一种纳豆激酶片剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种纳豆激酶片剂的制备方法，其解决纳豆过度发酵存在氨味的问题。其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡并且蒸煮，蒸煮完毕后除去部分液体；（2）接种枯草芽孢杆菌并且发酵；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G‑50柱进行柱层析；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。本发明专利技术的方法实现了清新无味的纳豆激酶片剂的制备，其制备方法工艺合理、技术可靠，且纳豆激酶活性较高。该方法可以广泛用于纳豆产品的深加工和保健品的制备。

A preparation method of nattokinase tablet

The invention discloses a preparation method of nattokinase tablet, which solves the problem of ammonia flavor in the excessive fermentation of natto. It includes the following steps: (1) the soybean soaking and cooking, cooking liquid is removed after; (2) inoculated with Bacillus subtilis and fermentation; (3) adding water to a mixture of 2 steps of natto fermentation in the fermentation, followed by homogenate, followed by centrifugation and the supernatant was collected; (4) will be obtained in step 3 the supernatant of ultra filtration, ultrafiltration liquid obtained; (5) using Sephadex G column chromatography column was 50; (6) the 5 steps concentrate obtained lyophilized to obtain the powder, then add the excipient compressed into tablets. The method of the invention realizes the preparation of fresh and tasteless nattokinase tablet, the preparation method is reasonable, the technology is reliable, and the activity of nattokinase is high. This method can be widely used in the deep processing of natto products and the preparation of health care products.

【技术实现步骤摘要】
一种纳豆激酶片剂的制备方法
本专利技术涉及含有来自植物的医用配制品，尤其是一种纳豆激酶片剂的制备方法。
技术介绍
纳豆起源于中国，自中国秦汉（公元前221年-公元220年）以来开始制作，由黄豆通过纳豆菌（枯草杆菌）发酵制成豆制品，具有黏性，气味较臭，味道微甜，不仅保有黄豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率，更重要的是发酵过程产生了多种生理活性物质，具有溶解体内纤维蛋白及其他调节生理机能的保健作用。纳豆富含多种营养素，常吃可以预防便秘、腹泻等肠道疾病，提高骨密度，预防骨质疏松，还可以双向调节血压，溶解陈旧血栓斑块，调节血脂，能消除疲劳，综合提高人体免疫力。纳豆尽管具有较好的保健功效，但是由于其可能存在过度发酵产生氨味，使得其难以得到推广。
技术实现思路
为了克服现有技术中纳豆过度发酵存在氨味的不足，本专利技术的目的是提供一种工艺合理、技术可靠纳豆激酶片剂的制备方法，利用该制方法得到一种纳豆激酶活性较高的保健食品。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡15-20小时，并且在0.10-0.15MPa的压力下蒸煮30-40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0-1.5；（2）在80-90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37-40摄氏度下发酵20-24小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4-8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。在本专利技术优选的方面，在步骤1中，将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2。在本专利技术优选的方面，在步骤2中，在发酵之前，向发酵混合物中加入酪氨酸钠盐达到25-50g/L，磷酸氢二钠达到10-15g/L，葡萄糖达到30-60g/L，大豆蛋白粉达到20-40g/L。在本专利技术优选的方面，在步骤2中，在发酵了16-18小时之后，在发酵混合物中加入乙醇达到40-60g/L并且继续发酵。在本专利技术优选的方面，在步骤2中，接种枯草芽孢杆菌的量为1.0-10×108CFU/g。在本专利技术优选的方面，在步骤2中，在85摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在38摄氏度下发酵22小时。在本专利技术优选的方面，在步骤3中，将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:5，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清。在本专利技术优选的方面，在步骤5中，使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液。在本专利技术优选的方面，在步骤6中，所述的赋形剂为淀粉。本专利技术的方法实现了清新无味的纳豆激酶片剂的制备，其制备方法工艺合理、技术先进可靠，并且纳豆激酶活性较高。该方法可以广泛用于纳豆产品的深加工和保健品的制备。具体实施方式除非另外地说明，在步骤2中，接种枯草芽孢杆菌的量为4.0×108CFU/g。该枯草芽孢杆菌的菌种购自沧州华雨生物科技有限公司。除非另外地说明，在步骤6中的压片工序中都压制成0.200g的药片，并且按照每千克纳豆原料压制200片的数量来进行辅料的加入和压片。实施例1在本实施例中，从10千克大豆开始进行实施。具体地，一种纳豆激酶片剂的制备方法，其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2；（2）在85摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在38摄氏度下发酵22小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:5，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入淀粉压制成片剂。实施例2在本实施例中，从10千克大豆开始进行进行实施。具体地，一种纳豆激酶片剂的制备方法，其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡20小时，并且在0.10MPa的压力下蒸煮40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.5；（2）在80摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在40摄氏度下发酵20小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为8，浓度为0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7，浓度为0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入淀粉赋形剂压制成片剂。实施例3在本实施例中，从10千克大豆开始进行进行实施。具体地，一种纳豆激酶片剂的制备方法，其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡15小时，并且在0.15MPa的压力下蒸煮30分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0；（2）在90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37摄氏度下发酵24小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7，浓度为0.08mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为8，浓度为0.08mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入淀粉赋形剂压制成片剂。实施例4本实施例和实施例1的方法类似，其区别在于：在步骤2中，在发酵之前，向发酵混合物中加入酪氨酸钠盐达到35g/L，磷酸氢二钠达到12g/L，葡萄糖达到45g/L，大豆蛋白粉达到32g/L。实施例5本实施例和实施例1的方法类似，其区别在于：在步骤2中，在发酵了17小时之后，在发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡15‑20小时，并且在0.10‑0.15MPa的压力下蒸煮30‑40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0‑1.5；（2）在80‑90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37‑40摄氏度下发酵20‑24小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4‑8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G‑50柱进行柱层析：使用pH为7‑8，浓度为0.08‑0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7‑8，浓度为0.08‑0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。

【技术特征摘要】
1.一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：（1）将大豆浸泡15-20小时，并且在0.10-0.15MPa的压力下蒸煮30-40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0-1.5；（2）在80-90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37-40摄氏度下发酵20-24小时；（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4-8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。2.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤1中，将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2。3.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤2中，在发酵之前，向发酵混合物中加...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓燕，
申请(专利权)人：荣成市飞创科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37