一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体制造技术

本发明专利技术公开了一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体，通过载体表达靶向Spodoptera frugiperda和Trichoplusia ni昆虫细胞caspase‑1共有序列的siRNA，实现广谱抗细胞凋亡的效果。该杆状病毒载体上含有一段特定的DNA序列，这段DNA序列包含RNA聚合酶III启动子转录的靶向Sf‑caspase‑1和Tn‑caspase‑1共有序列的siRNA序列；该载体的重组病毒可以在宿主细胞中表达双链小RNA，通过RNA干扰途径沉默宿主细胞编码的caspase‑1，从而抑制宿主细胞的凋亡，使外源蛋白表达水平显著提高。本发明专利技术可用蛋白制剂和疫苗的工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体
本专利技术属于重组蛋白质表达
，尤其涉及一种在多种昆虫细胞中抗凋亡的杆状病毒表达载体。
技术介绍
杆状病毒是特异感染节肢动物的双链DNA病毒，苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒（Autographacalifornicanucleopolyhedrovirus,AcMNPV）是杆状病毒的模式种。自从1983年SmithGE等首次用杆状病毒在昆虫细胞中表达人β-干扰素基因以来，由于具有低成本、高产量，而且具备各种翻译后修饰系统等优点，杆状病毒表达载体系统在科研和生产中被广泛应用。杆状病毒表达系统是一种瞬时表达系统，昆虫细胞被病毒感染3-4天后就会凋亡。基于晚期启动子的杆状病毒表达系统的表达时限是从感染后20小时开始至宿主细胞死亡。如果能延长感染细胞的存活时间，就能增加外源重组蛋白的产量。细胞凋亡是宿主抵御病毒侵染的策略之一，其中细胞编码的caspase活性对细胞凋亡非常重要。而草地贪夜蛾（Spodopterafrugiperda,Sf）细胞中目前研究最多的caspase是执行caspaseSf-caspase-1。2007年，中国台湾一个课题组用RNA干本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体，其特征在于，该抗凋亡的重组杆状病毒载体可以转录一段靶向Spodoptera frugiperda和Trichoplusia ni caspase‑1共有序列SEQ ID NO:1的siRNA。

【技术特征摘要】
1.一种广谱抗凋亡杆状病毒表达载体，其特征在于，该抗凋亡的重组杆状病毒载体可以转录一段靶向Spodopterafrugiperda和Trichoplusianicaspase-1共有序列SEQIDNO:1的siRNA。2.如权利要求1所述的siRNA，其特征在于，加工后的RNA介导的沉默复合体中，引导链（guidestrand）编码序列为SEQIDNO:2或SEQIDNO:3。3.如权利要求1所述的抗宿主凋亡的重组杆...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：陕西杆粒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61