尿液外泌体内源性质量监控体系制造技术

本发明专利技术提供了一个新型的尿液外泌体内源性质量检测及监控系统，可对尿液样本和整个检测环节进行质量监控，以保证基于尿液外泌体临床诊断结果的可靠性。EEF1A1是尿液外泌体中丰度相对较高的内源性基因，其与尿液外泌体的相关性最好，呈显著正相关；并且在相同外泌体颗粒数下，EEF1A1表达的稳定性最好；此外，EEF1A1的表达差异只与尿液外泌体的数量有关，与尿液收集部分、不同性别人群、其他泌尿系统疾病等无关。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医学检验检测，具体涉及尿液外泌体相关基因的筛选和鉴定，以及内源性质控基因的确定和尿液外泌体质量监测系统的建立。

技术介绍

1、外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡结构，其广泛存在于唾液、血液、尿液等生物液体中，并且其表面和内部携带有亲本细胞来源的核酸、脂质、蛋白质等各种生物信息分子，可用于疾病的诊断和预后评估。

2、尿液作为人体正常的代谢产物，与血液相比，成分相对单一，易采集且对病人无创伤，是一种理想的无创诊断体液来源。而尿液中外泌体自2004年发现以来，已展示出其作为临床疾病无创诊断工具的巨大潜力，基于尿液外泌体的各种诊断产品也相继面世。其中，美国exosomedx公司于2018年建立了基于尿液外泌体的前列腺癌辅助诊断测试（epi），已累积超过30,000例受试者，可减少至少27%的非必要前列腺穿刺活检。然而，针对尿液外泌体作为检测对象，缺乏相应准确的质量检测及监测系统。例如被fda批准的epi诊断试剂盒，采用外源添加噬菌体的方式，实现对整个尿液检测系统的质量控制，而外源添加物无法对尿液外泌体的质量和动态变化进行实时质量监控。目前，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.EEF1A1基因在制备基于尿液外泌体的疾病诊断质控试剂的用途，所述EEF1A1的mRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述疾病诊断质控试剂为检测样品中EEF1A1基因拷贝数的试剂。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述EEF1A1基因与SPDEF基因联用，所述SPDEF的mRNA核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述疾病为前列腺相关疾病。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述诊断质控试剂为检测样品中EEF1A1基因拷贝数的试剂和检测样品中SPDEF基因拷贝数的试剂。<...

【技术特征摘要】

1.eef1a1基因在制备基于尿液外泌体的疾病诊断质控试剂的用途，所述eef1a1的mrna的核苷酸序列如seq id no：1所示。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述疾病诊断质控试剂为检测样品中eef1a1基因拷贝数的试剂。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述eef1a1基因与spdef基因联用，所述spdef的mrna核苷酸序列如seq id no：2所示，所述疾病为前列腺相关疾病。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述诊断质控试剂为检测样品中eef1a1基因拷贝数的试剂和检测样品中spdef基因拷贝数的试剂。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述检测样品中eef1a1基因拷贝数的试剂包括如seq id no：17和seq id no：18所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：19所示的taqman探针；或如seq id no：20和seq id no：21所示的检测引物和核苷酸序列如seq idno：22所示的taqman探针；或如seq id no：23和seq id no：24所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no:25所示的taqman探针。

6.根据权利要求4所述的用途，所述检测样品中spdef基因拷贝数的试剂包括如seq idno：62和seq id no：63所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：64所示的taqman探针；或如seq id no：65和seq id no：66所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：67所示的taqman探针；或如seq id no：68和seq id no：69所示的检测引物和核苷酸序列如seq idno:70所示的taqman探针。

7.一种基于尿液外泌体的疾病诊断质控装置，其特征在于，包括检测样品中eef1a1基因拷贝数的试剂，所述eef1a1的mrna的核苷酸序列如seq id no：1所示。

8.根据权利要求7所述的装置，所述检测样品中eef1a1基因拷贝数的试剂包括如seqid no：17和seq id no：18所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：19所示的taqman探针；或如seq id no：20和seq id no：21所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：22所示的taqman探针；或如seq id no：23和seq id no：24所示的检测引物和核苷酸序列如seq idno:25所示的taqman探针。

9.根据权利要求7或8所述的装置，其特征在于，包括依次设置在主路上的质控检测单元和可靠质控结果输出单元。

10.根据权利要求9所述的装置，其特征在于，所述质控检测单元检测样品中eef1a1的基因拷贝数< 1×10^4.12时输出第一支路。

11.根据权利要求9所述的装置，其特征在于，所述质控检测单元检测样品中eef1a1的基因拷贝数≥1×10^4.92时输出至主路下游的可靠质控结果输出单元。

12.根据权利要求7所述的装置， 其特征在于，还包括检测样品中spdef基因拷贝数的试剂，所述spdef的mrna的核苷酸序列如seq id no：2所示，所述疾病为前列腺相关疾病。

13.根据权利要求12所述的装置，所述检测样品中spdef基因拷贝数的试剂包括如seqid no：62和seq id no：63所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：64所示的taqman探针；或如seq id no：65和seq id no：66所示的检测引物和核苷酸序列如seq id no：67所示的taqman探针；或如seq id no：68和seq id no：69所示的检测引物和核苷酸序列如seq idno:70所示的taqman探针。

14.根据权利要求12或13所述的装置，其特征在于，包括依次设置在主路上的质控检测单元和可靠质控结果输出...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹海芳，邱帅，李悦，陈傲，闫志，韩刚，
申请(专利权)人：天津医科大学，
类型：发明
国别省市：