一种引物组、探针、RPA试纸条试剂盒、鉴别方法技术

本发明专利技术属于病毒株鉴别方法技术领域，具体为一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株的引物组和探针，包括第一引物组和第一探针；所述第一引物组中的上游引物如序列SEQ ID NO：1所示；所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQ ID NO：2所示的DNA分子；所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3‑spacer基团的如序列SEQ ID NO：3所示的DNA分子。同时，还提供了一种用于检测MGF360‑505R基因缺失株的引物组和探针；该引物组和探针组特异性强、灵敏度高，同时，本发明专利技术还提出了基于RPA‑LFD技术和上述引物组和探针组的RPA试纸条试剂盒和鉴别方法。

A primer set, probe, RPA strip kit and identification method

【技术实现步骤摘要】
一种引物组、探针、RPA试纸条试剂盒、鉴别方法
本专利技术涉及病毒株鉴别方法
，具体为一种引物组、探针、RPA试纸条试剂盒、鉴别方法。
技术介绍
非洲猪瘟(AfricanSwinefever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(AfricanSwinefevervirus，ASFV)引起的家猪和野猪的一种急性、高度接触性传染病，临床以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血为主要特征，一般发病后2～10d死亡，严重时死亡率可达100％。该病属于世界动物卫生组织(OIE)要求必须报告的A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。非洲猪瘟在非洲、欧洲和美洲的数十个国家流行，造成巨大的经济损失且已蔓延至与欧洲接壤的多个亚洲国家。从2018年第一例非洲猪瘟在我国爆发来，非洲猪瘟对我国养猪业造成重大的损失，严重影响我国的养猪业的健康发展。国内外研究表明非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因敲除后，可以显著降低病毒毒性，敲除这两个基因的非洲猪瘟活病毒有望成为疫苗。目前CN201910348878.7和CN201910700685.3分别公开了可作为疫苗的基因缺失本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株的引物组和探针，其特征在于，包括第一引物组和第一探针；/n所述第一引物组中的上游引物如序列SEQ ID NO：1所示；/n所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQ ID NO：2所示的DNA分子；/n所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQ ID NO：3所示的DNA分子。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株的引物组和探针，其特征在于，包括第一引物组和第一探针；
所述第一引物组中的上游引物如序列SEQIDNO：1所示；
所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQIDNO：2所示的DNA分子；
所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQIDNO：3所示的DNA分子。


2.一种用于检测MGF360-505R基因缺失株的引物组和探针，其特征在于，包括第二引物组和第二探针；
所述第二引物组中的上游引物如序列SEQIDNO：4所示；
所述第二引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQIDNO：5所示的DNA分子；
所述第二探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQIDNO：6所示的DNA分子。


3.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的RPA试纸条试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有：第一引物组和第一探针、第二引物组和第二探针；
所述第一引物组中的上游引物如序列SEQIDNO：1所示；
所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQIDNO：2所示的DNA分子；
所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQIDNO：3所示的DNA分子；
所述第二引物组中的上游引物如序列SEQIDNO：4所示；
所述第二引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQIDNO：5所示的DNA分子；
所述第二探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQIDNO：6所示的DNA分子。


4.根据权利要求3所述的区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的RPA试纸条试剂盒，其特征在于，还包括DNA提取试剂、RPA扩增试剂和侧向流动试纸条。


5.根据权利要求3所述的区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的RPA试纸条试剂盒，其特征在于，还包括醋酸镁、ddH2O、5×ExtrationBuffer。

【专利技术属性】
技术研发人员：沈永义，彭金玉，陈瑞爱，沈雪娟，
申请(专利权)人：华南农业大学，肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44