非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物、检测方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术公开一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物、检测方法及检测试剂盒，属于分子生物学领域。本发明专利技术的检测引物、探针和检测试剂盒，利用锁核酸的特点，设计含有锁核酸的特异性探针，该探针对DNA有强大的识别能力和强大的亲和力，从而能够很好的应用于非洲猪瘟病毒精准检测，提高了非洲猪瘟病毒的检测效率，漏检的概率降低，为非洲猪瘟病毒检测提供了一种新的检测方法和检测试剂。本发明专利技术的探针、引物和试剂盒，与现有的常规检测方法相比，具有特异性强、灵敏度高等优点，特别适用于科研及临床应用，具有很好的商业应用价值。

Detection composition, detection method and detection kit of cfqpcr for African classical swine fever virus

【技术实现步骤摘要】
非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物、检测方法及检测试剂盒
本专利技术属于分子生物学领域，涉及一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物、检测方法及检测试剂盒。
技术介绍
非洲猪瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFvirus，ASFV)引起的家猪和野猪的一种急性、烈性和高度接触性传染病，死亡率可达100％。非洲猪瘟给养猪业造成了灾难性打击，属于国际动物卫生组织A类疫病，我国农业农村部将其列为一类动物疫病。非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属的唯一成员，为有囊膜的双股DNA病毒，也是唯一的DNA虫媒病毒。病毒基因组全长约为170～193kb，基因组编码150～200种蛋白。P72蛋白是ASFV的主要结构蛋白，由基因B646L编码，该基因高度保守，是病毒检测中最常用的靶基因。目前非洲猪瘟仍然没有有效预防疫苗和特效治疗药物，因此急需建立一种非洲猪瘟快速精准的检测方法，有效做到早发现早根除。PCR技术已成为核酸检测中广泛使用的分子生物学方法，但其存在因非特异性扩增而产生假阳本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物，其特征在于：包括用于扩增非洲猪瘟病毒的1组特异性引物对和1条LNA-Taqman探针：/n所述的特异性引物对的序列如Seq ID No.1～2所示；/n所述的LNA-Taqman探针的序列如Seq ID No.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物，其特征在于：包括用于扩增非洲猪瘟病毒的1组特异性引物对和1条LNA-Taqman探针：
所述的特异性引物对的序列如SeqIDNo.1～2所示；
所述的LNA-Taqman探针的序列如SeqIDNo.3所示。


2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物，其特征在于：所述的LNA-Taqman探针所示序列的探针中，第7位的碱基“G”、第11位的碱基“A”、第13位的碱基“G”和第17位的碱基“A”均为锁核酸。


3.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物，其特征在于：
所述的LNA-Taqman探针在5′端标记荧光物质，3′端标记淬灭物质。


4.根据权利要求3所述的非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物，其特征在于：
所述的5′端标记荧光物质为标记FAM；
所述的3′端标记淬灭物质为标记BHQ1。


5.权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物在制备非洲猪瘟检测试剂盒中的应用。


6.一种非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟病毒的锁核酸探针荧光定量PCR检测组合物。


7.根据权利要求6所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，李春玲，郭怡德，勾红潮，蔡汝健，蒋智勇，宋帅，楚品品，卞志标，徐民生，
申请(专利权)人：广东省农业科学院动物卫生研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44