一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法技术

技术编号:17589102 阅读:66 留言:0更新日期:2018-03-31 05:03
一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法,将益生乳杆菌接入益生乳杆菌增菌培养基中恒温培养后离心,收集菌体沉淀得益生乳杆菌菌泥;向益生乳杆菌菌泥中添加磷酸缓冲液,保温离心得胞壁蛋白酶的酶液,向脱脂后鲜羊奶中加入益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和CaCl2酶解,离心将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜,收集透过液并将其经Bio‑gel P2分离,收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽。本发明专利技术以羊乳为原料,GRAS微生物——益生乳杆菌的胞壁蛋白酶为生物催化剂,将羊乳中的蛋白质水解成具有降血压活性的寡肽,其可用于辅助降血压食品和保健食品的开发,与化学合成降压药相比,羊乳源降压肽具有天然、安全、无副作用等优点。

A method for preparation of antihypertensive peptides by probiotic lactobacillus milk protein system

A method for preparation of antihypertensive peptides by probiotic lactobacillus milk protease system, probiotic Lactobacillus will access lacto Bacillus bacteria culture medium temperature after centrifugation, cells were collected and precipitation of probiotic Lactobacillus bacteria sludge; adding phosphate buffer to probiotic Lactobacillus bacteria in the mud, holding from the cell wall proteinase enzyme experience adding probiotic Lactobacillus, cell wall proteinase bacteria powder and CaCl2 enzyme to skim fresh goats'milk solution, centrifuging supernatant by truncating the molecular weight of 2000Da hollow fiber membrane, collected through liquid and the Bio gel P2 separation, collected by freeze drying to obtain peak milk antihypertensive peptides. The present invention in goat milk as raw material, microbial cell wall proteinase GRAS - lacto Bacillus as biocatalyst, the hydrolysis of protein in goat milk into oligopeptide with antihypertensive activity, which can be used to assist the development of food and health food for lowering blood pressure, compared with the chemical synthesis of antihypertensive drugs, antihypertensive peptides of Ruyuan sheep with natural and safe no side effects, etc..

【技术实现步骤摘要】
一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法
本专利技术涉及一种降压肽的制备方法,特别涉及一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法。
技术介绍
陕西省是我国传统的奶山羊主产区,关中地区是全国最大的奶山羊良种生产基地。2015年底全省奶山羊存栏180万多只,羊乳产量50万余吨,羊奶粉市场份额达95%以上,奶山羊数量、羊乳产量及羊奶粉产量均为全国第一,但国内羊乳产品的品种少,主要为羊奶粉及液态羊奶,其中大部分羊奶粉作为工业原料销往国外,存在产品科技含量低、附加值不高及同质化严重等问题,国外羊乳产品种类多,主要包括发酵羊乳产品(如奶酪、脱脂酪乳或酸羊奶)、冷冻产品(如冰激凌或冷冻酸羊奶)、液态奶、黄油、功能性羊奶片等。因此,开发羊乳新产品很有必要。高血压是世界最常见的慢性病,是最大的流行病之一,也是心脑血管病最主要的危险因素。常用降压药物包括钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体阻滞剂(ARB)、利尿剂、α受体阻滞剂和β受体阻滞剂六类,其中血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对于高血压患者具有良好的靶器官保护和心血管终点事件预防作用,且降压作用明确,对糖脂代谢无本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法,其特征在于:1)益生乳杆菌增菌培养基制备:将葡萄糖15‑20g、酵母浸粉15‑25g、硫酸锰0.02‑0.05g、吐温80 0.5‑1.0mL,拐枣多糖1.0‑1.5g、菊糖1.0‑1.5g、酪蛋白胨4‑6g、磷酸氢二钠4‑6g、亮氨酸15‑20mg添加到纯净水中,定容至1L,再将其pH调至5.5‑7.0,于121℃灭菌,即得益生乳杆菌增菌培养基;2)益生乳杆菌培养及菌体收集:将益生乳杆菌按2%‑5%的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中,35‑41℃恒温培养18‑24h后离心,倒掉上清液,收集菌体沉淀,之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥;...

【技术特征摘要】
1.一种利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法,其特征在于:1)益生乳杆菌增菌培养基制备:将葡萄糖15-20g、酵母浸粉15-25g、硫酸锰0.02-0.05g、吐温800.5-1.0mL,拐枣多糖1.0-1.5g、菊糖1.0-1.5g、酪蛋白胨4-6g、磷酸氢二钠4-6g、亮氨酸15-20mg添加到纯净水中,定容至1L,再将其pH调至5.5-7.0,于121℃灭菌,即得益生乳杆菌增菌培养基;2)益生乳杆菌培养及菌体收集:将益生乳杆菌按2%-5%的接种量接入益生乳杆菌增菌培养基中,35-41℃恒温培养18-24h后离心,倒掉上清液,收集菌体沉淀,之后用无菌生理盐水洗涤后离心得到益生乳杆菌菌泥;3)益生乳杆菌胞壁蛋白酶制备:按每g益生乳杆菌菌泥中添加20-30mL磷酸缓冲液,在35-45℃保温1-2h后离心所得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液,采用1-3KDa超滤去除小分子物质,然后在保留液中添加CaCl2,控制CaCl2的浓度为8-15mM,冷冻干燥获得益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉;4)羊乳源降压肽的制备:将鲜羊奶经脱脂后调节pH值至6.0-8.0,按质量体积比向其中加入1-3%的益生乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01-0.04%的CaCl2,于35-45℃下酶解2-4h后调节酶解液pH值至4.6,离心将上清液通过截断分子量为2000Da的中空纤维膜,收集透过液并将其经Bio-gelP2分离,收集主峰经冷冻干燥获得羊乳降压肽,其对ACE抑制的IC50值为0.16-0.25mg/mL,产量为0.48-0.60g/100g羊乳。2.根据权利要求1所述的利用益生乳杆菌蛋白酶制备羊乳降压肽的方法,其特征在于:所述步骤2)的益生乳杆菌采用保加利亚乳杆菌、罗伊式乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的一种或...

【专利技术属性】
技术研发人员:舒国伟梅莎蒋富凤陈合
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:陕西,61

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