公开了一种诊断检测装置和相关使用方法，获得了抗马珠蛋白和血红素的抗体并将这些抗体用于检测和定位马胃溃疡和结肠溃疡的检测装置、试剂盒及方法。将受试马的粪便与经缓冲的溶液一起放于大容器中，充分混匀，然后取容器中的几滴液滴置于检测试剂盒。检测试剂盒中的可见标记显示作为指标的血红素和马珠蛋白的检测结果，这两个指标分别指示胃溃疡和／或结肠溃疡。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求2004年12月4日提交的第60/633,167号美国临时专利申请的优先权，其标题为“马珠蛋白和血红素的抗体以及在马的溃疡的鉴定和定位中利用该抗体的装置和方法”，所述申请在此全文引入作为参考。
技术介绍
专利
本专利技术主要涉及诊断和检测装置和方法，更具体的涉及马血红蛋白和血红素的抗体及其在检测和定位马的胃和结肠溃疡的检测装置、试剂盒和方法中的应用。在讨论检测和诊断马的溃疡之前，有必要讨论一下马独特的消化道解剖学结构，该结构导致马消化道溃疡的高发病率。在人和其他大多数动物中，胃酸的分泌是胃对进食的反应。与此相反，千百年来马已进化为滴流摄食动物(吃得慢，但整天大部分时间或多或少不断的吃)，它们的消化系统已适应这种饮食方式，不断产生胃液和肝分泌的胆汁进入前肠。因此，无论马是否正在进食，马胃都可视为整天或多或少不断产生胃酸的酸泵。表演马的消化道溃疡的发病率已急剧升高，从1920年的约20％上升到近十年的约90％或更高。例如，在赛马中，据报道多达97％的赛马患有消化道溃疡，患消化道溃疡的展示马的百分率紧随其后。甚至表演马驹也已罹患该病症，约60％的表演马驹患有消化道溃疡。虽然娱乐马消化道溃疡的发病率比展示马低，但是近二十年来消化道溃疡越来越高的发病率在所有类型的马包括娱乐马中都显著升高。最近一项马的随机交叉科学研究显示，大约55％的受试马患有胃溃疡，40％的受试马患有结肠溃疡。胃和结肠溃疡的发病率不相同，表明一些马仅患有胃溃疡，另一些马仅患有结肠溃疡。然而，大多数患有结肠溃疡的马也患有胃溃疡，作为一个整体的马群中只有不到30％既不患结肠溃疡，也不患胃溃疡。如上所述，展示马和赛马消化道溃疡的发病率与一般马群的这些统计数字相比甚至更高。本领域存在大量解决马消化道溃疡问题的方法。这些解决方法包括使用抗酸剂暂时中和胃中的酸，使用药物抑制胃酸的产生，以及延长休息和草料的进食。最近，开发了一种新的和非常有效的食料添补剂用于治疗和/或预防胃溃疡和结肠溃疡，如2003年5月9日提交的第10/435,367号美国专利申请所公开的，其标题为“在马和其他动物中用于治疗和预防消化道溃疡的食料添补剂及其方法”，该专利申请被指派给本专利技术的代理人，该专利申请在此全文引入作为参考。尽管存在这种治疗方法，但是准确诊断马的胃溃疡仍然非常困难，而诊断马的结肠溃疡根本就不可能。最常用的诊断马溃疡的方法，就是利用症状(这经常是模糊的，非特异的迹象例如体重减轻，食欲不振，嗜睡，或者间歇性发烧)与治疗观察的结果联合，这被发现几乎是完全不可靠的。这是因为有许多可能的原因造成相同的症状，并且不是所有的马都显示相同或者甚至显著的溃疡症状。因此，使用这种技术的效果通常不比竞猜游戏更好。诊断马胃溃疡的唯一可靠的方法是使用3米视频内窥镜，但其具有显著缺点昂贵、耗时和压力大(对马和训练员/马主都是)。购买3米视频内窥镜的费用很高，其价格是马主和所有训练员(除了最杰出的外)高得买不起的。除了内窥镜的费用之外，操作步骤也是繁琐和费时的。没有3米视频内窥镜的马主、训练员和兽医必须求助于拥有内窥镜的诊所或兽医。这需花费额外的时间和费用，对马的压力更大，而且易产生挫折感，因为马不再是在马主、训练员或平常兽医的照顾下。此外，即使拥有和使用了3米视频内窥镜，结果也不是结论性的，因为即使是最复杂的内窥镜也会错过75英尺的消化道—完整的后肠。利用内窥镜不能看到后肠，因为还没有足够长度的内窥镜，而且内窥镜的使用需要完全排空后肠，这极有可能杀死马匹。事实上，只是在最近才记载了马结肠溃疡的高发病率，这完全是通过死后观察分析的使用完成的。因此，本专利技术的主要目标是提供一种马溃疡检测试剂盒以及使用该检测试剂盒的相关方法，该试剂盒和方法可有效诊断马的胃溃疡和结肠溃疡。本专利技术的一相关目标是为胃溃疡或结肠溃疡或两者的存在提供高度特异的指标。本专利技术的另一相关目标是既能准确鉴定马溃疡的存在又能准确鉴定马溃疡的类型，而且不会产生过度假阳性显示。本专利技术的另一目标是检测可以方便快捷的进行，不要求检测的操作者具有专门的技术或者接受培训。本专利技术的另一目标是它是完全自给自足的，不需要实验室分析或者其他处理装备，这样的话它可以作为现场检测在任何地点使用。本专利技术的另一目标是快速提供检测结果，只需几分钟而不是很长的时间。本专利技术的马溃疡检测试剂盒的构成还必须是持久耐用的，而且应该无需要特殊的保存条件就可确保较长的贮存期。为增强本专利技术马溃疡检测试剂盒的市场吸引力，其构成应该不昂贵从而使之具有最广阔的潜在市场。最后，还有一个目标是本专利技术马溃疡检测试剂盒及方法的所有上述优点和目标的获得不应附带造成任何严重的缺点。专利技术概述本专利技术克服了上述
技术介绍
中讨论的缺点和限制。本专利技术提供了马溃疡检测试剂盒及使用该检测试剂盒的方法，所述试剂盒和方法能够以高度的灵敏度和特异性鉴定马的胃溃疡或结肠溃疡或这二种溃疡，因为本专利技术马溃疡检测试剂盒和方法可以清楚的区分胃溃疡和结肠溃疡。本专利技术的溃疡检测是一种粪便血液检测，因为它鉴定被测马的粪便中所含的血液成分。根据本专利技术所述，已经鉴定出两种血液成分，它们分别对胃溃疡或结肠溃疡的存在具有高度的指征性。本专利技术的专利技术者已经确定，粪便中包含的完整珠蛋白其最有可能的来源是结肠。这是基于以下事实来自胃溃疡的血液(和其他任意在十二指肠之前的血液，就此而言)会被胃中的酸和肽降解，产生血红素(它是由两个亚铁血红素(heme)分子连接在一起构成的分子)等产物。因此，粪便中完整珠蛋白的存在表明有结肠溃疡，而血红素的存在则表明有胃溃疡。本领域技术人员还可以看出，以血红素和珠蛋白作为指标的马溃疡检测试剂盒和方法将为检测和定位马体内一处或多处溃疡提供很好的指标。本专利技术的马溃疡检测试剂盒和方法的优选形式是用于检测血红素指标和珠蛋白指标的免疫分析，具体的说，本专利技术马溃疡检测的优选实施例是酶联免疫吸附分析(“ELISA”检测)，这是生物化学中经常用于检测样品中是否存在特定物质的方法。ELISA检测是一种快速的免疫化学检测，涉及抗体或抗原(免疫学分子)和酶(催化生化反应的蛋白)。ELISA检测被用于检测具有抗原性的物质，主要是蛋白(不同于葡萄糖和钾之类小分子和离子)，诸如抗体、细菌抗原和激素。所谓的“快速”ELISA检测由一张具有液体路径的膜组成，该路径由连接于液体源头的一段制止连接于液体吸收池的另一端，沿膜有三个分离且独立的区域。第一个区域包含标记抗体，即连接有染色试剂的抗体，所述染色剂诸如染料或者胶体金。标记抗体随流体的流动从第一个区域向第二个和第三个区域移动，最终流向液体吸收池。如果感兴趣的物质存在于流体中，它将结合标记抗体。第二个区域，通常是一条跨膜横线，其中包含结合到膜上的抗体。第二个区域的抗体对感兴趣的物质具有亲合力(将吸引和锁定该物质)，与标记抗体以及在与第二个区域中的抗体结合的感兴趣的物质一起形成“三明治”，从而产生一个作为阳性显示的色线，表明存在感兴趣的物质。流体中包含越多的感兴趣的物质，越多的被感兴趣的物质所结合标记抗体与第二个区域的抗体结合。第三个区域，通常也是一条跨膜的横线，利用另一种不同的抗体/抗原反应，如果达到足够的流速和流量，该反应就会产生一根色线，不论是否存在感兴趣的物质。这作本文档来自技高网...
【技术保护点】
特异结合马珠蛋白的抗马珠蛋白抗体。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：FL佩里格里尼，SC安德森，
申请(专利权)人：自由健康有限公司，
类型：发明
国别省市：US[]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。