鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒三重PCR检测引物组、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒三重PCR检测引物组、试剂盒及方法，设计了针对鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒的特异性引物，经过对不同引物组合进行试验筛选得到扩增效果较好的一个引物组合，然后继续对反应体系中引物浓度、引物之间的比例、退火温度和扩增时间进行优化，最终建立起可同时检测鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒的方法。本发明专利技术的引物和检测方法通过一次PCR反应便可同时确定样品中鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒的混合感染及单一感染情况，该方法同时具有特异性强、灵敏度高、快速简便及易于操作等优点，十分适于在基层单位应用推广，为鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒的监测及其防控提供技术支撑。

Primer set, kit and method for triple PCR detection of chicken parvovirus and H9 subtype avian influenza virus

【技术实现步骤摘要】
鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒三重PCR检测引物组、试剂盒及方法
本专利技术属于分子生物学
，涉及鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒三重PCR检测引物组、试剂盒及方法。
技术介绍
鸡细小病毒(chinckenparvovirus，ChPV)是引发鸡群发生肠道疾病的重要病毒之一，临床上以腹泻、呈现精神抑郁和生长迟缓及料肉比增加等为特征。ChPV主要侵害雏鸡，主要造成患病鸡腹泻和发育不良，该病毒在某些鸡群中普遍存在，研究发现在发育障碍与矮小综合征鸡群的血清中能检测出ChPVDNA。流行病学调查表明其在商品肉鸡感染率较高、蛋鸡或种鸡次之。近年来研究表明ChPV在全球多个国家的鸡群中普遍存在，且近年来相继在北美的美国和巴西、东欧的波兰和匈牙利、克罗地亚及亚洲的韩国和中国等地区发现报道。禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)是正黏病毒科中A型流感病毒属成员。根据其表面抗原血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶蛋白(Neuraminidase,NA)的差异可以将AIV划分为16种不同的HA亚型(H本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸡细小病毒和H9亚型禽流感病毒的三重PCR检测引物组，包括引物M-F、引物M-R、引物H9-F、引物H9-R、引物ChPV-F和引物ChPV-R；/n引物M-F的序列如SEQ.ID.NO.1所示，引物M-R的序列如SEQ.ID.NO.2所示，引物H9-F的序列如SEQ.ID.NO.3所示，引物H9-R的序列如SEQ.ID.NO.4所示，引物ChPV-F的序列如SEQ.ID.NO.5所示，引物ChPV-R的序列如SEQ.ID.NO.6所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸡细小病毒和H9亚型禽流感病毒的三重PCR检测引物组，包括引物M-F、引物M-R、引物H9-F、引物H9-R、引物ChPV-F和引物ChPV-R；
引物M-F的序列如SEQ.ID.NO.1所示，引物M-R的序列如SEQ.ID.NO.2所示，引物H9-F的序列如SEQ.ID.NO.3所示，引物H9-R的序列如SEQ.ID.NO.4所示，引物ChPV-F的序列如SEQ.ID.NO.5所示，引物ChPV-R的序列如SEQ.ID.NO.6所示。


2.含有权利要求1所述的引物组的试剂或试剂盒。


3.使用三重PCR检测鸡细小病毒和H9亚型禽流感病毒的方法，其特征在于，三重PCR所用的引物为权利要求1所述的引物组。


4.按照权利要求3所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测样品的cDNA和DNA；
(2)建立三重PCR反应体系，利用上述引物组进行三重PCR反应；
(3)将PCR反应产物通过琼脂糖凝胶电泳检测，当...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，李丹，李孟，谢丽基，罗思思，张艳芳，张民秀，黄娇玲，范晴，王盛，谢志勤，邓显文，曾婷婷，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45