检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的PCR引物组、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种检测非洲猪瘟病毒MGF360‑505R基因的PCR引物组、试剂盒及检测方法。该引物组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3所示的引物和探针；试剂盒包括上述的引物、探针、反应试剂。试剂盒使用时，在ROX通道出现一条S型扩增曲线为非洲猪瘟病毒阳性，无S型扩增曲线为非洲猪瘟病毒感染阴性，预期可用于缺失株的鉴别诊断。本发明专利技术提供的试剂盒具有有效防止气溶胶污染，并且操作简单、成本低廉，敏感性高、特异性好，适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的非洲猪瘟病毒鉴别检测。

PCR primer set, kit and detection method for detection of mgf360-505r gene of African swine fever virus

【技术实现步骤摘要】
检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的PCR引物组、试剂盒及检测方法
本专利技术属于生物
，具体地说，涉及一种检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的荧光定量PCR引物组、试剂盒及检测方法。
技术介绍
非洲猪瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus，ASFV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告的动物疫病，中国将其列为一类动物疫病。非洲猪瘟对人不致病，不属于人畜共患病，但猪感染后发病率和病死率可高达100％。目前，ASF的实验室检测方法主要包括病毒分离、间接免疫荧光试验、ELISA、PCR等。病毒分离和间接免疫荧光试验虽属标准检测方法，但操作繁琐，很难在条件一般的实验室开展。荧光定量PCR技术具有操作简单、敏感性高、特异性好等优点，已在非洲猪瘟病毒检测方面得到应用。然而，荧光定量PCR同时具有易被气溶胶污染的缺点，即使有微量的扩增产物泄露，也会导致假阳性的产生。专利《基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的PCR引物组，其特征在于，该引物组包括靶向靶向MGF360-505R基因的上游引物505R-P1、下游引物505R-P2和探针505R-Pb；/n所述引物505R-P1的核苷酸序列为：5’-CATCTCAAGAAGACAGCGGC-3’；/n所述引物505R-P2的核苷酸序列为：5’-GTTTACGAGGTAGTTGACGCAG-3’；/n所述探针505R-Pb的核苷酸序列为：5’-TCTAGCACAAAGTGGAGGAGCCC-3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的PCR引物组，其特征在于，该引物组包括靶向靶向MGF360-505R基因的上游引物505R-P1、下游引物505R-P2和探针505R-Pb；
所述引物505R-P1的核苷酸序列为：5’-CATCTCAAGAAGACAGCGGC-3’；
所述引物505R-P2的核苷酸序列为：5’-GTTTACGAGGTAGTTGACGCAG-3’；
所述探针505R-Pb的核苷酸序列为：5’-TCTAGCACAAAGTGGAGGAGCCC-3’。


2.根据权利要求1所述的PCR引物组，其特征在于，所述探针505R-Pb在5’端标记ROX，3’端标记BHQ2。


3.一种检测非洲猪瘟病毒MGF360-505R基因的防污染荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的引物组。


4.如权利要求3所述的PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括防污染荧光定量PCR预混液。


5.如权利要求3所述的PCR试剂盒，其特征在于，所述防污染荧光定量PCR预混液含有dUTP和UNG酶。


6.如权利要求3所述的PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括阳性对照。
...

【专利技术属性】
技术研发人员：勾红潮，李春玲，卞志标，孙铭飞，蔡汝健，宋帅，蒋智勇，李艳，杨冬霞，徐民生，
申请(专利权)人：广东省农业科学院动物卫生研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44