脑信号蛋白-4D结合分子在促进中风后的神经发生中的用途制造技术

本发明专利技术提供了一种在表现出至少一种中枢神经系统疾病症状的患者中促进神经组织的神经发生的方法，该方法包括向有需要的受试者给药有效量的分离的结合分子，其特异性地结合至脑信号蛋白‑4D(SEMA4D)。

Role of Brain Signaling Protein-4D Binding Molecule in Promoting Neurogenesis after Stroke

【技术实现步骤摘要】
脑信号蛋白-4D结合分子在促进中风后的神经发生中的用途本申请是申请日为2013年05月10日、申请号为2013800372629、专利技术名称为“脑信号蛋白-4D结合分子在促进中风后的神经发生中的用途”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请的相互参引本申请要求2013年3月15日提交的美国非临时申请No.13/842,523以及2012年5月11日提交的美国临时申请No.61/646,119的优先权，各申请的内容以引证的方式整体纳入本文。电子方式提交的序列表参引随本申请提交的以ASCIItext文件(文件名：“1843072PC01_SequenceListing.txt”，大小7,562字节；生成日期：2013年5月10日)电子提交的序列表的内容通过引证的方式整体纳入本文。
技术介绍
脑信号蛋白4D(SEMA4D)，也称为CD100，是属于脑信号蛋白基因家族的一种跨膜蛋白(例如，SEQIDNO：1(人)；SEQIDNO：2(小鼠))。SEMA4D以同型二聚体在细胞表面上表达，但在细胞活化时，SEMA4D可以经由蛋白水解裂解而从细胞表面释放，以产生sSEMA4D，其为该蛋白质的一种可溶形式，也是具有生物活性的。参见Suzukietal,NatureRev.Immunol.5:159-167(2003)；Kikutanietal,NatureImmunol.9:17-23(2008)。SEMA4D以高水平在淋巴器官(包括脾、胸腺和淋巴结)以及非淋巴器官(如脑、心脏、和肾脏)中表达。在淋巴器官中，SEMA4D大量表达于静息T细胞，但仅微弱表达在静息B细胞和抗原呈递细胞(APC)，例如树突细胞(DC)中。但是，其在这些细胞中的表达在通过各种刺激活化后被上调。可溶性SEMA4D从免疫细胞的释放也被细胞活化增加。SEMA4D与自身免疫性脱髓鞘疾病、如多发性硬化症和某些癌症的进展有关。哺乳动物神经系统从损伤后的崩溃至完全再生是一个重大的临床问题。由于中风或脑部的外伤，以及神经变性疾病如阿尔茨海默氏病所导致的神经损伤的结果，是死亡和残疾的首要原因。虽然SEMA4D通过其受体(如神经丛蛋白-B1)的信号转导对血管生成的作用是已知的，但SEMA4D信号转导对于促进神经再生的作用尚不清楚。因此，仍然需要提供一种方案来解决对于神经再生治疗手段的未满足的医疗需要。
技术实现思路
本文公开了使用脑信号蛋白-4D结合分子用于促进神经再生的方法。本文给出了证据证明SEMA4D会损害神经细胞再生的能力。根据本文中示例的本专利技术的方面，提供了促进表现出至少一种中枢神经系统病症症状的患者的神经组织中神经发生的方法，该方法包括向有需要的受试者给药有效量的分离的结合分子，其特异性地结合至和/或抑制脑信号蛋白-4D(SEMA4D)。根据本文中示例的本专利技术的方面，提供了一种增加患有中枢神经系统病症人受试者中祖细胞数量的方法，包括向受试者给药有效量的分离的结合分子，其特异性地结合至脑信号蛋白-4D(SEMA4D)，其中与SEMA4D的结合起到增加祖细胞数量的作用。根据本文中示例的本专利技术的方面，提供了一种促进表现出至少一种中枢神经系统病症症状的患者中神经组织神经再生的方法，包括向受试者给药有效量的分离的结合分子，其特异性地结合SEMA4D，其中所述结合分子竞争性地抑制选自VX15/2503或67的参比单克隆抗体与SEMA4D的特异性结合。根据本文中示例的本专利技术的方面，提供了一种缓解患者的中枢神经系统的疾病或病症(例如中风)的症状的方法，包括向受试者给药有效量的分离的结合分子，其特异性地结合至和/或抑制脑信号蛋白-4D(SEMA4D)，其中与SEMA4D的结合起到缓解所述症状的作用。附图简要说明图1：示意性地示出了实施例中描述的大脑中动脉(MCA)阻塞的实验方案。图2A-2E：示出了在大脑中动脉阻塞(MCAO)后，用同型对照(“对照IgG”，2A和2C)或MAb67-2(“抗-Sema4D-Ab”，2B和2D)治疗的如2E中所示区域的巢蛋白/Sox2被染色的脑样品中神经干细胞/祖细胞。脑样品在MCAO之后的7天制备。图3A-3D：示出了用同型对照(“对照IgG”)或MAb67-2(“抗-SEMA4D”)处理的MCAO小鼠脑组织的(A)RT-PCR的mRNA表达，以及(B)Sox2、(C)巢蛋白和(D)PLP相对于肌动蛋白对照的定量分析。脑组织在MCAO后7天分离。巢蛋白和Sox2是神经干前体细胞的标志物。PLP是髓鞘形成的标志物。图4A-4D：示出了用同型对照或MAb67-2处理的MCAO小鼠中，大脑和纹状体在经处理的和未处理的半球体中的相对总体积。测量在MCAO之后的30天进行。图4A-4B示出了用NeuN染色的大脑切片，其来自(A)1种代表性的同型对照(“对照IgG”)小鼠，和(B)1种代表性的用抗-SEMA4D抗体处理的(“抗-SEMA4D”)小鼠。脑体积由纹状体(实线)和半球体(虚线)的体积表示。图4C-4D分别示出了同型对照(“IgG”)小鼠和抗SEMA4D抗体处理的(“SEMA”)小鼠的纹状体与半球体积的计算比例(L/R)。图5A-5B示出MCAO后30天，成熟神经细胞标志物NeuN在(A)MAb67-2(“Sema4D-Ab”)或(B)同型对照(“对照IgG”)的MCAO小鼠中的表达情况。脑梗死的边缘部分的纹状体用箭头标记。图6A-C示出了在MCAO后的第30天，在MCAO小鼠和用同型对照(“IgG”)或MAb67-2(“SEMA4D”)处理之后的小鼠，或用假手术治疗的(“SHAM”)小鼠在明亮和黑暗状态下在敞箱实验中的活动能力。图6A-6B分别示出了在明亮和黑暗状态下的活动能力。图6C示出了活动能力的明亮/黑暗状态比(D/L)。图7示出了实施例6中描述的实验方案的示意图。具体实施方式I.定义应理解，术语“一个”或“一种”实体是指一种或多种所述的实体；例如“一种抗-SEMA4D抗体”应理解为代表一种或多种抗-SEMA4D抗体。因此，在本文中术语“一个”(或“一种”)、“一种或多种”以及“至少一种”可以互换使用。术语“神经发生”在本文中定义为神经细胞在体内或体外的增殖、分化、迁移和/或存活。在不同的实施方案中，神经细胞是成人、胎儿、或胚胎的神经干细胞或细胞群。细胞可以位于动物或人类的中枢神经系统或其他地方。细胞也可以位于组织、例如神经组织中。在一些实施方案中，神经细胞是成人、胎儿、或胚胎的祖细胞或细胞群，或者包含干细胞和祖细胞的细胞群。神经细胞包括所有脑干细胞、所有脑祖细胞，以及所有脑前体细胞。神经发生包括在正常发育期间发生的神经发生，以及在疾病、损伤或治疗性干预(例如本文中所描述的治疗)之后发生的神经再生。术语“神经细胞”、“干细胞”、“神经干细胞”、“前体细胞”、“神经干/前体细胞(NSPC)”或“神经干/祖细胞(NSPC)”可以互换使用，是指能够自我更新和分化成神经元、星形胶质细胞和/或少突胶质细胞的未分化细胞。本文中使用的术语“祖细胞”(例如神经祖细胞)是指来自于干细胞但本身不是干细胞的细胞。一些祖细胞可以产生能够分化成多于一种细胞类型的后代。神经祖细胞包括神经元组细胞，其产生神经元，以及神经胶质祖细胞，其产生星形胶质细胞和/或少突胶质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进表现出至少一种中枢神经系统疾病的症状的患者中神经组织的神经发生的方法，该方法包括向有需要的受试者给药有效量的特异性结合脑信号蛋白‑4D(SEMA4D)的分离的结合分子。

【技术特征摘要】
2012.05.11 US 61/646,119;2013.03.15 US 13/842,5231.一种促进表现出至少一种中枢神经系统疾病的症状的患者中神经组织的神经发生的方法，该方法包括向有需要的受试者给药有效量的特异性结合脑信号蛋白-4D(SEMA4D)的分离的结合分子。2.根据权利要求1的方法，其中所述经分离的结合分子抑制SEMA4D活性。3.权利要求1的方法，其中所述抑制的SEMA4D活性是二聚活性。4.权利要求1的方法，其中所述经分离的结合分子抑制SEMA4D与受体或该受体一部分的相互作用。5.权利要求4的方法，其中所述受体选自神经丛蛋白-B1、神经丛蛋白-B2或CD72。6.权利要求1的方法，其中所述经分离的结合分子竞争性地抑制选自VX15/2503或67的参比单克隆抗体与SEMA4D的特异性结合。7.权利要求1的方法，其中所述分离的结合分子特异性地结合至与选自VX15/2503或67的参比单克隆抗体相同的SEMA4D表位。8.权利要求1的方法，其中所述分离的结合分子包括抗体或其抗原结合片段。9.权利要求8的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段是或者衍生自单克隆抗体VX15/2503或67。10.权利要求8的方法，其中所述抗体是嵌合抗体、人抗体或人源化抗体。11.权利要求8的方法，其中所述抗体包括单克隆抗体VX15/2503或67的六个CDR。12.权利要求1的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·S·史密斯，M·佐德勒，
申请(专利权)人：瓦西尼斯公司，
类型：发明
国别省市：美国,US