3. 44%、 微量金属离子; 2.0%、 生物素 1.0%、 促进剂 0.8%、 氷 余量; 所述微量金属离子为=氯化铁、氯化巧、钢酸钢、氯化锋、硫酸铜、棚酸、硫酸侣中 的一种;[001引用憐酸盐缓冲液调抑为6. 0 ; 所述促进剂采用W下方法制备: 1)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎; 2)蒸汽爆破处理:将步骤1)得到的物料放入蒸汽爆破罐,爆破压力3. 0-3. 5Mpa, 保压时间维持在150-200S; 3)蒸馈处理:将步骤2)得到的物料放入蒸馈器,在蒸馈器底部,加热燃烧或通入 蒸汽,当炙热的蒸气充满在蒸馈器里,水蒸气通过冷凝管,被引入冷凝器内,再通过油水分 离器,收集精油;[002引 4)高剪切均质机处理:将步骤扣得到的精油通过高剪切均质机处理,线速度 30-40m/s,时间3-5min,制成纳米乳,并用微孔滤膜过滤除菌得到。 本专利技术所述用水符合制药行业标准。本专利技术所述培养基按照现有技术制备。 本专利技术所述金银花的使用量,优选粉碎后的体积相当于蒸汽爆破罐体积的 1/4-1/3。 与现有技术相比,本专利技术具有如下优点:[002引1、本专利技术使用的植物原料成分经过了蒸汽爆破、蒸馈、高剪切均质机处理,得到纳 米乳状的植物油性成分,和培养基中其他配方的相容性好。 2、本专利技术通过在培养基中添加植物原料成分作为促进剂,和现有技术相比,表达 产量会提高20-25%。【具体实施方式】 下面W实施例对本专利技术作进一步说明,但本专利技术并不局限于运些实施例。[003。 实施例1 : 重组人表皮生长因子发酵用培养基,该培养基由W下重量比例成分制成: 社油; 日.0%、 酵母碱基(Y服) 3.5%、 微量金属离子; 1.8%.、 化物隶 0.5%、 促进剂 1.0%、 水 余量; 所述微量金属离子为=氯化铁;[003引用憐酸盐缓冲液调抑为5. 5; 所述促进剂采用W下方法制备: 1)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎; 2)蒸汽爆破处理:将步骤1)得到的物料放入蒸汽爆破罐,体积相当于蒸汽爆破罐 体积的1/3,爆破压力3. 5Mpa,保压时间维持在150s; 3)蒸馈处理:将步骤2)得到的物料放入蒸馈器,在蒸馈器底部,加热燃烧或通入 蒸汽,当炙热的蒸气充满在蒸馈器里,水蒸气通过冷凝管,被引入冷凝器内,再通过油水分 离器,收集精油; 4)高剪切均质机处理:将步骤3)得到的精油通过高剪切均质机处理,线速度40m/ S,时间3min,制成纳米乳,并用微孔滤膜过滤除菌得到。[00川实施例2: 重组人表皮生长因子发酵用培养基,该培养基由W下重量比例成分制成: 甘油:; 7. 0%、 酵母碱基(YNB) 3.0%、 微量金属离子; 2.2%、 化鞠索 ].0%、 促进剂 0.5%、 水 余量; 所述微量金属离子为氯化巧;[004引用憐酸盐缓冲液调抑为6. 5; 所述促进剂采用W下方法制备: I)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎; 2)蒸汽爆破处理:将步骤1)得到的物料放入蒸汽爆破罐,体积相当于蒸汽爆破罐 体积的1/4,爆破压力3.OMpa,保压时间维持在200s; 3)蒸馈处理:将步骤2)得到的物料放入蒸馈器,在蒸馈器底部,加热燃烧或通入 蒸汽,当炙热的蒸气充满在蒸馈器里,水蒸气通过冷凝管,被引入冷凝器内,再通过油水分 离器,收集精油;[005。 4)高剪切均质机处理:将步骤扣得到的精油通过高剪切均质机处理,线速度30m/ S,时间5min,制成纳米乳,并用微孔滤膜过滤除菌得到。[005引实施例3: 重组人表皮生长因子发酵用培养基,该培养基由W下重量比例成分制成: 潮t 6.0%、 酵母碱基(Y服) 3.44%、 微量金属窝子; 2. 0%、 小.物索 1.0%、 准进剤 0.8%、 水 余室;所述微量金属离子为钢酸钢、氯化锋、硫酸铜、棚酸、硫酸侣中; 用憐酸盐缓冲液调抑为6.0 ; 所述促进剂采用W下方法制备: 1)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎; 2)蒸汽爆破处本文档来自技高网
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【技术保护点】
重组人表皮生长因子发酵用培养基,其特征在于,该培养基由以下重量比例成分制成:所述微量金属离子为三氯化铁、氯化钙、钼酸钠、氯化锌、硫酸铜、硼酸、硫酸铝中的一种;用磷酸盐缓冲液调pH为5.5‑6.5;所述促进剂采用以下方法制备:1)原料处理:将金银花洗净、干制、粉碎;2)蒸汽爆破处理:将步骤1)得到的物料放入蒸汽爆破罐,爆破压力3.0‑3.5Mpa,保压时间维持在150‑200s;3)蒸馏处理:将步骤2)得到的物料放入蒸馏器,在蒸馏器底部,加热燃烧或通入蒸汽,当炙热的蒸气充满在蒸馏器里,水蒸气通过冷凝管,被引入冷凝器内,再通过油水分离器,收集精油;4)高剪切均质机处理:将步骤3)得到的精油通过高剪切均质机处理,线速度30‑40m/s,时间3‑5min,制成纳米乳,并用微孔滤膜过滤除菌得到。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:韦忠明黄启斌莫冬海唐申秀包能创秦芳
申请(专利权)人:桂林华诺威基因药业有限公司
类型:发明
国别省市:广西;45

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