【技术实现步骤摘要】
一种用于对虾的假型昆虫杆状病毒基因转移系统、病毒及构建方法和应用
本专利技术涉及基因工程
,具体涉及一种用于对虾的假型昆虫杆状病毒基因转移系统、病毒及构建方法和应用,即一种嗜对虾的假型昆虫杆状病毒基因转移系统、嗜对虾的假型昆虫杆状病毒及构建方法和在对虾成体组织与对虾细胞(体外培养细胞)中的应用。
技术介绍
Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统(Invitrogen产品),已是一种很成熟的昆虫细胞基因转移技术。该系统由转移质粒、辅助质粒、杆状病毒Bacmid质粒以及感受态细胞DH10Bac组成,是基于大肠杆菌转座酶Tn7的转座原理,成功实现在大肠杆菌中快速将外源基因重组到杆状病毒Bacmid质粒中,并扩增重组杆状病毒的目的。其中,转移质粒(pFASTBac1)的特点:在其昆虫强启动子PPH(多角体蛋白基因启动子)及其之后的多克隆酶切位点的两翼各插入转座酶Tn7的左右识别位点Tn7L和Tn7R;杆状病毒质粒(Bacmid)的特点:插入了原核细胞低拷贝质粒复制子(mini-F)、卡那霉素抗性基因以及插入了转座酶识 ...
【技术保护点】
1.一种用于对虾的假型昆虫杆状病毒基因转移系统,其特征在于,所述基因转移系统包括Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统、对虾病毒囊膜蛋白基因表达质粒和昆虫包装细胞。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于对虾的假型昆虫杆状病毒基因转移系统,其特征在于,所述基因转移系统包括Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统、对虾病毒囊膜蛋白基因表达质粒和昆虫包装细胞。
2.根据权利要求1所述的基因转移系统,其特征在于,所述对虾病毒囊膜蛋白基因表达质粒包括对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白基因表达质粒。
3.根据权利要求1或2所述的基因转移系统,其特征在于,所述对虾病毒囊膜蛋白基因表达质粒中所述囊膜蛋白基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
4.根据权利要求1或2所述的基因转移系统,其特征在于,所述对虾病毒囊膜蛋白基因表达质粒的构建用骨架载体包括pcDNA3.1。
5.基于权利要求1~4任一项所述基因转移系统的用于对虾的假型昆虫杆状病毒的构建方法,包括以下步骤:
1)利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系...
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