多肽组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种特异性肽组合。所述肽组合可存在于药学上可接受的组合物中。所述肽组合可用于治疗或预防1型糖尿病(TID)。本发明专利技术还涉及一种诊断或确定治疗功效的方法，所述方法利用所述特异性肽组合。

Polypeptide composition

The present invention relates to a combination of specific peptides. The combination of the peptide may exist in pharmaceutically acceptable compositions. The peptide combination can be used for the treatment or prevention of type 1 diabetes (TID). The invention also relates to a method for diagnosis or determination of therapeutic efficacy, and the method is combined with the specific peptide.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多肽组合物专利
本专利技术涉及一种肽组合，其可用于治疗或预防1型糖尿病(T1D)。专利技术背景1型糖尿病(T1D)是自身免疫性疾病，其特征在于代谢功能障碍、最为显著地葡萄糖代谢失调，伴有特征性长期血管和神经并发症。T1D是最常见的自身免疫性疾病之一，影响美国的250名个体中的一名，在美国每年报道大约10,000至15,000个新病例，并且发病率上升。T1D的最高患病率见于北欧。T1D的特征在于绝对胰岛素缺乏，从而使得患者依赖于外源性胰岛素而生存。在具有高血糖症的症状的T1D急性临床发作之前，存在长久无症状临床前时期，在所述时期期间产生胰岛素的β细胞进行性地毁坏。β细胞自身抗原、巨噬细胞、树突细胞、B淋巴细胞以及T淋巴细胞已经显示牵涉于自身免疫性糖尿病的发病机理中。β细胞自身抗原被视为自β细胞释放且由抗原呈递细胞加工并呈递至T辅助细胞(CD4+细胞)。原始CD4+T细胞可通过自抗原呈递细胞释放的白细胞介素(IL)-12活化。β细胞抗原特异性CD8+T细胞通过由活化的CD4+T细胞产生的IL-2活化，分化至细胞毒性T细胞中，且募集至胰岛中。这些活化的TH1CD4+T细胞以及CD8+细胞毒性T细胞牵涉于β细胞的破坏中。IL-2还活化B淋巴细胞以分泌胰岛细胞自身抗体。近年来，已鉴别胰岛细胞自身抗体所针对的若干自身抗原。这些自身抗原包括酪氨酸磷酸酶相关胰岛抗原2(IA-2)以及胰岛素、胰岛素原(PI)和前胰岛素原。一旦开始，就需要终身通过注射合成胰岛素来治疗，因为β细胞无法再生。一旦确定，糖尿病就对患者、患者家庭以及社会为重大负担。尽管胰岛素的现代配药、制剂和递送系统可将血糖维持在合理界限内，但经过若干年，疾病的并发症不可避免地出现。糖尿病的最常见严重并发症是肾衰竭、失明和神经功能丧失。糖尿病患者的寿命减少平均10岁。鉴于此背景，重要的是考虑治疗或预防T1D的新方式。T细胞IA-2表位已鉴别于HoneymanM等人(HoneymanM等人MolecularMedicine1998；4:231-239)；LohmannT等人(LohmannT等人ExpClinEndocrinolDiabetes1999；107(3):166-71)；McLaughlinKA等人(McLaughlinKA等人JImmunol2014；193:4448-56)；以及WeeninkSM等人(WeeninkSM等人,JAutoimmun2009；33:147-54)中。PI和/或IA-2肽也公开于US7049292、WO2005/073248、WO00/63702和WO2009/004315中。然而，本专利技术利用来自PI和IA-2两者的关键表位的新颖组合；和/或特定施用方案，其展现抗原特异性免疫疗法的优异效能以便限制为T1D的特征的PI/IA-2自身免疫性。专利技术概述在本专利技术的第一方面，提供一种肽组合，其包含：具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的肽；以及具有SEQIDNO:6的氨基酸序列的肽。SEQIDNO:1是IA-2的片段，其包含残基718-736。SEQIDNO:2是IA-2的片段，其包含残基752-775。SEQIDNO:3是IA-2的片段，其包含残基855-867。SEQIDNO:4是PI的片段，其包含残基C13-C32。SEQIDNO:5是PI的片段，其包含残基C19-A3。SEQIDNO:6是PI的片段，其包含残基C22-A5。本专利技术人已出人意料地发现，与更小数目的肽和替代性肽组合相比，此肽组合在限制抗PI和抗IA-2自身免疫性方面是优异的。出人意料地，还已证明，IA-2肽的不同组合在限制PI自身免疫性方面提供不同作用。当与其他肽组合相比时，本专利技术要求保护的肽组合具有优异效能。具体地说，本专利技术的肽组合展现跨抗原连锁性抑制，其在治疗利用时对于患者可具有显著益处。其允许来自有限数目的自身抗原的有限数目的肽用于靶向多种不同的自身免疫应答，所述应答在T1D中起一定作用。如本文所述，术语“肽”是指包含通过肽键或修饰的肽键(即，肽等排体)连接至彼此的氨基酸的任何肽。肽通常将含有天然存在的氨基酸，但可包括通过天然过程(诸如翻译后加工)或通过本领域中熟知的化学修饰技术而修饰的氨基酸序列。此类修饰充分描述于基本文本中。修饰可存在于肽中的任何地方，包括肽主链、氨基酸侧链和氨基或羧基末端。应了解，同一类型的修饰可以相同或不同程度存在于给定肽中的若干位点。此外，给定肽可含有许多类型的修饰。在一个优选实施方案中，肽组合不包含来自IA-2或PI的其他肽。优选地，所要求保护的肽组合包含本专利技术的确切序列且不包含IA-2或PI的较长片段或全长IA-2或PI。对本领域的技术人员将显而易见，本专利技术的肽组合可包含非肽组分，诸如如下文进一步论述的赋形剂，但其可能不包含任何额外肽、特别是来自IA-2或PI的肽。优选地，补足肽组合的肽是分离的肽。术语“分离的”是指肽自其原始环境移除。例如，存在于活动物中的肽未经分离，但自天然系统中的一些或全部共存物质分离的相同肽或这种肽的片段是分离的。此类肽可以是载体的一部分和/或肽可以是组合物的一部分，且仍经分离，因为这种载体或组合物不是其天然环境的一部分。在一个优选实施方案中，肽组合由以下各项组成：具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的肽；以及具有SEQIDNO:6的氨基酸序列的肽。在此优选实施方案中，肽组合仅包含具有特定所叙述序列的所叙述肽。本专利技术的第二方面涉及一种药学上可接受的组合物，其包含本专利技术的肽组合和一种或多种药学上可接受的赋形剂。优选地，药物组合物包含半胱氨酸。所述组合物内游离半胱氨酸的存在稳定化肽组合的肽形成链间二硫键且因此沉淀的任何趋势。所述药物组合物可包含1至5mgL-半胱氨酸/2mg肽组合，优选2至4mgL-半胱氨酸/2mg肽组合，且最优选2.5mgL-半胱氨酸/2mg肽组合。所述药物组合物可用于人或动物用途用于人和兽药物物中且通常将包含一种或多种合适的赋形剂。用于治疗用途的可接受赋形剂是药物领域中熟知的，且描述于例如Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCo.(A.R.Gennaro编1985)中。药物赋形剂的选择可关于预期施用途径和标准药物实践来选择。作为赋形剂或除赋形剂之外，药物组合物可包含任何合适的粘合剂、润滑剂、悬浮剂、包衣剂或增溶剂。防腐剂、稳定剂和染料可提供于药物组合物中。防腐剂的实例包括苯甲酸钠、山梨酸和对羟基苯甲酸的酯。还可使用抗氧化剂和悬浮剂。可存在取决于不同递送系统的不同组合物/制剂需求。例如，本专利技术的药物组合物可被配制为胃肠外递送，其中组合物以可注射形式配制，以用于通过例如静脉内、皮内、肌肉内、皮下或腹膜内途径递送。对于胃肠外施用，组合物可最优选以无菌水溶液的形式使用，所述无菌水溶液可含有其他物质，例如充足的盐或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肽组合，其包含：具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽；具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的肽；具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的肽；具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的肽；具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的肽；以及具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.10 GB 1510056.31.一种肽组合，其包含：具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的肽；以及具有SEQIDNO:6的氨基酸序列的肽。2.如权利要求1所述的肽组合，其由以下各项组成：具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的肽；具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的肽；以及具有SEQIDNO:6的氨基酸序列的肽。3.一种药学上可接受的组合物，其包含如权利要求1或权利要求2所述的肽组合和一种或多种药学上可接受的赋形剂。4.如权利要求3所述的药学上可接受的组合物，其还包含半胱氨酸。5.如权利要求3或4所述的药学上可接受的组合物，其用于治疗。6.如权利要求5所述的药学上可接受的组合物，其用于治疗或预防1型糖尿病(T1D)。7.如权利要求5所述的药学上可接受的组合物，其用于制造用于治疗或预防1型糖尿病(T1D)的药剂。8.如权利要求3至7中任一项所述的药学上可接受的组合物，其中所述组合物被配制为通过胃肠外、经口或局部途径递送，所述途径包括静脉内、皮内、肌肉内、皮下、腹膜内、经鼻、经口或经表皮途径。9.如权利要求8所述的药学上可接受的组合物，其中所述组合物被配制为通过皮内途径递送。10.一种治疗或预防1型糖尿病(T1D)的方法，其中向T1D患者或被鉴别为处于T1D高风险下的非糖尿病个体施用如权利要求3或4所述的药学上可接受的组合物。11.如权利要求10所述的治疗或预防方法，其中向具有β细胞质量剩余的患者施用本发明的所述药学上可接受的组合物。12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述药学上可接受的组合物通过胃肠外、经口或局部途径施用，所述途径包括静脉内、皮内、肌肉内、皮下、腹膜内、经鼻、经口或经表皮途径。13.如权利要求12所述的方法，其中所述药学上可接受的组合物通过皮内途径施用。14.一种用于治疗或预防1型糖尿病(T1D)的试剂盒，其包括如权利要求1或权利要求2所述的肽组合。15.一种诊断或确定治疗功效的方法，其包括：(a)提供来自疑似患有或易患T1D的个体的CD4淋巴细胞；(b)提供抗原呈递细胞(APC)群体，所述细胞在其表面上携带具有与由所述个体表达的等位基因相同的等位基因的II类MHC分子，所述APC群体已与如权利要求1所述的肽组合接触，并且所述II类MHC分子结合至如权利要求1所述的肽组合中的所述肽中的一种或多种；或(c)提供可溶性肽-HLA多聚体试剂，其包含具有与由所述个体表达的等位基因相同的等位基因的II类MHC分子，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·皮克曼，
申请(专利权)人：伦敦国王学院，
类型：发明
国别省市：英国,GB