一种冻干型猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法及其检测方法技术

本发明专利技术提供了一种冻干型猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法及其检测方法，包括如下步骤：制备猪瘟病毒C株的病毒液，灭活，得到灭活的病毒液；然后将灭活的病毒液和保护剂混合，冻干，得到猪瘟病毒核酸标准物质。其检测方法以推进猪瘟病毒核酸分子检测标准化及我国猪瘟病毒体外诊断试剂的量值溯源和检测结果一致化。猪瘟病毒核酸标准物质不仅可为兽医实验室开展量值溯源、能力验证、质量控制、方法评价、试剂选择等工作提供技术支撑，还能提高全国不同类型兽医检测实验室的检测能力和技术水平，更为动物疫病净化和畜产品质量安全评价、身份验证、国内监管、进出口检验、企业自控和国际贸易互认提供有力保障。

Preparation and detection of nucleic acid reference material of freeze-dried classical swine fever virus

【技术实现步骤摘要】
一种冻干型猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法及其检测方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法及其检测方法，猪瘟病毒核酸标准物质即猪瘟病毒核酸标准样品。
技术介绍
猪瘟(classicalswinefever,CSF)是由猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)感染引起的一种高致死性的烈性传染病，以接触性传染，急性呈败血性变化，实质器官出血、坏死和梗死，慢性呈纤维素性坏死性肠炎为主要特征。是严重威胁养猪业的传染病之一，被世界动物卫生组织(officeinternationaldesepizooties,OIE)列入OIE疫病名目，也是我国农业农村部规定的一类传染病。本病在世界各地相继发生，其中以欧洲和亚洲最为严重，近年来我国流行的猪瘟以非典型性临床症状和病理剖检为主，其病原属黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)，其RNA为单股正链，病毒粒子呈圆形，大小为38～44nm，核衣壳是立体对称二十面体，氯化铯中浮密度1.15～1.17g/ml，有包膜，该病毒对乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：/n(1)猪瘟病毒液的制备；/n(2)取步骤(1)制备的病毒液热灭活，得到灭活的病毒液；/n(3)取步骤(2)得到的灭活病毒液和保护剂混合，冻干，获得猪瘟病毒核酸标准物质。/n

【技术特征摘要】
1.一种猪瘟病毒核酸标准物质的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)猪瘟病毒液的制备；
(2)取步骤(1)制备的病毒液热灭活，得到灭活的病毒液；
(3)取步骤(2)得到的灭活病毒液和保护剂混合，冻干，获得猪瘟病毒核酸标准物质。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述热灭活为56℃处理4h。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述保护剂含有明胶和蔗糖。


4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述保护剂为含有质量分数为5％的明胶和25％的蔗糖的水溶液，使用前需灭菌。


5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述“将灭活的病毒液和保护剂混合”为1体积份灭活的病毒液和1体积份保护剂混合。


6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述冻干的参数为：-10℃～-40℃冷冻干燥4h～10h。


7.如权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括对猪瘟病毒核酸标准物质进行病毒灭活检验和/或支原体检验和/或其他病毒检验。


8.如权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：将步骤(3)得到的猪瘟核酸标准物质进行均匀性评估和/或稳定性评估。


9.如权利要求7所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯小宇，梅力，高晓龙，陈晨，王英超，郑淑芸，韦海涛，宋彦军，赵景义，王林，沈光年，罗伏兵，邓柏林，
申请(专利权)人：北京市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11