The invention relates to the field of biotechnology, in particular to primers, primer combinations, kits and their applications. The present invention detects at least 17 NPM1 mutations specifically at the level of DNA by using multiple mixed primers one-time digital droplet quantitative PCR (digital droplet PCR). The detection of minimal residual lesions after AML treatment can also be used to identify NPM1 mutations in newly diagnosed patients.
【技术实现步骤摘要】
引物、引物组合、试剂盒及其应用
本专利技术涉及生物
，特别涉及引物、引物组合、试剂盒及其应用。
技术介绍
微小残留病变(MRD)是指血液系统肿瘤在接受治疗后获得组织形态学缓解，无临床症状但仍然存在在体内的亚显微镜病变。目前临床多用PCR和流式细胞仪进行检测。急性髓细胞白血病(AML)是成人白血病中最大一个种类，约占50％-70％，是重要的致死性疾病。近年来随着治疗方法的不断改进，获得形态学缓解的患者比率越来越高，但大部分病人在获得缓解后仍然复发。了解获得显微镜下的形态学缓解患者体内是否存在肿瘤细胞，进而决定是否需要进一步治疗，是预防复发的关键步骤。然而，由于AML的异质性，对于缓解期的AML患者进行MRD检测没有统一的方法。最常用的方法是利用AML细胞中的融合基因进行检测。但所有融合基因(如PML-RARA,AML1-ETO)阳性的患者加在一起占AML的比率为30％，大多数AML没有特异性的融合基因。其它基因突变是否可以作为AML跟踪的标志一直存在争论，因为一些突变(如DNMT3A)在获得长期缓解的患者的骨髓细胞中仍然存在。另外，做为MRD跟踪的标志也需在A...
【技术保护点】
1.一种ddPCR(digitaldropletPCR)检测试剂盒，其特征在于，包含如下引物：顺向通用引物，序列如SEQ ID NO:7所示；逆向引物，序列如SEQ ID NO:2～6所示。
【技术特征摘要】
1.一种ddPCR(digitaldropletPCR)检测试剂盒，其特征在于，包含如下引物：顺向通用引物，序列如SEQIDNO:7所示；逆向引物，序列如SEQIDNO:2～6所示。2.权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，进一步包括对照引物组，所述对照引物序列如SEQIDNO:8和9所示。3.权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，进一步包括探针和可接受的试剂，所述探针的序列如SEQIDNO:10和11所示。4.权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述顺向通用引物的浓度为20～40pmol/μl，所述逆向引物的浓度分别为4～8pmol/μl，所述对照引物的浓度分别为4～8pmol/μl，所述探针的浓度分别为4～8pmol/μl。5.引物组在ddPCR检测NPM1基因或其突变中的应用以及在...
【专利技术属性】
技术研发人员：王阳，刘进，马冉冉，崔欢喜，任用，
申请(专利权)人：南京先声医学检验有限公司，江苏先声医学诊断有限公司，北京先声医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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