一种微量多肽化学衍生体系及衍生方法技术

本发明专利技术提供了一种微量多肽化学衍生体系，该体系由置于Eppendorf枪头中的、由上至下的三层填料层组成；其中，最上层的填料为反相硅胶，中间层的填料为磺酸基阳离子交换键合硅胶，最下层的填料为反相硅胶。本发明专利技术还提供了所述微量多肽化学衍生体系的制备方法，以及应用所述微量多肽化学衍生体系进行多肽正电荷衍生的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及多肽分析领域，具体涉及一种微量多肽化学衍生体系及该体系的制备方法，还涉及利用该微量多肽化学衍生体系进行多肽正电荷衍生的方法。
技术介绍
在质谱(Mass Spectrometry, MS)技术中，串联质谱(MS/MS)可用于获得目标物质结构的碎片，从而对目标物质进行结构分析。目前，通过液相色谱-串联质谱联用系统(LC-MS/MS)可以很容易地分离与裂解复杂的多肽混合物，从而进行蛋白质的结构分析。数据库检索法是使用串联质谱进行蛋白质结构分析时的常规方法。该方法是从特定的蛋白质数据库中提取目标物质所有的肽段序列，并将它们与串联质谱所得谱图进行比较和打分，找到可能性最大的肽段序列。但是，对于基因组未测序的物质，由于无法建立相应的蛋白质数据库，常规的数据库检索方法无法获得可以与质谱谱图进行比较分析的多肽序列。多肽从头测序技术通过串联质谱谱图上碎片离子之间的质量差得到对应的氨基酸残基，可得到所有物种的肽段序列及翻译后修饰，无需借助蛋白质数据库进行检索和比较即可对多肽序列进行鉴定。多肽从头测序有着很大的发展潜力，但是目前低可信度的鉴定结果限制了该技术的广泛应用。这种低可信本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微量多肽化学衍生体系，该体系由置于Eppendorf枪头中的、由上至下的三层填料层组成；其中，最上层的填料为反相硅胶，中间层的填料为磺酸基阳离子交换键合硅胶，最下层的填料为反相硅胶。

【技术特征摘要】
1.一种微量多肽化学衍生体系，该体系由置于Eppendorf枪头中的、由上至下的三层填料层组成；其中，最上层的填料为反相硅胶，中间层的填料为磺酸基阳离子交换键合硅胶，最下层的填料为反相硅胶。2.根据权利要求1所述的化学衍生体系，其特征在于，各填料层的厚度为3?5mm。3.根据权利要求1所述的化学衍生体系，其特征在于，各填料的粒径为3?10μ m。4.根据权利要求1所述的化学衍生体系，其特征在于，所述反相硅胶选用C8或C18，优选为c8。5.根据权利要求1所述的化学衍生体系，其特征在于，所述Eppendorf枪头为实验室常用Eppendorf枪头，规格为200 μ I。6.权利要求1所述微量多肽化学衍生体系的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤: 1)将一片直径为I?2mm的特氟龙薄膜水平放置到Eppendorf枪头底部； 2)将反相硅胶悬浊液缓慢加入特氟龙薄膜之上，进行离心，最下层即得； 3)将磺酸基阳离子交换键合硅胶悬浊液缓慢加入步骤2)所得最下层之上，进行离心，中间层即得； 4)将反相硅胶悬浊液缓慢加入步骤3)所得中间层之上，进行离心，微量多肽化学衍生体系即得； 其中，各离心步骤的离心机转速为1000 X g，离心时间为5min。7.一种应用权利要求1所述微量多肽化学衍生体系进行多肽正电荷衍生的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤: I)衍生体系的平衡；2)样品与正电荷衍生试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：纪建国，王青松，安明瑞，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京;11