一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体制造技术

技术编号:24963664 阅读:47 留言:0更新日期:2020-07-21 15:03
本发明专利技术公开了一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体。杆状病毒表达系统不具有显著的剂量效应,即高病毒滴度并不能提高外源基因的产量。其原因是高滴度诱导了晚期表达因子LEF‑10的聚集,进而抑制了晚期基因的表达。该载体通过突变LEF‑10第21位亮氨酸位点,使LEF‑10聚集倾向性降低。用高滴度突变型杆状病毒感染昆虫细胞,可以显著提高晚期启动子控制的外源基因的表达量。表达产量的提高能显著降低企业的生产成本。该杆状病毒表达载体可用于生物制品工业领域,特别是亚单位疫苗工业领域。

【技术实现步骤摘要】
一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体
本专利技术属于重组蛋白质表达
,尤其涉及一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体。
技术介绍
杆状病毒是特异感染节肢动物的双链DNA病毒,苜蓿银纹夜蛾多核型多角体病毒(Autographacalifornicanucleopolyhedrovirus,AcMNPV)是杆状病毒的模式种。自从1983年SmithGE等首次用杆状病毒在昆虫细胞中表达人β-干扰素基因以来(MolCellBiol.1983;3:2156-65),由于具有低成本、高产量,而且具备各种翻译后修饰系统等优点,杆状病毒表达载体系统在科研和生产中被广泛应用。在蛋白质表达领域,人们公认基因表达具有剂量效应的,即基因的拷贝数和蛋白的表达量有一定的正相关性,但是杆状病毒表达系统是个特例。在很久以前研究人员就发现,感染昆虫细胞时,随着病毒滴度的提高,外源蛋白的表达量并没有明显提高;在更高的滴度下蛋白的产量反而下降了(BiotechnolBioeng.1994;44:710-719)。杆状病毒表达系统是个瞬时表达系统,在工业使用上,人本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体,其特征在于,该载体通过突变晚期表达因子LEF-10第21位亮氨酸残基,降低其聚集倾向性。/n

【技术特征摘要】
1.一种解除高滴度抑制的杆状病毒表达载体,其特征在于,该载体通过突变晚期表达因子LEF-10第21位亮氨酸残基,降低其聚集倾向性。


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【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人
申请(专利权)人:陕西杆粒生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:陕西;61

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