The invention discloses a set of species-specific primers for rapid identification of Pomacea canaliculata based on PCR, whose sequence is: upstream primer is SEQ ID NO:1 or its complementary sequence; downstream primer is SEQ ID NO:2 or its complementary sequence. The invention also discloses a method for specific detection of canaliculus snail, which comprises the following steps: (1) extracting genomic DNA from the target sample; (2) taking the genomic DNA of the extracted target sample as a template, and using the specific primer provided by the invention to amplify PCR; 3) agarose gel electrophoresis for PCR products, and observing whether the specific location of the target position is brought. To determine whether the species of Fushou snail is Fushou tubule snail. The specific primer of the invention has the advantages of fast detection process, accurate detection result, high separation rate and strong reliability, and can realize high-throughput detection of a large number of samples. The method is simple and easy to operate, and the detection cost is extremely low.
【技术实现步骤摘要】
一组鉴别小管福寿螺的特异性引物对及方法和应用
本专利技术涉及生物
,特别是涉及一种鉴别小管福寿螺的特异性引物对及方法和应用。
技术介绍
福寿螺隶属于软体动物们(Mollusca),腹足纲(Gastropoda),新进腹足目(Caeogastropoda),瓶螺科(Ampullariidae),福寿螺属(PomaceaPerry,1810)。福寿螺自20世纪80年代初作为食物引种并定殖到我国,但由于其口味欠佳而被人们弃养,并在田间大量繁殖;目前该螺已迅速扩展到浙江、福建、广东、广西、海南、云南、贵州、江西、四川、重庆、湖南和安徽等省份并为害成灾。福寿螺个体大、食性广、适应性强、生长繁殖快、产量高,其中小管福寿螺(PomaceacanaliculataLamarck,1822)是我国首批列入的外来入侵物种。2010年我国首次报道有福寿螺属的另一个种斑点福寿螺P.maculata存在(潘颖瑛等,2010),且被检出有广泛分布(Lvetal.,2012)。以上两种福寿螺对我国的侵入造成危害了广泛的水稻种植区,同时对生态环境造成极大的影响。这两种福寿螺是我国广州管圆线虫的主要中间宿主,广州管圆线虫病是一种人兽共患病,感染者的症状为剧烈头痛、恶心、呕吐、发热、昏迷、精神失常等,严重者可造成死亡或有后遗症。浙江温州和福建长乐等地广州管圆线虫病暴发均由食用福寿螺引起。福寿螺成为我国传播广州管圆线虫的重要中间宿主,也引起广泛寄生虫学者们的重视。小管福寿螺与斑点福寿螺为同属的近缘物种,在栖息环境、形态特征等诸多方面具有高度的相似性,均具备高度的环境适应能力,以及强大的繁 ...
【技术保护点】
1.一组鉴别小管福寿螺的特异性引物对,其特征在于,所述特异性引物对的核苷酸序列为:Pc‑F:5’‑ATGATAGCATCGCATCTTCT,或其互补序列;Pc‑R:5’‑TCGTTGTTGGCACTTCTAA,或其互补序列。
【技术特征摘要】
1.一组鉴别小管福寿螺的特异性引物对,其特征在于,所述特异性引物对的核苷酸序列为:Pc-F:5’-ATGATAGCATCGCATCTTCT,或其互补序列;Pc-R:5’-TCGTTGTTGGCACTTCTAA,或其互补序列。2.一种基于PCR快速鉴别小管福寿螺的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)提取待测福寿螺样本的基因组DNA;2)以步骤1)提取的基因组DNA为模板,用如SEQIDNO:1所示和如SEQIDNO:2所示的一对特异性引物进行PCR扩增;3)对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳实验,在凝胶成像仪下进行观察,查看目标位置625bp是否出现特异性条带。3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤2)中进行PCR扩增的PCR反应体系为:每个PCR反应的总体积为20μl,包含11.6μlH2O、2μl10×Buffer、2μldNTP、0.4μlTaq、特异性...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡薇,李健,朱世林,冉甄,易存,相慢玉,郭云海,张仪,
申请(专利权)人:复旦大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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