内皮细胞YAP和STAT3相互结合在促进内皮细胞血管新生中的应用制造技术

本发明专利技术公开了内皮细胞YAP和STAT3相互结合在促进内皮细胞血管新生中的应用。本发明专利技术提供了YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；本发明专利技术发现了调控血管新生的关键靶点，即内皮细胞中YAP与STAT3的结合，通过干预两个蛋白的结合可以抑制血管新生，对于缺血性疾病、血管发育异常的疾病如肿瘤等的治疗都有指导意义。

The application of YAP and STAT3 in endothelial cells to promote endothelial cell angiogenesis

The invention discloses the application of the combination of endothelial cells YAP and STAT3 in promoting endovascular neovascularization. The present invention provides a YAP protein and STAT3 protein interaction in the preparation of promoting the application of animal or human angiogenesis in the product; or YAP protein and STAT3 protein combined in the preparation of extended STAT3 in nuclear retention products; or a combination of YAP and STAT3 protein in each preparation to improve application of target gene transcription activity the product of STAT3 in the nucleus of the invention; found the key target for the regulation of angiogenesis, which is the combination of YAP and STAT3 in endothelial cells, by combining the intervention of two proteins can inhibit angiogenesis, has guiding significance for the treatment of ischemic vascular disease, abnormal development of diseases such as cancer.

【技术实现步骤摘要】
内皮细胞YAP和STAT3相互结合在促进内皮细胞血管新生中的应用
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种内皮细胞YAP和STAT3相互结合在促进内皮细胞血管新生中的应用。
技术介绍
血管是哺乳动物体内遍布全身的重要结构，它与心脏共同构成了体内闭合的循环管道——心血管系统。血管承载血液，运送血液中氧气和营养物质至全身各个组织器官，并将二氧化碳和代谢终产物带回心脏，因此血管作为血液运送的管道，是生命赖以维持的重要器官。新血管的生成参与到从胚胎发育到组织损伤修复、癌症发生发展等一系列正常生理及病理生理过程之中。新血管生成可以分为血管新生(angiogenesis)和血管生成(vasculogenesis)。血管新生是指从已存在的微血管内皮细胞出芽形成新生血管的过程，而血管生成是指由血管祖细胞直接形成血管结构的过程。另外，从已有侧枝动脉经过扩张和肌性重塑发展为动脉血管的过程，称为动脉生成(arteriogenesis)。内皮细胞是在血管内壁紧密排列的单层细胞，内皮细胞一旦受到促血管新生的因素刺激，便可以转变激活成为具有增殖和迁移能力的表型的内皮细胞参与血管新生过程。血管内皮生长因子A(VascularendothelialgrowthfactorA，VEGF-A；以下简称VEGF)，作为血管内皮生长因子家族成员之一，是在胚胎发育以及成年个体血管新生中有着至关重要作用的调控因子。内皮细胞一旦受到VEGF的刺激，便可以转变为顶细胞，从静息的血管中迁移出来，并募集大量的茎细胞形成血管芽，继而进一步发展成为血管。VEGF信号通路在内皮细胞中调控各级信号分子，形成复杂的分子调控网络，有序地调控内皮细胞功能。Hippo/YAP通路是通过影响细胞存亡、增殖等功能在发育过程中调控器官大小的重要信号通路。YAP蛋白作为转录共激活因子，是Hippo通路中最为重要的效应元件。YAP蛋白本身不具有DNA结合结构域，因此其需要与其他转录因子结合，发挥其转录调控作用。目前，已知可以和YAP结合的转录因子包括TEAD家族、受体酪氨酸蛋白激酶ErbB4、Runt相关转录因子2和p73等。Hippo通路可以通过改变YAP磷酸化水平进而影响YAP蛋白在细胞中的分布，从而起到调控下游目的基因的转录激活以及改变细胞功能的作用。最近研究指出血管内皮钙粘蛋白(vascularendothelialcadherin，VE-cadherin)介导的内皮细胞连接可以改变YAP蛋白磷酸化水平并抑制其转录活性，导致内皮细胞中血管生成素-2(angiopoietin-2，ANG2)表达水平降低，由此抑制血管新生过程。除此之外，血管新生还受到许多其他作用因素的影响，其中炎症因子在许多病理状态下可以通过增加血管通透性导致内皮细胞激活表达VEGF等促血管新生的因子，进而导致病理性的血管新生。趋化因子(C-C基序)配体2和白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)可以诱导VEGF表达，说明炎症因子可以与VEGF协同调控血管新生过程。信号转导和转录激活因子3(Signaltransducerandactivatoroftranscription3，STAT3)是IL-6通路下游的转录因子，其作为信号转导和转录激活因子家族成员，在IL-6的作用下磷酸化而激活，进入细胞核中发挥其转录因子的作用。最近研究表明，STAT3在血管新生过程中同样有着重要作用。内皮细胞特异性缺失STAT3的小鼠在中风或者心肌梗死后出现血管新生抑制表型，同时伴随着内皮细胞增殖和迁移能力下降。另外，VEGF和IL-6抑制剂的协同给药比单独给药的抑制效果更为明显，说明血管内皮生长因子和IL-6共同调控血管新生这一重要的生理过程。成人体内血管新生不仅在诸如缺血后组织修复、伤口愈合等病理生理过程中起着重要作用，而且在癌症发生发展、慢性炎症性疾病、糖尿病视网膜病变和动脉粥样硬化等疾病中扮演关键角色。因此，研究血管新生过程的调控机制及治疗对血管新生相关的疾病是非常重要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的用途。本专利技术提供的YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备削弱细胞核内CRM1和STAT3结合产品中的应用。本专利技术另一个目的是提供促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质的用途。本专利技术提供的促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备削弱细胞核内CRM1和STAT3结合产品中的应用。上述促进YAP蛋白和STAT3蛋白在细胞核内相互结合的物质为刺激YAP蛋白入核的物质和刺激STAT3蛋白入核的物质，具体刺激YAP蛋白入核的物质为VEGF、刺激STAT3蛋白入核的物质为IL-6等。上述应用中，所述YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合为YAP蛋白和STAT3蛋白在细胞核内相互结合。上述应用中，所述提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性为提高STAT3在细胞核内的转录血管新生相关基因活性；上述应用中，所述血管新生相关基因为ADM、ANGPLT4、CDKN1B、EPAS1和/或ANG2。上述应用中，所述细胞为动物或人的内皮细胞。上述应用中，所述促进动物或人血管新生是通过提高STAT3在细胞核内的转录血管新生相关基因活性实现的；所述提高STAT3在细胞核内的转录血管新生相关基因活性是通过延长STAT3在细胞核滞留实现的；所述延长STAT3在细胞核滞留是通过削弱CRM1和STAT3细胞核内结合实现的；所述削弱CRM1和STAT3细胞核内结合是通过YAP蛋白和STAT3蛋白细胞核内相互结合实现的。上述应用中，所述YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合为YAP蛋白SH3结合结构域和STAT3蛋白的第656-680位的氨基酸相互结合；所述YAP蛋白SH3结合结构域为所述YAP蛋白氨基酸序列第278-290位氨基酸。阻断或抑制YAP蛋白与STAT3蛋白结合的物质在制备抑制VEGF或IL-6诱导内皮细胞迁移和/或成管功能产品中的应用也是本专利技术保护的范围。本专利技术第3个目的是提供一种产品。本专利技术提供的产品，包括促进YAP蛋白和STAT3蛋白细胞核中相互结合的物质或YAP蛋白和STAT3蛋白；所述产品具有如下1)-4)中任一种功能：1)促进动物或人血管新生；2)延长STAT3在细胞核滞留；3)提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性；4)削弱细胞核内CRM1和STAT3结合。本研究旨在阐明在复杂环境因素下，血管新生过程的调控机制，以期为治疗有血管新生参与的疾病提供新的治疗思路和潜在靶点。为研究Hippo/YAP通路在血管新生中的作用，使用人类本文档来自技高网...

【技术保护点】
YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备削弱细胞核内CRM1和STAT3结合产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；或YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合在制备削弱细胞核内CRM1和STAT3结合产品中的应用。2.促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备促进动物或人血管新生产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备延长STAT3在细胞核滞留的产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性产品中的应用；或促进YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合的物质在制备削弱细胞核内CRM1和STAT3结合产品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述YAP蛋白和STAT3蛋白相互结合为YAP蛋白和STAT3蛋白在细胞核内相互结合。4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于：所述提高STAT3在细胞核内的转录目的基因活性为提高STAT3在细胞核内的转录血管新生相关基因活性。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述血管新生相关基因为ADM、ANGPLT4、CDKN1B、EPAS1和/或ANG2。...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱毅，艾玎，何金龙，姚柳，
申请(专利权)人：天津医科大学，
类型：发明
国别省市：天津,12