B和T淋巴细胞衰减因子（BTLA）调节剂及其使用方法技术

一种BTLA结合剂和所述结合剂的免疫球蛋白重链和轻链多肽，以及使用所述BTLA结合剂治疗对BTLA激动作用有反应的病症或疾病，如自身免疫性疾病或炎性疾病的方法。免疫性疾病或炎性疾病的方法。免疫性疾病或炎性疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)调节剂及其使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本专利申请要求2021年5月25日提交的美国临时专利申请63/192,984和2020年10月23日提交的美国临时专利申请63/105,067的优先权，其全部公开内容由此通过引用并入。
[0003]以电子方式提交的材料的通过引用的并入
[0004]通过引用整体并入本文的是与此同时提交的计算机可读的核苷酸/氨基酸序列表。

技术介绍

[0005]T淋巴细胞通过T细胞受体(TCR)结合和来自共刺激分子的阳性信号的共同作用而从幼稚态(state)被激活。相反，共抑制分子通过传递阴性信号来抵消阳性共刺激信号而在调节T细胞活性中发挥重要作用。共抑制分子作为检查点来维持对自身的免疫耐受性并在解决如感染和炎症等免疫损伤后控制激活的T细胞。
[0006]CD28是T细胞上的主要共刺激分子，其一旦与抗原呈递细胞(APC)表面上的配体B7.1或B7.2结合，就传递增强T细胞增殖和分化的细胞内信号，同时伴随TCR结合。当相同的配体与T细胞上的共抑制分子细胞毒性T淋巴细胞抗原
‑
4(CTLA
‑
4)结合时，T细胞增殖和效应子功能受到抑制(Chambers等人,《免疫学年评(Ann.Rev.Immunol.)》,19:565
‑
594,2001；Egen等人,《自然
‑
免疫学(Nature Immunol.)》,3:611
‑
618,2002)。类似地，当表达PD
‑
L1的细胞与T细胞上的共抑制分子PD
‑
1结合时，T细胞增殖和效应子功能也受到抑制(Carter等人《欧洲免疫学杂志(Eur J Immunol.)》,32:634
‑
43,2002)。
[0007]阴性检查点信号的功能障碍可能通过阻止通常控制自身反应性B和T淋巴细胞的抑制信号而导致慢性炎性病状。在患有自身免疫性病症的患者中，免疫系统对正常身体组织的反应就像它们是外来的一样，并且组织可能被激活的T细胞和B细胞浸润，这些细胞已经破坏了对自身抗原的耐受性。因此，自身免疫性T和B淋巴细胞介导炎症和组织损伤。表达如B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)、细胞毒性T淋巴细胞抗原
‑
4(CTLA
‑
4)和PD
‑
1等共抑制分子的淋巴细胞通常被组织中表达相对应配体的其它免疫或非免疫细胞抑制。
[0008]在各种癌症的动物模型中，已表明共抑制分子的敲除或共抑制相互作用的药理学阻断可释放抑制性破坏并诱导肿瘤特异性T细胞群的扩增，并且引导它们攻击和杀灭肿瘤细胞。BTLA基因敲除的小鼠对实验性自身免疫性脑脊髓炎的敏感性增加(Watanabe等人,《自然
‑
免疫学(Nat.Immunol.)》,4:670
‑
679,2003)。相反，已表明靶向小鼠BTLA的激动剂抗体可抑制T细胞活性，并且已在移植物抗宿主病(GvHD)小鼠模型中证明其功效(Albring等人,《实验医学杂志(J.Exp.Med.)》,207:2551
‑
2559,2010)。
[0009]BTLA的配体是疱疹病毒进入介质(HVEM)，也被称为肿瘤坏死因子受体超家族成员14(TNFRSF14)。HVEM也是一种阳性共刺激分子，其结合两种分泌生长因子，淋巴毒素α和LIGHT，并且也供单纯疱疹病毒(HSV)进入细胞所用。肿瘤细胞或其它免疫细胞上表达的HVEM使BTLA在T细胞上结合，产生了阴性抑制信号。结合并激动BTLA的抗BTLA抗体可以诱导
类似于天然配体HVEM传递的直接阴性信号，从而抑制自身免疫性和炎性疾病中的自身反应性T细胞和B细胞反应。此外，与BTLA结合而不干扰天然HVEM
‑
BTLA相互作用的激动剂抗体可以增强天然共抑制信号。
[0010]因此，需要能够结合BTLA并调节免疫检查点信号的试剂。
[0011]
技术实现思路
简述
[0012]本文提供了包含免疫球蛋白重链和轻链多肽的BTLA结合剂。本文还提供了一种使用BTLA结合剂调节哺乳动物中的HVEM和BTLA之间的相互作用和/或T细胞反应的方法。
[0013]还提供了相关的组合物和方法，这将从以下详细描述中显而易见。
[0014]附图的几点看法的简要说明
[0015]图1描绘了6G3抗体与人BTLA和食蟹猴BTLA胞外结构域的表面等离子体共振结合动力学的结果。
[0016]图2是描绘6G3抗体与人BTLA和食蟹猴BTLA胞外结构域的动力学排除分析法结合动力学的结果的图。
[0017]图3是描绘6G3抗体与用人BTLA和食蟹猴BTLA稳定转染的293c18细胞的结合的结果的图。
[0018]图4是描绘6G3抗体与正常供体人外周血CD4
+
T细胞、CD8
+
T细胞和CD20
+
B细胞的结合的结果的图。
[0019]图5A是描绘6G3抗体与正常食蟹猴外周血CD3
+
T细胞的结合的结果的图。
[0020]图5B是描绘6G3抗体与正常食蟹猴外周血CD20
+
B细胞的结合的结果的图。
[0021]图5C是描绘参考抗BTLA抗体与正常食蟹猴外周血CD3
+
和CD3
‑
细胞的结合的结果的流式细胞术点图。
[0022]图5D是描绘6G3抗体与正常食蟹猴外周血CD3
+
和CD3
‑
细胞的结合的结果的流式细胞术点图。
[0023]图6是描绘竞争测定的结果的图，其示出了抗BTLA抗体在与用人BTLA稳定转染的293c18细胞结合方面与HVEM
‑
Fc和预先形成的HVEM
‑
Fc/三聚LIGHT复合物竞争的能力。
[0024]图7A是人BTLA胞外结构域(黑色)的晶体结构的带状模型图，其与人HVEM胞外结合结构域(灰色)的晶体结构的空间填充模型对接。所述模型描绘了氢
‑
氘交换实验的结果，其绘出了由6G3抗体结合的人BTLA上的肽。
[0025]图7B是人BTLA胞外结构域(黑色)的晶体结构的带状模型图，其与人HVEM胞外结合结构域(灰色)的晶体结构的空间填充模型对接。所述分子相较于图7A中示出的分子视图旋转了30
°
并且描绘了氢
‑
氘交换实验的结果，其绘出了由参考抗BTLA拮抗剂抗体结合的人BTLA上的肽。
[0026]图8是描绘当BTLA和HVEM在相同细胞上表达时，在测量LIGHT诱导的HVEM信号传导的HVEM
‑
NF
‑
κB HEK 293萤光素酶报告基因测定中的6G3抗体的抑制活性的图。
[0027]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种BTLA结合剂，其包含：免疫球蛋白重链可变区，其包含：(a)包含X1SX2MN(SEQ ID NO:195)的CDRH1，其中X1是N或T，并且X2是W、F、H、G、P、R、K、D、S、L、V、N或Y(b)包含RIYPX1GX2X3DTNYX4GKFK(SEQ ID NO:196)的CDRH2，其中：X1不存在或是A；X2是D、Y、Q、G、L、F、H、S、P、R或T；X3是G、Y、A、F、S、D、V、T、E、K或R；并且X4是N、V、Q、R、A、F、Y、S、G、P或T；和(c)包含X1SGTFX2X3GNYX4X5YFDV(SEQ ID NO:197)的CDRH3，其中：X1是K或R；X2是N或D；X3是D、S、F、Y、F、V、S、G、T、R、I、L或E；X4是R或H；并且X5是W、R、F、L、N、Y、P、I、V、A、S、G、R或K；或包含SEQ ID NO:43
‑
156中的任一者或至少其CDR的免疫球蛋白重链可变区；或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列；和免疫球蛋白轻链可变区，其包含：(a)包含RX1SENIYX2X3LA(SEQ ID NO:198)的CDRL1，其中X1是A或V；X2是S或N；并且X3是H、N或Y；(b)包含X1AX2NLAX3(SEQ ID NO:199)的CDRL2，其中X1是A或N；X2是T或K；并且X3是N、L、Q、G、F、V、K、S、R、T、H或P；和(c)包含QX1FX2GPPLT(SEQ ID NO:200)的CDRL3，其中X1是L或H；并且X2是W、F、Y、P、N、V、K、M、L、G或S；或包含SEQ ID NO:157
‑
192中的任一者或至少其CDR的免疫球蛋白轻链可变区；或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列；或表3中列出的BTLA结合剂。2.根据权利要求1所述的BTLA结合剂，其中所述免疫球蛋白重链多肽包含以下序列：QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYX1FSX2SX3MNWVRQAPGQGLEWMGRIYPX4GX5X6DTNYX7GKFKGRVTITADKX8TX9TAYMELX
10
SLRSEX
11
TAVX
12
YX
13
CAX
14
SGTFX
15
X
16
GNYX
17
X
18
YFDVWGKGTTVTVSSA(SEQ ID NO:193)，其中X1是A或V；
X2是N或T；X3是W、F、H、G、P、R、K、D、S、L、V、N或Y；X4不存在或是A；X5是D、Y、Q、G、L、F、H、S、P、R或T；X6是G、Y、A、F、S、D、V、T、E、K或R；X7是N、V、Q、R、A、F、Y、S、G、P或T；X8是S或F；X9是S、T或N；X
10
是S或R；X
11
是D或V；X
12
不存在或是Y；X
13
是Y或F；X
14
是K或R；X
15
是N或D；X
16
是D、S、F、Y、F、V、S、G、T、R、I、L或E；X
17
是R或H；并且X
18
是W、R、F、L、N、Y、P、I、V、A、S、G、R或K。3.根据权利要求1或2所述的BTLA结合剂，其中所述免疫球蛋白重链多肽包含SEQ ID NO:43
‑
156中的任一者或至少其CDR；或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的BTLA结合剂，其中所述免疫球蛋白轻链多肽包含以下序列：X1IQX2TQSPSSLSASVGDRVTITCRX3SENIYX4X5LAWYQQKX6GKAPKLLIYX7AX8NLA X9GVPSRFSGSGSGTDX
10
TLTISSLQPEDFATYYCQX
11
FX
12
GPPLTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO:194)，其中X1是A或D；X2是L或M；X3是A或V；X4是S或N；X5是H、N或Y；X6是P或Q；X7是A或N；X8是T或K；X9是N、L、Q、G、F、V、K、S、R、T、H或P；X
10
是F或Y；X
11
是L或H；X
12
是W、F、Y、P、N、V、K、M、L、G、S。5.根据权利要求1至4中任一项所述的BTLA结合剂，其中所述免疫球蛋白轻链多肽包含SEQ ID NO:157
‑
192中的任一者或至少其CDR；或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。6.根据权利要求1至5中任一项所述的BTLA结合剂，其包含
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Xaa1 Thr Xaa2 Thr Asp Tyr Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Asp Lys Phe Lys Xaa3 Arg Val Thr Ile Thr Xaa4 Asp Xaa5 Ser Xaa6 Xaa7 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Xaa8 Cys Ala Arg Arg Xaa9 Xaa10 Tyr Xaa11 Met Xaa12 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala(SEQ ID NO:26)，其中：Xaa1是苯丙氨酸(Phe)或酪氨酸(Tyr)，Xaa2是苯丙氨酸(Phe)或亮氨酸(Leu)，Xaa3是天冬氨酸(Asp)或缬氨酸(Val)，Xaa4是丙氨酸(Ala)或精氨酸(Arg)，Xaa5是赖氨酸(Lys)或苏氨酸(Thr)，Xaa6是丙氨酸(Ala)或丝氨酸(Ser)，Xaa7是丝氨酸(Ser)或苏氨酸(Thr)，Xaa8是酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)，Xaa9是天冬酰胺(Asn)或丝氨酸(Ser)，Xaa10是酪氨酸(Tyr)或组氨酸(His)，Xaa11是丙氨酸(Ala)或缬氨酸(Val)，并且Xaa12是谷氨酸(Glu)或天冬氨酸(Asp)。12.根据权利要求8至11中任一项所述的BTLA结合剂，其中所述结合剂包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:1
‑
15、207、208、217或218中的任一者或至少其CDR，或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。13.根据权利要求8至12中任一项所述的BTLA结合剂，其中所述结合剂包含轻链可变区，所述轻链可变区包含氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：安奈普泰斯生物有限公司，
类型：发明
国别省市：