一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法技术

技术编号:23283595 阅读:71 留言:0更新日期:2020-02-08 15:14
本发明专利技术公开了一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源的方法,其特征在于,根据登革热病毒核酸序列设计一对特异性引物,使用RT‑PCR检测方法对登革热病毒检测并分型,通过高分辨率熔解曲线区分登革热病毒来源。本发明专利技术提供一种登革热病毒快速检测、分型以及来源区分的方法,试剂成本低,方法简单,同时减少操作流程和步骤,减少实验错误和误差,此外通过HRM分析,对登革热病毒来源进行预判定,对登革热疫情起到即时预警作用。

A method for rapid detection, typing and traceability of dengue virus nucleic acid

【技术实现步骤摘要】
一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法
本专利技术属于病毒检测领域,具体涉及一种登革热病毒快速检测、分型以及溯源区分的方法。
技术介绍
登革热(dengue)是黄病毒科中黄病毒属的登革病毒(DENV)经蚊媒传播引起的急性虫媒传染病,DENV感染后可导致隐性感染、登革热、登革出血热和登革休克综合症。登革热主要是在热带和亚热带地区,通过白纹伊蚊和埃及伊蚊传播疾病,因此登革热流行具有明显的季节性,多发生在气温高,雨量多的季节,主要是在5-10月份。近十几年来,由于气候变暖,病毒流行株变化以及中国经济的快速发展和国际化交流的日益频繁,使得DENV感染加剧。据报道,目前中国许多省市都爆发登革热爆发,如广东,广西,云南,海南,福建,浙江等,而且4种血清型登革热病毒都存在流行。2014年广州爆发登革热疫情,具有38753例感染病例,其中重症病例20例,死亡病例6例,给社会带来了极大恐慌。据报道,每年全球大约有3.9亿人感染登革热病毒,0.96亿人具有明显的临床症状,若登革热感染病人二次感染不同血清型病毒,会引发严重疾病,而目前还没有合适的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法,其特征在于,根据登革热病毒核酸序列设计一对特异性引物,使用RT-PCR检测方法对登革热病毒检测并分型,通过高分辨率熔解曲线区分登革热病毒来源。/n

【技术特征摘要】
1.一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法,其特征在于,根据登革热病毒核酸序列设计一对特异性引物,使用RT-PCR检测方法对登革热病毒检测并分型,通过高分辨率熔解曲线区分登革热病毒来源。


2.根据权利要求1所述的一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法,其特征在于,所述的一对特异性引物是根据4种不同血清型登革热病毒核酸E蛋白核酸序列设计的,正向引物为:GACTTYGTGGAAGGDSTBTCAGG;反向引物为:GTCAGGTTBSCYTCWATGCA。


3.根据权利要求1所述的一种登革热病毒核酸快速检测、分型以及溯源区分的方法,其特征在于,使用RT-PCR检测方法对登革热病毒检测并分型,其所述方法如下:
(1)RT-PCR反应体系为2×SYBRGreenBuffer10uL,反转录酶0.4uL,DNA聚合酶1.2uL,10umol/L正反向引物各0.8uL,病毒核酸模板2uL,DEPC水补齐至20uL;
(2)RT-PCR扩增条件:42℃逆转录反应5min,95℃预变性10s;95℃变性5...

【专利技术属性】
技术研发人员:田瑞郁旷明吴爱萍李林王晓燕郑丽芳李娜胡锦锋
申请(专利权)人:杭州市上城区疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:浙江;33

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