鉴定和定位马溃疡和其它消化道出血的方法及仪器技术

本发明专利技术公开了一种诊断和检测装置以及使用该装置的相关方法，得到马白蛋白和马血红蛋白的抗体用于检测装置、试剂盒，和检测及定位马胃和结肠溃疡或出血的方法中。将待检测马的粪便液滴与缓冲液一起放入容器中彻底混合，然后从容器中取几滴液体放入检测试剂盒中。检测试剂盒中出现可视标记意味着检测到马血红蛋白和马白蛋白标记物，它们分别表明存在胃和／或结肠溃疡或出血。

【技术实现步骤摘要】
鉴定和定位马溃疡和其它消化道出血的方法及仪器专利技术背景专利
-本专利技术总的涉及诊断和检测仪器及方法，更具体涉及马血红蛋 白和马白蛋白的抗体和其在检测并定位马胃和结肠溃疡和其它消化道出血的检测仪 器、试剂盒方法中的应用。在讨论检测和诊断马溃疡之前，先讨论促成马高发消化道溃疡的某些马独特的 消化道解剖结构会有帮助。就人和大多数其它动物而言，胃对进食的反应是分泌胃酸。相反，马在数千年进化钟成为细流进食动物(tricklefeeder)(进食慢却持续或多或少一天中大部分时间)，它们的消化系统也配合这种进食方式，不断产生胃液并且肝 脏分泌胆汁进入前肠。因此，可认为马的胃是一种可在整天中或多或少不断产生胃 酸的酸泵，而无论马是否进食。由于马的解剖结构和现代进食及护理规程，所有的马，尤其是表演用马患胃溃 疡的非常多。例如赛马，据报道多达97%患有消化道溃疡，而展览用马的消化道溃 疡发病率仅稍稍微落后。即使表演马的幼驹也受此病折磨，大约60%的表演马幼驹 患消化道溃疡。而娱乐用马消化道溃疡的发病率低于展览用马，近二十年来所有种 类的马群包括娱乐用马消化道溃疡发病均显著升高。虽然结肠溃疡(马的盲肠和/或结肠溃疡)的发病率远没有被探究，但它们也可能 代表了不同的同样严重的马健康问题。迄今唯一的一项科学研究专门观察了结肠溃 疡发病率显示了令人吃惊的结果。此项研究对马的剖析显示，胃溃疡发病率约55% 结肠溃疡发病率40%。胃和结肠溃疡的发病率不相同，意味着有些马仅患胃溃疡而 另一些马仅患结肠溃疡。然而，患结肠溃疡的马大部分也患胃溃疡，马群无胃或结 肠溃疡的比例低于30%。如上所述，展览用马和赛马的消化道溃疡发病率经统计甚 至比普通马群还要高。本领域已釆用了很多方案来解决马的消化道溃疡问题。此类解决方案包括用抗 酸药暂时中和胃酸、用药物抑制胃酸产生、延长休息时间和进餐时间。近年来，开 发出一种新的高效食物添加剂，能够治疗和/或预防胃溃疡和结肠溃疡，参见2003年5月9日提交的名称为"食物添加剂及其治疗并预防马和其它动物消化道溃疡的方法"的美国专利申请第10/435,367号所述，该专利申请已转让给本专利技术受让人，该专利 申请的内容全文纳入本文作为参考。虽然已有了此类治疗方法，但高度精确地诊断马胃溃疡仍然非常困难，并且还 几乎不能诊断马的结肠溃疡。已发现，最常用的诊断马溃疡的方法，即利用症状(常 常是模糊的、非特异性的症状如体重减轻、食欲不振、嗜睡或间歇性发热)与可察觉 的治疗结果相结合的方法几乎完全不可靠。这是由于可能有许多潜在原因能引起相 同的症状，并非所有马均表现出相同或甚至明显的溃疡症状。因此，用该技术常常 不比猜测游戏好多少。认为唯一可靠的诊断马胃溃疡方法是采用3米视频内窥镜，其显著缺点是昂贵、 费时和会产生紧张感(对马和对训练者/马主人均如此)。购买一台3米视频内窥镜的 费用相当高，高到让马主人和所有除大部分精英外的训马师无法承担。除费用之外 内窥镜操作烦琐且费时。没有3米视频内窥镜的马主人、训马者和兽医必需向诊所 或有内窥镜的兽医求诊。这将花费额外的时间和支出，因为马失去了马主人、训马 师或常常是兽医经手的照料，会令马甚至更为紧张而且会失败。而且，即使购买和使用了 3米视频内窥镜，结果也只限于此设备的可视范围即 胃组织。虽然可用此类设备有效观测并诊断胃溃疡，却仍然不能用该设备诊断马其 余95%消化道溃疡。因为内窥镜不够长和用内窥镜时要充分排空后肠(大约为75英 尺小肠、盲肠和结肠)这就跟杀了马差不多，因此用内窥镜无法观察后肠。实际上， 近年来文献报道的马结肠溃疡高发病率都是通过死后观察分析才完成的。因此本专利技术的主要目的是提供一种马溃疡和消化道出血的检测试剂盒和运用该 检测试剂盒的相关方法，来有效诊断马胃溃疡或出血和结肠溃疡或出血。本专利技术的 相关目的是提供对马胃溃疡或出血或结肠溃疡或出血或两者的高度特异性指征。本 专利技术的另一个相关目的是高度可靠地鉴定马存在的溃疡或出血和鉴定马存在的溃疡 类型，而不会产生过度假阳性读数。本专利技术的另一个目的是简单迅速地进行检测，进行此检测的用户不需要专门技 术或进行培训。本专利技术还有一个目的是它是完全自主进行、不需要实验室分析或额 外的处理设备因此可在任何地方如现场进行检测。本专利技术还有另一个目的是在几分 钟内快速提供检测结果而不需要更长时间。本专利技术的马溃疡或出血检测试剂盒的结构还必须耐用和能够长期ie存，试剂盒不需要特殊的贮存条件能确保试剂盒有长期使用寿命。为了提高本专利技术马溃疡或出血检测试剂盒的市场吸引力，它还应不昂贵从而能够拥有最广泛的市场前景。最终， 还有一个目的是本专利技术的马溃疡或出血检测试剂盒及其方法的所有上述优点和目的 实现不会带来任何实质性相关缺陷。专利技术概述本专利技术克服了以上
技术介绍
所述的缺陷和局限性。本专利技术提供一种能以高灵敏 度和特异性鉴定马的胃和/或结肠溃疡和其它消化道出血的马溃疡和消化道出血检测 试剂盒以及使用所述检测试剂盒的方法，利用该马溃疡或出血检测试剂盒及方法能 清楚地区别胃溃疡或出血与结肠渍疡或出血。本专利技术的溃疡或出血检测指粪血检测， 因为它可鉴定所测试马的粪便中的血液成分。根据本专利技术所述，鉴定到两种血液成分可分别高度表示存在胃溃疡或出血和/或 结肠溃疡或出血。本专利技术人测到粪便中含有完整的马白蛋白极有可能是来源于结肠。 这是因为胃溃疡时马血液白蛋白(和溃疡产生的到达十二指肠的其它脊髓动物血液成 分)已受到胃酸和胃肽酶降解，而无法在粪便中检测到马白蛋白。然而，胃溃疡或出 血的血液中所含的马血红蛋白至少一部分可逃避胃酸或胃肽酶的作用而留存下来， 而能在粪便中检测到。因此粪便中存在完整的马白蛋白表示存在结肠溃疡或出血，而存在马血红蛋白 表示示存在胃溃疡或出血或结肠溃疡或出血。本领域技术人员将会明白利用马白蛋 白和马血红蛋白作为指示物的马溃疡或出血检测试剂盒及方法，将提供对一种或多 种马溃疡或出血的存在和定位均为良好的指示剂。本专利技术马溃疡或出血检测试剂盒 和方法的优选实施形式是设计用来检测马白蛋白和马血红蛋白指示物存在的免疫测 定，具体地说，本专利技术马溃疡或出血检测的优选实施方式是酶联免疫吸附试验("ELISA"检测)，它是生物化学中普遍用于检测样品中是否存在特定物质的方法。 ELISA检测是快速的免疫化学检测，其包含抗体或抗原(免疫分子)和酶(催化生物化学反应的蛋白质)。可用ELISA检测具有免疫原性的物质，主要是蛋白质(与小分子和离子例如葡萄糖和钾离子相反)，例如抗体、细菌性抗原和激素。 一种所谓的 "快速"ELISA检测是侧流免疫测定("LFI")检测，其试验用膜中的液体通道一端连接液体来源另一端连接到液体壑，沿膜有3个不连续的分开区域。第一区域含有偶联显色剂例如有色乳胶小珠或染料或胶体金的标记抗体。所述标记抗体可随液体从第一区流到第二和第三区，最终到达液体壑。如果液体中存在感兴趣的物质，它会结合此标记抗体。第二区，通常为横跨此膜的伸展直线区，包含结合于此膜的抗体。第二区的抗体对感兴趣的物质具有亲和性(将其吸附和固定到该区)，与标记抗体 和结合于第二区抗体的感兴趣的物质可形成"夹心"结构，从而形成着色线，表明 存在感兴趣物质为阳性读数。液体中含的感兴趣的物质越本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测并定位马溃疡或消化道出血的快速检测试剂盒，其包括：　　　　第一试验带，用于快速免疫测定或过氧化物酶反应以检测马胃溃疡或出血和／或结肠溃疡或出血；和　　　　第二试验带，用于快速免疫测定以检测马结肠溃疡或出血。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：FL佩里格里尼，SD卡特，
申请(专利权)人：自由健康有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]