针对程序性死亡-1(PD-1)的抗体制造技术

本公开提供了与程序性死亡‑1(PD‑1)蛋白结合的抗体药剂。明确提供了特定的免疫球蛋白重链多肽和免疫球蛋白轻链多肽序列。还提供了相关的核酸、载体、组合物和使用所述抗PD‑1抗体药剂治疗对PD‑1抑制有反应的病症或疾病，如癌症或感染性疾病的方法。

Antibody against programmed death-1 (PD-1)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对程序性死亡-1(PD-1)的抗体相关申请的交叉引用本申请要求以下美国临时申请序列号的权益：2016年2016年11月1日提交的62/416,128和2016年11月29日提交的62/427,777，两个临时申请的内容据此通过引用整体并入。
技术介绍
癌症是一个严重的公共卫生问题，根据美国癌症协会，2016年癌症事实与数据(http://www.cancer.org/acs/groups/content/@research/documents/document/acspc-047079.pdf)，仅2016年在美国预计有约595,690人会死于癌症。
技术实现思路
程序性死亡1(PD-1)(也称为程序性细胞死亡1)是268个氨基酸的I型跨膜蛋白，最初通过经历凋亡的小鼠T细胞系消减杂交而鉴定(Ishida等人，EmboJ.,11:3887-95(1992))。PD-1是CD28/CTLA-4家族T细胞调节因子的成员，并且在活化的T细胞、B细胞和骨髓谱系细胞上表达(Greenwald等人，Annu.Rev.Immunol.,23:515-548(2005)；和Sharpe等人，Nat.Immunol.,8:239-245(2007))。已经鉴定了PD-1的两种配体，PD配体1(PD-L1)和PD配体2(PD-L2)，两者均属于B7蛋白超家族(Greenwald等人，同上)。PD-L1在多种细胞类型中表达，包括肺、心脏、胸腺、脾和肾细胞(参见，例如，Freeman等人，J.Exp.Med.,192(7):1027-1034(2000)；和Yamazaki等人，J.Immunol.,169(10):5538-5545(2002))。在巨噬细胞和树突细胞(DC)上PD-L1表达响应于脂多糖(LPS)和GM-CSF处理而上调，在T细胞和B细胞上在经由T细胞和B细胞受体进行信号传导时PD-L1表达上调。PD-L1也在多种鼠肿瘤细胞系中表达(参见，例如，Iwai等人，Proc.Nat.lAcad.Sci.USA,99(9):12293-12297(2002)；和Blank等人，CancerRes.,64(3):1140-1145(2004))。相比之下，PD-L2表现出更受限制的表达模式并且主要由抗原呈递细胞(例如，树突细胞和巨噬细胞)和一些肿瘤细胞系表达(参见，例如，Latchman等人，Nat.Immunol.,2(3):261-238(2001))。肿瘤中的高PD-L1表达，无论是在肿瘤细胞、基质还是肿瘤微环境内的其他细胞上，都与不良的临床预后相关，可能是抑制效应T细胞和上调肿瘤中的调节性T细胞(Treg)。PD-1负调节T细胞活化，并且这种抑制功能与细胞质结构域中的免疫受体酪氨酸转换基序(ITSM)有联系(参见，例如，Greenwald等人，同上；和Parry等人,Mol.Cell.Biol.,25:9543-9553(2005))。PD-1缺乏可产生自身免疫性。例如，已经证实C57BL/6PD-1敲除小鼠会发展狼疮样综合征(参见，例如，Nishimura等人，Immunity,11:141-1151(1999))。在人类中，PD-1基因中的单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮、1型糖尿病、类风湿性关节炎和多发性硬化进展的较高发生率相关(参见，例如，Nielsen等人，TissueAntigens,62(6):492-497(2003)；Bertsias等人，ArthritisRheum.,60(1):207-218(2009)；Ni等人，Hum.Genet.,121(2):223-232(2007)；Tahoori等人，Clin.Exp.Rheumatol.,29(5):763-767(2011)；和Kroner等人，Ann.Neurol.,58(1):50-57(2005))。PD-1表达异常还已经牵涉于几种病理，诸如肿瘤免疫逃避和慢性病毒感染中的T细胞功能障碍(参见，例如，Barber等人，Nature,439:682-687(2006)；和Sharpe等人，同上)。最近的研究证明，PD-1诱导的T细胞抑制也在抑制抗肿瘤免疫中起作用。例如，PD-L1在多种人和小鼠肿瘤上表达，并且PD-1与肿瘤上的PD-L1结合导致T细胞抑制及肿瘤免疫逃避和保护(Dong等人，Nat.Med.,8:793-800(2002))。已经将肿瘤细胞对PD-L1的表达与它们在体外对于受抗肿瘤T细胞溶解的抗性直接联系起来(Dong等人，同上；和Blank等人，CancerRes.,64:1140-1145(2004))。PD-1敲除小鼠对肿瘤攻击有抗性(Iwai等人，Int.Immunol.,17:133-144(2005))，并且来自PD-1敲除小鼠的T细胞，当过继转移到荷瘤小鼠时，在肿瘤排斥中非常有效(Blank等人，同上)。使用单克隆抗体阻断PD-1抑制信号可以增强小鼠中的宿主抗肿瘤免疫(Iwai等人，同上；和Hirano等人，CancerRes.,65:1089-1096(2005))，并且肿瘤中高水平的PD-L1表达与许多人类癌症类型的预后不良相关(Hamanishi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,104:3360-335(2007)，Brown等人，J.Immunol.,170:1257-1266(2003)；和Flies等人，YaleJournalofBiologyandMedicine,84(4):409-421(2011))。鉴于前述内容，已经开发了用于抑制PD-1活性以治疗各种类型的癌症和用于免疫增强(例如，以治疗感染性疾病)的策略(参见，例如，Ascierto等人，Clin.Cancer.Res.,19(5):1009-1020(2013))。在这方面，已经开发了靶向PD-1的单克隆抗体用于治疗癌症(参见，例如，Weber,Semin.Oncol.,37(5):430-4309(2010)；和Tang等人，CurrentOncologyReports,15(2):98-104(2013))。例如，纳武单抗(nivolumab)(也称为BMS-936558)在I期临床试验中在非小细胞肺癌、黑素瘤和肾细胞癌中产生完全或部分反应(参见，例如，Topalian,NewEnglandJ.Med.,366:2443-2454(2012))，目前正处于III期临床试验中。MK-3575是针对PD-1的人源化单克隆抗体，其在I期临床试验中已经显示出抗肿瘤活性的证据(参见，例如，Patnaik等人，2012AmericanSocietyofClinicalOncology(ASCO)AnnualMeeting,Abstract#2512)。另外，最近的证据表明，靶向PD-1的疗法可以加强针对病原体诸如HIV的免疫反应(参见，例如，Porichis等人，Curr.HIV/AIDSRep.,9(1):81-90(2012))。然而，尽管取得了这些进展，但这些潜在疗法在人类中的功效可能有限。需要另外的PD-1拮抗剂(例如抗体)，其以高亲和力结合PD-1并有效中和PD-1活性。本公开提供了抗体药剂和与之有关的各种组本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能够结合程序性死亡1(PD‑1)的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO:1具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.01 US 62/416,128;2016.11.29 US 62/427,7771.一种能够结合程序性死亡1(PD-1)的多肽，其中所述多肽包含与SEQIDNO:1具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。2.一种重链多肽，其包含与SEQIDNO:1具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。3.根据权利要求3所述的重链多肽，其中所述多肽结合程序性死亡1(PD-1)。4.一种能够结合程序性死亡1(PD-1)的多肽，其中所述多肽包含与SEQIDNO:2具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。5.一种轻链多肽，其包含与SEQIDNO:2具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。6.根据权利要求5所述的重链多肽，其中所述多肽结合PD-1。7.一种多肽，其包含权利要求1-3中任一项所述的多肽和/或权利要求4-6中任一项所述的多肽，其中所述多肽包含至少一个由第一半胱氨酸和第二半胱氨酸形成的二硫键，并且其中：i)所述第一半胱氨酸选自SEQIDNO:1的残基22、96、130、143、199、222、225、257、317、363和421，并且所述第二半胱氨酸选自SEQIDNO:2的残基23、88、134、194和214；ii)所述第一半胱氨酸选自SEQIDNO:1的残基22、96、130、143、199、222、225、257、317、363和421，并且所述第二半胱氨酸选自SEQIDNO:1的22、96、130、143、199、222、225、257、317、363和421iii)所述第一半胱氨酸选自SEQIDNO:2的残基23、88、134、194和214，并且所述第二半胱氨酸选自SEQIDNO:2的残基23、88、134、194和214。8.根据权利要求1-7中任一项所述的多肽，其中所述多肽含有至少一个糖基化的天冬酰胺。9.一种分离的核酸序列，其编码包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽。10.一种分离的核酸序列，其编码包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽。11.一种分离的核酸，其序列包含SEQIDNO:3。12.一种分离的核酸，其序列包含SEQIDNO:4。13.一种载体，其包含权利要求9-12中任一项所述的分离的核酸序列。14.一种分离的细胞，其包含权利要求13所述的载体。15.一种抗体药剂，其包含权利要求1-8中任一项所述的多肽。16.根据权利要求15所述的抗体药剂，其中所述抗体药剂包含氨基酸序列含有SEQIDNO:1的多肽和氨基酸序列含有SEQIDNO:2的多肽。17.根据权利要求15或16所述的抗体药剂，其中所述抗体药剂结合TIM-3。18.根据权利要求15-17中任一项所述的抗体药剂，其中所述抗体药剂以约1皮摩尔(pM)至约100微摩尔(μM)的KD结合TIM-3。19.一种组合物，其包含(a)权利要求1-8中任一项所述的多肽，(b)权利要求9-12中任一项所述的分离的核酸，(c)权利要求13所述的载体，(d)权利要求14所述的分离的细胞，或(e)权利要求15-18中任一项所述的抗体药剂。20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述组合物还包含药学上可接受的载剂。21.一种治疗哺乳动物中对PD-1抑制有反应的病症的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用有效量的权利要求1-8中任一项所述的多肽，权利要求9-12中任一项所述的分离的核酸，权利要求13所述的载体，权利要求14所述的分离的细胞，权利要求15-18中任一项所述的抗体药剂，或权利要求19或20所述的组合物，由此在所述哺乳动物中治疗所述病症。22.一种在患有对PD-1抑制有反应的病症的哺乳动物中诱导免疫反应的方法，其包括向所述哺乳动物施用有效量的选自由以下项组成的组的PD-1药剂：权利要求1-8中任一项所述的多肽，权利要求9-12中任一项所述的分离的核酸，权利要求13所述的载体，权利要求14所述的分离的细胞，权利要求15-18中任一项所述的抗体药剂，或权利要求19或20所述的组合物，由此在所述哺乳动物中诱导所述免疫反应。23.一种在患有对PD-1抑制有反应的病症的哺乳动物中增强免疫反应或增加免疫细胞活性的方法，其包括向所述哺乳动物施用有效量的选自由以下项组成的组的PD-1药剂：权利要求1-8中任一项所述的多肽，权利要求9-12中任一项所述的分离的核酸，权利要求13所述的载体，权利要求14所述的分离的细胞，权利要求15-18中任一项所述的抗体药剂，或权利要求19或20所述的组合物，由此在所述哺乳动物中增强所述免疫反应或增加所述免疫细胞活性。24.根据权利要求22或23所述的方法，其中所述免疫反应是体液或细胞介导的免疫反应。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述免疫反应是CD4或CD8T细胞反应。26.根据权利要求24所述的方法，其中所述免疫反应是B细胞反应。27.根据权利要求21-26中任一项所述的方法，其中所述病症为癌症。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述癌症是：i)与高肿瘤突变负荷(TMB)相关的癌症；ii)微卫星稳定(MSS)的癌症，iii)特征在于微卫星不稳定性的癌症，iv)具有高度微卫星不稳定状态(MSI-H)的癌症，v)具有低度微卫星不稳定状态(MSI-L)的癌症，vi)与高TMB和MSI-H相关的癌症，vii)与高TMB和MSI-L或MSS相关的癌症，viii)具有缺陷性DNA错配修复系统的癌症，ix)具有DNA错配修复基因缺陷的癌症，x)超突变癌症，xi)包含聚合酶ε(POLE)突变的癌症，xii)腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、睾丸癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结直肠癌、胃癌、小肠癌、肛殖区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食道癌、...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·J·金，M·凯瑞，B·黄，
申请(专利权)人：安奈普泰斯生物有限公司，泰萨罗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US