用于纯化CYS连接的抗体-药物缀合物的方法技术

本发明专利技术涉及使用疏水作用色谱法(HIC)纯化半胱氨酸连接的抗体‑药物缀合物之混合物的方法，其中非缀合抗体的量在按重量计0％至40％的范围内。使用0.2M至1.5M盐水溶液将所述混合物加载到制备型HIC柱上，其中在流过级分中收集非缀合抗体，随后使用0mM至100mM盐水溶液洗脱经纯化的半胱氨酸连接的抗体‑药物缀合物的混合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于纯化半胱氨酸(Cys)连接的抗体-药物缀合物(antibody-drugconjugate，ADC)的混合物，特别是其中非缀合抗体的量在按重量计10％至40％范围内的混合物的方法。这样的Cys连接的ADC可能在新的靶向癌症治疗中具有重要作用。因此，具有用于纯化Cys连接的ADC之混合物的工业(制备)规模方法是这样的ADC未来商业成功的关键要求。专利技术背景近年来，许多ADC已经投入临床前和临床开发中并且在过去几年中两种ADC已经批准上市。除了将接头-药物与(单克隆)抗体(mAb)缀合的最近发展之外，在(临床前)临床开发的大多数ADC中和目前市售的两种ADC中的药物可以通过赖氨酸残基的N原子或者通过半胱氨残基的S-原子与抗体连接。市售产品或ado-曲妥珠单抗emtansine(Roche/Genentech ImmunoGen)是赖氨酸连接的ADC的实例，或brentuximabvedotin(Seattle Genetics/Takeda Millennium)是半胱氨酸连接的ADC的实例。目前在(临床前)临床开发中的一种ADC是下文所示式(II)的半胱氨酸连本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于纯化半胱氨酸连接的抗体‑药物缀合物之混合物的方法，其中非缀合抗体的量在按重量计10％至40％的范围内，所述方法包括：a.提供在0.2M至1.5M盐水溶液中的所述混合物；b.将所述溶液加载到制备型疏水作用色谱柱上；c.收集含有非缀合抗体的流过级分；d.用0.2M至1.5M盐水溶液洗涤所述柱，同时收集所述流过级分；以及e.用0mM至100mM盐水溶液洗脱所述柱以获得经纯化的半胱氨酸连接的抗体‑药物缀合物的混合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.01.10 EP 14150789.71.用于纯化半胱氨酸连接的抗体-药物缀合物之混合物的方法，其中非缀合抗体的量在按重量计10％至40％的范围内，所述方法包括：a.提供在0.2M至1.5M盐水溶液中的所述混合物；b.将所述溶液加载到制备型疏水作用色谱柱上；c.收集含有非缀合抗体的流过级分；d.用0.2M至1.5M盐水溶液洗涤所述柱，同时收集所述流过级分；以及e.用0mM至100mM盐水溶液洗脱所述柱以获得经纯化的半胱氨酸连接的抗体-药物缀合物的混合物。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述柱填充有Fractogel EMD propyl、FractrogelEMD phenyl、Butyl-S sepharose、Octyl Sepharose、Capto Octyl、Capto Butyl、CaptoPhenyl ImpRes、Capto Butyl ImpRes、Toyopearl PPG-600M、Toyopearl Hexyl-650、Toyopearl Butyl-650、Toyopearl Phenyl-650、Toyopearl Ether-650、Macroprep t-Butyl、Macroprep phenyl、Cellufine Butyl、Cellufine Phenyl或Poros HP2。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述柱的直径在4.0mm至2,000mm，优选15mm至2,000mm的范围内。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述柱负荷在5g/L至50g/L的柱填充材料，优选5g/L至40g/L的柱填充材料的范围内。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述柱填充材料的平均颗粒大小在30μm至180μm的范围内。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述盐水溶液的盐选自：硫氰酸钾、氯化钠、氯化钾、氯化铵、硫酸钠、硫酸钾和硫酸铵，优选地所述盐是氯化钠或硫酸铵。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述盐水溶液还含有缓冲液。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述缓冲液选自：磷酸钠、磷酸钾、磷酸铵、乙酸钠、乙酸钾、柠檬酸钠、柠檬酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：盖伊·鲁德，鲁德·马丁·韦斯泰根，鲁迪·赫拉尔杜斯·伊丽莎白·库曼斯，
申请(专利权)人：斯索恩生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL